Biology

El estudio de la agresión en Drosophila (mosca de la fruta)

Published: February 25, 2007 doi: 10.3791/155

Sibu Mundiyanapurath¹, Sarah Certel¹, Edward A. Kravitz¹

¹Department of Neurobiology, Harvard Medical School

Summary

Abstract

La agresión es una conducta innata que se desarrolló en el marco de la defensa o la obtención de recursos. Este comportamiento social complejo está influenciada por factores genéticos, hormonales y ambientales. En muchos organismos, la agresión es fundamental para la supervivencia, pero la agresión el control y represión en diferentes contextos también se ha convertido cada vez más importante. En los últimos años, los invertebrados se han convertido en cada vez más útiles como sistemas modelo para investigar la base biológica genética y los sistemas de comportamiento social complejo. Esto se debe en parte al repertorio diverso de comportamientos exhibidos por estos organismos. En el video que lo acompaña, se describe un método para el análisis de la agresión en Drosophila, cuyo diseño incluye importantes eco-etológicas limitaciones. Los detalles incluyen medidas para: hacer una cámara de combate, aislamiento y pintura de las moscas, las moscas de la adición a la cámara de lucha y combate la filmación en vídeo. Este enfoque está siendo utilizado para identificar genes candidatos importantes en la agresión y en la elaboración de los circuitos neuronales que subyace a la salida de la agresión y otras conductas sociales.

Protocol

1. Montaje de la paredes de la cámara

Tome dos láminas de vidrio plano, marca la mitad en los dos extremos y con una regla recta filo como una guía, la puntuación de la copa con el cortador de diamantes.
Deslice el cortador de diamantes de ida y vuelta varias veces hasta que escuche un chirrido.
Lavar el vaso, y sujetándolo con dos toallas de papel en un recipiente de vidrio roto, se aplican cerca de una leve presión sobre la línea marcada con el lado marcado
de espaldas a usted a romper la diapositiva en dos mitades.
Generosamente aplicar el adhesivo de vidrio a lo largo de un borde de un pedazo de vidrio y empujar una segunda pieza de vidrio contra el adhesivo en ángulo recto a la primera pieza. Coloque sobre una superficie plana (papel de aluminio, papel encerado o de papel normal) y permita que se asiente durante por lo menos una hora.
Después de una hora, repetir la aplicación de la etapa de adhesivo para formar una cámara cuadrada y deje que endurezca durante la noche.

2. La colocación de las paredes de una placa de Petri

Tome la parte superior de una placa de Petri y relleno a una profundidad de al menos 5 mm con una solución caliente de agarosa al 2% (de microondas de la agarosa en agua destilada hasta que se disuelva completamente).
Espere unos minutos, pero al mismo tiempo disuelto, el lugar de las paredes de la cámara en el centro del plato. Tome la parte inferior de la placa de Petri, lugar que parte de abajo hacia arriba. Usando una aguja calentada al fuego directo de disección, hacer una serie de pequeños agujeros (> 1 mm) en el centro del plato para la ventilación. Hacer un agujero más grande (~ 4 mm de diámetro) ligeramente hacia un lado para la introducción de moscas de la cámara. Coloque un pedazo de cinta de etiquetas removibles sobre el agujero más grande.

3. Hacer la copa de alimentos

Calentar un frasco de comida volar hasta el punto donde se funde la comida. Use una pipeta Pasteur para la transferencia de alimentos a un cierre vial de centelleo de relleno para formar una superficie plana en la parte superior. Tenga cuidado para evitar burbujas de aire y deje que se enfríe.
Preparar la pasta de levadura fresca de molienda de una pequeña cantidad de levadura seca y unas gotas de agua en un mortero. Agregar más levadura o el agua hasta que la consistencia es lo suficientemente gruesa como para permitir una caída visible pequeños para ser recogido por un palillo de dientes y se aplica al centro de la superficie del alimento.
Coloque el vial de alimentos en el centro de la cámara y coloque la parte inferior de la placa de Petri, en posición invertida para que los lados son y no entorpecer la visión, en la parte superior de la cámara. Introducir dos 3-5 moscas de un día por la aspiración a la cámara a través del agujero más grande en la parte superior. Cubrir el agujero con cinta adhesiva y coloque un trozo de papel de filtro negro con un corte de 2 cm agujero en el plato superior.
Coloque una lámpara de escritorio encima de la cámara, lo suficientemente lejos para que no se calienta en la cámara, y de modo que se ilumina la superficie del alimento. Todo el conjunto ideal debe ser colocado en un ambiente con alta humedad y una temperatura de 22-25 º C.