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Biology

A Novel Reporter RFP para ajudar na visualização do Disco Imaginal Eye em Drosophila doi: 10.3791/1617 Published: December 15, 2009

Summary

Nós descrevemos um romance vermelho proteína fluorescente repórter (RFP) que se expressa especificamente na

Abstract

O

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Dissecção do disco imaginal Drosophila olho é simples, mas pode levar algum tempo para dominar. Os passos críticos são a identificação do disco olho e sua dissecção longe do cérebro larval. Identificação do disco olho é mais fácil usar a linha dos olhos-RFP descrito aqui. Modificações possíveis são para remover o disco antenais ou a membrana peripodial, ou deixar o lobo óptico ligado a visualizar os axônios PR entrar no cérebro.

A linha dos olhos-RFP foi gerada por clonagem uma novela olho específicos elemento potenciador da segunda intron do gene P2 apontou 2 na pred H-Stinger enhancer-repórter vector 3 e usando isso para criar moscas transgênicas. O repórter-olho RFP é expressa em um subconjunto específico de PRs e em células cone (Figura 2).. Pode, portanto, ser usado para determinar se um gene de interesse é expressa nestes tipos de células. A linha dos olhos-RFP está disponível sob pedido.

O desenvolvimento do olho Drosophila é um poderoso modelo para estudar os genes e vias moleculares controlando PR neurogênese 1. A metodologia e repórter descritos aqui podem ser usados ​​para promover a compreensão deste processo.

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Acknowledgments

Este trabalho foi financiado pelo Kings College de Londres e da Royal Society.

References

  1. Doroquez, D. B., Rebay, I. Crit Rev Biochem Mol Biol. 41, (6), 339-339 (2006).
  2. Kaul, A. K., Craig, G. M., McNeill, H., Bateman, J. M. Forthcoming.
  3. Barolo, S., Castro, B., Posakony, J. W. Biotechniques. 36, (3), 436-436 (2004).
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Kaul, A. K., Bateman, J. M. A Novel RFP Reporter to Aid in the Visualization of the Eye Imaginal Disc in Drosophila. J. Vis. Exp. (34), e1617, doi:10.3791/1617 (2009).More

Kaul, A. K., Bateman, J. M. A Novel RFP Reporter to Aid in the Visualization of the Eye Imaginal Disc in Drosophila. J. Vis. Exp. (34), e1617, doi:10.3791/1617 (2009).

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