Summary
줄기 세포 식별에 중요한 돌파구가 계속 만들어지고있다. 이러한 발견을 번역하기 위해, 그러나, 세포 전달을위한 새로운 방법을 고안해야합니다. 난 여기기도는 줄기 세포 이식을위한 폐에 안전한 경로를 제공하는보고합니다.
Abstract
폐 질환은 주요 사망 원인과 오염과 흡연 전세계 증가 주어진 유행병이 될 가능성이 높습니다. 줄기 세포 치료의 발전은 폐 질환과 관련된 증상의 완화 및 많은 성인 폐포 수리를 유도 수 있습니다. 인간의 치료를 위해 적용되는 줄기 세포에 대한 지속적인 검색과 동시, 정확한 배달 및 유도는 (질병의 사이트에) 성공적인 치료에 대한 안심해야합니다. 자, 내가 줄기 세포가 안전하게 폐로가는 직항 노선을 여는기도를 통해 얻은 수 있습니다보고합니다. 이 방법은 피부 절개, tracheal 루멘로와 함께 정맥의 꼬리 삽입하고, 폐의기도에 줄기 세포 차량 혼합물의 주입을 포함한다. 미디어 솔루션 및 안정기의 넓은 범위 세포 유형의 넓은 범위를 제공하는 능력에 결과 절개술을 통해 얻은 수 있습니다. 루멘 이러한 세포를 confining 폐포 상피를 통해 흡입하는 동안 폐 확장 및 부정적인 압력은 또한 줄기 세포의 통합을 지원합니다. 빠른 이해와 치료의 큰 범위를 처리할 수있는 능력을 가진 줄기 세포의 Tracheal 배달, 폐 질환의 치료를위한 새로운 길을 열어, 세포 기반 치료법의 개발을 가속 수 있습니다.
Protocol
사전 수술
- 받는 사람의 마우스 및 기증자 세포
- 테이프 및 봉합사 스레드와 플랫폼을 운영
- 1cc 주사기
- 23G의 바늘
- 마취 : avertin 25 MG / ML (또는 마취제 9 MG / ML 및 xylazin 1 MG / ML)
- # 40 블레이드와 헤어 클리퍼
- 멸균 장갑
- 알코올 면봉
- 요오드
- 멸균 수술 악기
- 봉합 나사
- 22G 카테터
- 200 UL 피펫 (살균)
- 멸균 피펫 팁
- 항생 연고 글루
- 샤피 용기
수술
무균 기법이 절차 전반에 걸쳐 사용됩니다.
- 마우스의 무게를.
- 마취 (250 MG / kg avertin하거나 또는 마취제 90 MG / kg와 xylazine 10 MG / kg) 자발 호흡을 허용하지만, 수술 - 농도 마취를 제공하기 위해 충분한 복용량에서. Intraperitoneal의 주입 수술 발가락 핀치가 anesthetized 동물로부터 응답 깊은 고통의 지표로 사용되었다 시작합니다.
- 봉합 나사 및 안정화 테이프 꼬리 집어넣 incisors와 마우스를 놓는다.
- # 40 클리퍼 블레이드를 사용하여 클립 머리.
- 변경 장갑 (멸균 장갑 계속).
- 이전 피부 절개에 알코올로 소독 번.
- iodophore와 지역을 소독.
- 멸균기구를 사용하면 기관에 평행 작은 절개를 (<1cm)합니다.
- 연골에서 조심스럽게 분리 조직.
- 타이가기도 아래에 삽입됩니다.
- 부드럽게 위쪽으로 넥타이를 인상하고 노출된 기관에 바늘을 삽입합니다.
- 바늘을 제거하고 약간의 저항을 기분까지 급속 아직 원활하게 튜브를 삽입합니다.
- 직접 카테 테르에 피펫 전지 (최대 50 microliters 볼륨).
- 즉시 튜브를 제거하고 운영 장치에서 해방 마우스하면서 동점.
- 필요한 경우 부드럽게 자신의 앞쪽에 발 기대며로 (수직) 수직으로 마우스를 잡고 부드럽게 이동합니다.
- 한 봉합 또는 항생제를 접착제로 상처를 닫습니다.
포스트 수술
- 마우스 보온.
- Buprenorphine는 (0.05 밀리그램 / kg)이 절차에 따라 처음 24 시간 동안 게시물 수술 무통으로 12 시간마다 부여해야합니다.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| 23 G needle | |||
| 1 cc syringe | |||
| 22 G catheter | |||
| suture thread | |||
| antibiotic glue ointment | |||
| Anesthetic | Avertin 25 mg/mL. Alternatively ketamine 9 mg/mL and xylazin 1 mg/ml. |
