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Biology

気管切開:肺へ幹細胞の移植方法

Published: February 25, 2007 doi: 10.3791/163

Summary

幹細胞の同定に重要なブレークスルーを継続的に行われている。これらの発見を翻訳するには、しかし、携帯電話配信のための新しい方法が考案されている必要があります。ここでは、気道が幹細胞移植のための肺への安全なルートを提供することを報告する。

Abstract

肺疾患は主要な死因と汚染、喫煙、世界中で増加し、特定の流行になる可能性があります。幹細胞治療の進歩は、肺疾患に伴う症状の多くを軽減し、成人の肺胞修復を誘導することがあります。人間の治療に適用幹細胞のための継続的な調査と並行して、正確な配達とホーミングは(病気のサイトに)成功した​​治療のために安心されている必要があります。ここで、私は、幹細胞を安全に肺へのノンストップルートを開いて気管を経由して点眼することができると報告している。このメソッドは、皮膚切開、気管内腔へと一緒にカニューレの尾側に挿入し、肺の気道への幹細胞の車両の混合物の注入を含む。メディアのソリューションと安定剤の広い範囲は、セルのタイプの広い範囲を提供する能力、その結果、気管切開を介して点眼することができます。内腔にこれらの細胞を閉じ込め肺胞上皮と、吸入時の肺の膨張と負圧にも幹細胞の統合を支援することがあります。迅速な取り込みや治療の広い範囲を処理する能力を持つ幹細胞の気管配信は、、肺疾患の治療に新たな道を開いて、細胞ベースの治療法の開発を加速することができます。

Protocol

術前

  1. レシピエントマウスとドナー細胞
  2. テープや縫合糸でプラットフォームを操作する
  3. 1ccの注射器
  4. 23Gの針
  5. 麻酔薬:AVERTIN 25 mg / mlの(あるいはケタミン9 mg / mlのとxylazin 1 mg / ml)を
  6. #40ブレードとバリカン
  7. 無菌手袋
  8. アルコール綿棒
  9. ヨウ素
  10. 滅菌手術器具
  11. 縫合糸
  12. 22Gカテーテル
  13. 200μlのピペット(滅菌)
  14. 滅菌ピペットチップ
  15. 抗生物質接着剤の軟膏
  16. シャーピーコンテナ

手術

無菌技術は、このプロシージャ全体で使用されています。

  1. マウスの重量を量る。
  2. 腹腔内麻酔薬の注射(250 mg / kgのAVERTINあるいはケタミン90 mg / kgとキシラジンに10 mg / kg)自発呼吸を可能にするために十分な用量で、しかし、外科的濃度の麻酔を提供しています。手術のためにつま先のピンチが麻酔をかけた動物からの応答がないとの深い痛みの指標として使用されて開始する。
  3. 安定させるために縫合糸とテープの尾に隠れて歯でマウスを置きます。
  4. #40クリッパーの刃を使用して、クリップの髪。
  5. 変更の手袋(滅菌手袋を続ける)。
  6. 皮膚切開の前にアルコールで二回消毒する。
  7. iodophoreで領域を滅菌する。
  8. 滅菌器具を使用すると、気管に平行に小さな切開を(<1cm)を行います。
  9. 軟骨から慎重に独立した組織。
  10. ネクタイは、気管の下に挿入されます。
  11. ゆっくりと上向きにネクタイを上げると露出気管に針を挿入する。
  12. 針を外して、わずかな抵抗を感じるまで、急速にまだ、スムーズにチューブを挿入します。
  13. 直接カテーテルピペットの細胞(最大50マイクロリットル体積)。
  14. すぐにチューブを削除し、演算装置から解放マウスながらネクタイ。
  15. 必要に応じてそっと彼の前部足をしがみついてで(垂直)直立マウスを押したまま、ゆっくりと移動する。
  16. one縫合糸または抗生物質の接着剤で傷口を閉じてください。

術後

  1. マウス、冷えないように保管してください。
  2. ブプレノルフィン(0.05 mg / kgの)最初の24時間、12時間ごとにこの手順の後、術後の鎮痛として与える必要があります。

図1

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Materials

Name Company Catalog Number Comments
23 G needle
1 cc syringe
22 G catheter
suture thread
antibiotic glue ointment
Anesthetic Avertin 25 mg/mL. Alternatively ketamine 9 mg/mL and xylazin 1 mg/ml.

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Tags

細胞生物学、第2号、肺、幹細胞、移植、気管
気管切開:肺へ幹細胞の移植方法
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Cite this Article

Peter, Y. Tracheotomy: A Method forMore

Peter, Y. Tracheotomy: A Method for Transplantation of Stem Cells to the Lung. J. Vis. Exp. (2), e163, doi:10.3791/163 (2007).

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