Summary
Beschrijven we een nieuw rood fluorescerend eiwit (RFP) reporter dat specifiek wordt uitgedrukt in de
Abstract
De
Protocol
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
Dissectie van de Drosophila oog denkbeeldige schijf is eenvoudig, maar kan de tijd nemen om te beheersen. De kritische stappen zijn de identificatie van het oog schijf en de dissectie uit de buurt van het larvale hersenen. Identificatie van het oog schijf is eenvoudiger met behulp van de eye-RFP lijn hier. Eventuele wijzigingen zijn aan de antennaal schijf of de peripodial membraan te verwijderen, of om de optische kwab aan de PR-axonen het invoeren van de hersenen te visualiseren verlaten.
Het oog-RFP lijn werd gegenereerd door het klonen van een nieuwe eye-specifieke enhancer element uit de tweede intron van de puntige P2-gen 2 in de Pred H-Stinger enhancer-reporter vector-3 en het gebruik van deze om transgene vliegen te maken. Het oog-RFP reporter wordt uitgedrukt in een specifieke subset van PR's en in de kegel cellen (Figuur 2.). Het kan daarom gebruikt worden om te bepalen of een gen van belang wordt uitgedrukt in deze celtypen. Het oog-RFP lijn is op aanvraag beschikbaar.
Het ontwikkelen van Drosophila oog is een krachtig model voor het bestuderen van genen en moleculaire pathways controle PR neurogenese 1. De methodologie en verslaggever hier beschreven kan worden gebruikt om het begrip van dit proces te bevorderen.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Acknowledgments
Dit werk werd gefinancierd door King's College Londen en de Royal Society.
References
- Doroquez, D. B., Rebay, I. Crit Rev Biochem Mol Biol. 41 (6), 339-339 (2006).
- Kaul, A. K., Craig, G. M., McNeill, H., Bateman, J. M. , Forthcoming.
- Barolo, S., Castro, B., Posakony, J. W. Biotechniques. 36 (3), 436-436 (2004).
