Summary
Abstract
תוקפנות היא התנהגות מולדת שהתפתחה במסגרת של הגנה או השגת משאבים. התנהגות זו חברתיים מורכבים מושפעת, גורמים גנטיים הורמונליים וסביבתיים. באורגניזמים רבים, תוקפנות היא קריטית להישרדות אך תוקפנות שליטה דיכוי בהקשרים שונים גם הפך חשוב יותר ויותר. בשנים האחרונות, הפכו חסרי חוליות שימושי יותר ויותר מערכות מודל לחקר הבסיס הביולוגי גנטי מערכות של התנהגות חברתית מורכבת. מדובר בין השאר בשל ברפרטואר מגוון של התנהגויות הוצגו על ידי אורגניזמים אלה. בסרטון המצורף, ואנחנו מתאר שיטה לניתוח תוקפנות תסיסנית אשר כוללת עיצוב חשוב לסביבה אתולוגי אילוצים. פרטים כוללים שלבים: יצירת תא הלחימה; בידוד ציור זבובים; הוספת זבובים לחדר להילחם, מקליטה קרבות וידאו. גישה זו נמצאת בשימוש כדי לזהות גנים מועמדים חשוב תוקפנות בתוך לפרט את המעגלים עצבי בבסיס פלט של תוקפנות והתנהגויות חברתיות אחרות.
Protocol
1. הרכבת קירות החדר
- קחו שתי שקופיות זכוכית רגיל, לסמן את אמצע בשני הקצוות בעזרת סרגל ישר קצוות כמדריך, הציון זכוכית עם חותך היהלומים.
- החלק את חותך יהלומים הלוך ושוב כמה פעמים עד שתשמע רעש גירוד.
- לשטוף את הזכוכית, מחזיק אותו עם שתי מגבות נייר על קיבול זכוכיות שבורות, לסגור להחיל לחץ עדין על הקו קלע עם הצד הבקיע
מול ממך לשבור את השקופית לשני חצאים. - בנדיבות להחיל את דבק זכוכית לאורך קצה של חתיכה אחת של זכוכית לדחוף חתיכת זכוכית נגד השני של דבק בזווית ישרה אל היצירה הראשונה. מניחים על משטח שטוח (רדיד אלומיניום, נייר שעווה או נייר רגיל) ומאפשרים להגדיר במשך שעה לפחות.
- אחרי שעה, לחזור את היישום של השלב דבק כדי ליצור תא רבוע ולאפשר להקשיח לילה.
2. הצבת קירות בצלחת פטרי
- קח את החלק העליון של צלחת פטרי ולמלא עד לעומק של 5 מ"מ לפחות עם פתרון מחומם agarose של 2% (במיקרוגל agarose במים deionized עד שזה נמס לגמרי).
- המתן מספר דקות, אך בזמן מומס עדיין, במקום קירות של חדר במרכז המנה. קחו את החלק התחתון של צלחת פטרי, למקם אותו בצד מלמטה למעלה. באמצעות מחט להבה מחומם ישר לנתח, לעשות סדרה של חורים קטנים (> 1mm) במרכז צלחת לאוורור. עושים חור גדול (~ בקוטר 4 מ"מ) מעט לצד מציגה זבובים לחדר. מניחים חתיכת סרט נשלף התווית מעל החור הגדול.
3. ביצוע כוס מזון
- מחממים בקבוקון של אוכל לטוס עד לנקודה שבה האוכל הוא נמס. השתמש פיפטה פסטר להעביר מזון בקבוקון סגרים scintillation ממלא אותו כדי ליצור משטח ישר בראש. היזהר, כדי למנוע בועות אויר להתקרר.
- הפוך את הדבק שמרים טריים על ידי שחיקה כמות קטנה של שמרים יבשים כמה טיפות של מים במכתש ועלי. הוספת שמרים או יותר מים עד שהתערובת סמיכה מספיק כדי לאפשר ירידה לעין קטן להיות נטל על ידי קיסם ויישומי למרכז השטח מזון.
- מניחים את הבקבוקון של מזון במרכז החדר ואת המקום התחתון של צלחת פטרי, הפוכה כך הצדדים הם למעלה ולא מסתיר את הנוף, על גבי החדר. להציג שני 3-5 זבובים ישנים יום על ידי השאיפה אל תוך החדר דרך חור גדול בראש. כיסוי זה חור עם קלטת מקום פיסת נייר פילטר שחור עם קיצוץ של 2 ס"מ חור לתוך צלחת העליון.
- מניחים מעל מנורת השולחן החדר, מספיק רחוק שזה לא יהיה בחום החדר, ואת מיקומו כך יאירו את פני השטח מזון. הרכבה כולו רצוי למקם בסביבה עם לחות גבוהה טמפרטורה של 22-25 ° C.
4. בגין בווידיאו דרך הקיר הקדמי של החדר כאשר זבובים הן על foodsurface.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
