Summary
Belangrijke doorbraken in de identificatie van stamcellen wordt voortdurend gemaakt. Voor het vertalen van deze ontdekkingen, moet echter nieuwe methoden voor cellulaire levering worden bedacht. Hier heb ik melden dat de luchtwegen een veilige route voor stamceltransplantatie naar de longen te geven.
Abstract
Longziekte is een belangrijke oorzaak van dood en waarschijnlijk een epidemie gegeven toename van de vervuiling en roken de hele wereld. Vooruitgang in de stamceltherapie kan verlichten veel van de symptomen geassocieerd met long-en vaatziekten en veroorzaken alveolaire reparatie bij volwassenen. Gelijktijdig met de voortdurende zoektocht naar stamcellen van toepassing zijn voor menselijke behandeling, moet nauwkeurige levering en homing (op de site van ziekte) worden gerustgesteld voor een succesvolle therapie. Hier, ik melden dat stamcellen veilig kan worden ingeprent via de luchtpijp het openen van een non-stop op weg naar de longen. Deze methode houdt in een huid incisie, caudaal inbrengen van een canule in en langs de tracheale lumen, en de injectie van een stamcel voertuig mengsel in luchtwegen van de longen. Een breed scala van media-oplossingen en stabilisatoren kunnen worden ingeprent via tracheotomie, waardoor de mogelijkheid om een breder scala aan celtypen te leveren. Met de alveolaire epitheel beperken deze cellen aan het lumen, kan longschade uitbreiding en negatieve druk tijdens het inhaleren ook helpen bij het stamcel-integratie. Tracheale aflevering van stamcellen, met een snelle opname en de mogelijkheid om een breed scala aan behandelingen te behandelen, kan versnellen de ontwikkeling van cel-gebaseerde therapieën, het openen van nieuwe wegen voor de behandeling van longziekte.
Protocol
Pre-operatieve
- Ontvanger muis en donorcellen
- Operationele platform met tape en hechtdraad draad
- 1cc spuit
- 23G naald
- Verdoving: Avertin 25 mg / ml (als alternatief ketamine 9 mg / ml en xylazin 1 mg / ml)
- Tondeuse met # 40 blade
- Steriele handschoenen
- Alcoholdoekjes
- Jodium
- Gesteriliseerd chirurgische instrumenten
- Suture draad
- 22G catheter
- 200 ul pipet (steriele)
- Gesteriliseerd pipettips
- Antibiotische zalf lijm
- Sharpie container
In werking
Aseptische technieken worden gebruikt in deze procedure.
- Weeg muis.
- Intraperitoneale injectie van anesthesie (250 mg / kg Avertin of als alternatief ketamine 90 mg / kg en xylazine 10 mg / kg) bij doses voldoende zijn om spontane ademhaling toe te staan, maar chirurgische anesthesie-concentratie te bieden. Voor een operatie te beginnen de teen knijpen werd gebruikt als een indicator van diepe pijn met geen reactie van het verdoofde dier.
- Leg muis met snijtanden verscholen in hechtdraad draad en tape de staart te stabiliseren.
- Clip haar met een # 40 klipper mes.
- Verandering handschoenen (ga verder met steriele handschoenen).
- Desinfecteer twee keer met alcohol voorafgaand aan de huid incisie.
- Steriliseren gebied met een iodophore.
- Met behulp van steriele instrumenten maken een kleine incisie (<1 cm) parallel aan de luchtpijp.
- Voorzichtig los weefsel van kraakbeen.
- Een gelijkspel is geplaatst onder de luchtpijp.
- Voorzichtig omhoog te trekken stropdas en steek naald in de luchtpijp worden blootgesteld.
- Verwijder de naald en soepel plaats de buis, maar toch snel, totdat het gevoel lichte weerstand.
- Pipet cellen (tot 50 microliter volume) direct in de katheter.
- Onmiddellijk te verwijderen buis en stropdas, terwijl de bevrijding van de muis uit operationele apparatuur.
- Indien nodig voorzichtig rechtop Houd de muis (verticaal) op zich vastklampen zijn voorste poten en bewegen zachtjes.
- Sluit de wond met een hechting of antibiotica lijm.
Post-operatieve
- Houd de muis warm.
- Buprenorfine (0,05 mg / kg) moet worden gegeven als post-operatieve analgesie elke 12 uur gedurende de eerste 24 uur na deze procedure.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| 23 G needle | |||
| 1 cc syringe | |||
| 22 G catheter | |||
| suture thread | |||
| antibiotic glue ointment | |||
| Anesthetic | Avertin 25 mg/mL. Alternatively ketamine 9 mg/mL and xylazin 1 mg/ml. |
