Summary
Vi beskriver en roman rött fluorescerande protein (RFP) reporter som uttrycks specifikt i
Abstract
Den
Protocol
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
Dissekering av Drosophila ögat imaginal skiva är enkelt, men kan ta tid att bemästra. De kritiska steg är identifieringen av ögat skivan och dess dissektion bort från larver hjärnan. Identifiering av ögat skivan underlättas med hjälp av eye-RFP linje som beskrivs här. Möjliga ändringar för att ta bort antennal skivan eller peripodial membran, eller lämna den optiska loben bifogas visualisera PR axoner in i hjärnan.
Ögat-RFP linje skapades genom kloning en roman öga-specifika enhancer element från den andra intron av spetsiga P2 gen 2 i Pred H-Stinger enhancer-reporter vektor 3 och använda denna för att skapa transgena flugor. Ögat-RFP reporter uttrycks i en specifik delmängd av PRS och tappar (Figur 2.). Den kan därför användas för att avgöra om en gen av intresse uttrycks i dessa celltyper. Ögat-RFP linje är tillgängliga på begäran.
Utvecklingsländerna Drosophila ögat är en kraftfull modell för att studera gener och molekylära vägar kontrollera PR neurogenes 1. Metodiken och reporter som beskrivs här kan användas för att öka förståelsen av denna process.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Acknowledgments
Detta arbete har finansierats av Kings College London och Royal Society.
References
- Doroquez, D. B., Rebay, I. Crit Rev Biochem Mol Biol. 41 (6), 339-339 (2006).
- Kaul, A. K., Craig, G. M., McNeill, H., Bateman, J. M. , Forthcoming.
- Barolo, S., Castro, B., Posakony, J. W. Biotechniques. 36 (3), 436-436 (2004).
