Biology

Studiare Aggressione in Drosophila (moscerino della frutta)

Published: February 25, 2007 doi: 10.3791/155

Sibu Mundiyanapurath¹, Sarah Certel¹, Edward A. Kravitz¹

¹Department of Neurobiology, Harvard Medical School

Summary

Abstract

L'aggressività è un comportamento innato che si sono evoluti nel quadro di difesa o di ottenimento di risorse. Questo comportamento sociale complesso è influenzato da fattori genetici, ormonali e ambientali. In molti organismi, l'aggressività è fondamentale per la sopravvivenza, ma l'aggressione di controllo e di repressione anche in contesti diversi è diventato sempre più importante. Negli ultimi anni, gli invertebrati sono diventati sempre più utile come sistema modello per studiare le basi genetiche e di sistemi biologici complessi di comportamento sociale. Ciò è in parte dovuto al vasto repertorio di comportamenti esibiti da questi organismi. Nel video che accompagna, ci delineano un metodo per analizzare l'aggressione in Drosophila la cui progettazione comprende importanti eco-etologiche vincoli. Dettagli includono provvedimenti per: fare una camera di combattimento, isolare e pittura mosche; aggiungendo vola alla camera di lotta e combatte riprese video. Questo approccio è attualmente utilizzato per identificare i geni candidati importanti aggressione a definire il circuito neuronale che sottende l'uscita di aggressione e di altri comportamenti sociali.

Protocol

1. Assemblare le pareti della camera

Prendete due lastre di vetro semplice, segnare il centro alle due estremità e con un righello taglio dritto come una guida, il punteggio del vetro con il tagliatore di diamanti.
Far scorrere il tagliatore di diamanti avanti e indietro un paio di volte fino a sentire un rumore di raschiamento.
Lavare il vetro, e tenendolo con due asciugamani di carta in un recipiente di vetro rotto, applicare una leggera pressione vicino alla linea segnata con il lato segnato
rivolto verso di voi per rompere il vetrino in due metà.
Generosamente applicare l'adesivo di vetro lungo un bordo di un pezzo di vetro e spingere un secondo pezzo di vetro contro l'adesivo ad angolo retto rispetto al primo pezzo. Posto in giù su una superficie piana (fogli di alluminio, carta cerata o carta normale) e lasciare riposare per almeno un'ora.
Dopo un'ora, ripetere l'applicazione del passo adesivo per formare una camera quadrata e lasciare indurire durante la notte.

2. Ponendo le pareti in una capsula di Petri

Prendere la cima di una piastra di Petri e riempire fino ad una profondità di almeno 5 mm con una soluzione riscaldata di agarosio al 2% (microonde l'agarosio in acqua deionizzata fino a quando non si scioglie completamente).
Attendere qualche minuto, ma pur disciolto, posto le pareti della camera, nel centro del piatto. Prendere la parte inferiore della scatola di Petri, posto che parte dal basso. Utilizzando una fiamma riscaldato ago diritto dissezione, crea una serie di piccoli fori (> 1mm) al centro del piatto per la ventilazione. Fare un buco più grande (~ 4 mm di diametro) leggermente di lato per introdurre vola alla camera. Posizionare un pezzo di nastro etichetta removibile sul buco più grande.

3. Rendere la coppa cibo

Scaldare una fiala di cibo volare fino al punto in cui si scioglie il cibo. Utilizzare una pipetta Pasteur trasferire cibo alle chiusure flaconcino al scintillazione riempiendolo per formare una superficie piana in alto. Attenzione ad evitare bolle d'aria e lasciare raffreddare.
Fai la pasta fresca lievito dalla macinazione di una piccola quantità di lievito secco e qualche goccia d'acqua in un mortaio e pestello. Aggiungere più lievito o acqua fino a quando la consistenza è abbastanza spessa da permettere una piccola goccia visibile per essere raccolti da uno stuzzicadenti e applicato al centro della superficie degli alimenti.
Mettere il flaconcino di cibo nel centro della camera e posizionare la parte inferiore della scatola di Petri, invertito in modo che i lati sono fino e non oscurare la vista, in cima alla camera. Introdurre due 3-5 vola giorno di vita per aspirazione nella camera attraverso il foro più in alto. Coprire quel buco con nastro adesivo e posizionare un pezzo di carta da filtro nero con un taglio di 2 fori cm è nel piatto superiore.
Inserire una lampada da tavolo sopra la camera, abbastanza lontano che non il calore della camera, e posizionati in modo che possa illuminare la superficie del cibo. L'intera assemblea dovrebbe essere idealmente collocato in un ambiente con elevata umidità e una temperatura di 22-25 ° C.