Summary
אנו מתארים רומן אדום חלבון פלואורסצנטי (RFP) כתב כי באה לידי ביטוי במיוחד ב
Abstract
Protocol
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
Dissection של הדיסק עין דמותי תסיסנית היא פשוטה, אבל יכול לקחת זמן כדי לשלוט. השלבים הקריטיים זיהוי של הדיסק העין לנתיחה שלה מן המוח הזחל. זיהוי של הדיסק העין נעשה קל יותר באמצעות קו העין RFP המתואר כאן. שינויים אפשריים הם להסיר את הדיסק מחושים או קרום peripodial, או לעזוב את האונה אופטיים המחוברים לדמיין את האקסונים יחסי ציבור הזנת המוח.
קו העין RFP נוצר על ידי שיבוט עין ספציפי רומן אלמנט משפר מן אינטרון השני של הגן P2 הצביע 2 לתוך pRed H-Stinger-משפר כתב וקטור 3 ושימוש זה כדי ליצור זבובים מהונדס. הכתב העין RFP מתבטא משנה מסוים של הפורטוריקנים ו בתאים חרוט (איור 2).. לפיכך ניתן להשתמש כדי לקבוע אם גן ריבית מתבטאת אלו סוגי תאים. קו העין RFP זמין על פי בקשה.
העין בפיתוח תסיסנית הוא מודל רב עוצמה לחקר גנים מסלולים מולקולריים השליטה יחסי ציבור neurogenesis 1. המתודולוגיה והכתב המתואר כאן ניתן להשתמש כדי לקדם את ההבנה של התהליך הזה.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Acknowledgments
עבודה זו מומנה על ידי בקינגס קולג' בלונדון ושל החברה המלכותית.
References
- Doroquez, D. B., Rebay, I. Crit Rev Biochem Mol Biol. 41 (6), 339-339 (2006).
- Kaul, A. K., Craig, G. M., McNeill, H., Bateman, J. M. , Forthcoming.
- Barolo, S., Castro, B., Posakony, J. W. Biotechniques. 36 (3), 436-436 (2004).
