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Biology

Tracheotomie: Eine Methode zur Transplantation von Stammzellen in die Lunge

Published: February 25, 2007 doi: 10.3791/163

Summary

Bedeutende Durchbrüche in der Stammzellenforschung Identifikation werden ständig gemacht. Zu übersetzen, diese Entdeckungen, müssen jedoch neue Methoden für die zelluläre Lieferung erarbeitet werden. Hier habe ich berichten, dass die Atemwege eine sichere Route für Stammzelltransplantation in der Lunge liefern.

Abstract

Lung Krankheit ist eine der häufigsten Todesursachen und wahrscheinlich eine Epidemie gegeben steigt in der Umweltverschmutzung und Rauchen weltweit geworden. Advances in Stammzell-Therapie kann zu lindern viele der Symptome von Lungenkrankheiten und induzieren alveolären Reparatur bei Erwachsenen. Zeitgleich mit der andauernden Suche nach Stammzellen gelten für menschliche Behandlung muss präzise Lieferung und Homing (an den Ort der Erkrankung) für eine erfolgreiche Therapie beruhigt sein. Hier berichte ich, dass Stammzellen sicher über die Luftröhre Eröffnung eines Non-Stop-Route in die Lunge instilliert werden. Bei dieser Methode wird ein Hautschnitt, caudal Einführen einer Kanüle in und entlang der Tracheallumen und Injektion eines Stammzell-Fahrzeug Mischung in Atemwegen der Lunge. Eine breite Palette von Medien-Lösungen und Stabilisatoren können via Tracheotomie eingeflößt werden, was in der Fähigkeit, ein breiteres Spektrum von Zelltypen zu liefern. Mit Alveolarepithel Beschränkung dieser Zellen in das Lumen, kann Lungenkrebs Expansion und Unterdruck beim Einatmen auch in Stammzellen Integration zu unterstützen. Tracheal Lieferung von Stammzellen, mit einer schnellen Aufnahme und die Fähigkeit, eine große Auswahl an Behandlungen Griff, konnte Beschleunigung der Entwicklung von Zell-basierte Therapien, eröffnet neue Wege für die Behandlung von Lungenkrankheiten.

Protocol

Pre-operative

  1. Empfänger Maus und Spenderzellen
  2. Operating-Plattform mit Klebeband und Faden
  3. 1cc Spritze
  4. 23G Nadel
  5. Betäubungsmittel: Avertin 25 mg / ml (alternativ Ketamin 9 mg / ml und xylazin 1 mg / ml)
  6. Haarschneider mit # 40 Klinge
  7. Sterile Handschuhe
  8. Alkoholtupfer
  9. Jod
  10. Sterilisiert chirurgische Instrumente
  11. Faden
  12. 22G-Katheter
  13. 200 ul Pipette (sterile)
  14. Sterilisierte Pipettenspitzen
  15. Antibiotika-Salbe Kleber
  16. Sharpie Container

Operativ

Aseptische Techniken werden in diesem Verfahren verwendet.

  1. Wiegen Sie mit der Maus.
  2. Intraperitoneale Injektion von Anästhetika (250 mg / kg Avertin oder alternativ Ketamin 90 mg / kg und Xylazin 10 mg / kg) bei Dosierungen ausreichen, um Spontanatmung zu ermöglichen, bieten aber chirurgisch-Konzentration Anästhesie. Für die Operation beginnen die Zehe Prise als Indikator für die tiefen Schmerz ohne Antwort aus dem narkotisierten Tier verwendet wurde.
  3. Lay-Maus mit Schneidezähnen in Faden und Klebeband Schwanz zur Stabilisierung versteckt.
  4. Clip Haare mit einem # 40 clipper Klinge.
  5. Wechseln Sie die Handschuhe (weiter mit sterilen Handschuhen).
  6. Desinfizieren Sie zweimal mit Alkohol vor dem Hautschnitt.
  7. Sterilisieren Bereich mit einem Iodophor.
  8. Mit sterilen Instrumenten einen kleinen Einschnitt (<1 cm) parallel zur Luftröhre.
  9. Sorgfältig trennen Gewebe aus Knorpel.
  10. Eine Krawatte ist unterhalb der Luftröhre eingeführt.
  11. Vorsichtig heben nach oben Krawatte und legen Nadel in exponierten Luftröhre.
  12. Entfernen Sie die Nadel und stecken Sie den Schlauch problemlos, aber schnell, bis das Gefühl einen leichten Widerstand.
  13. Pipette Zellen (bis zu 50 Mikroliter Volumen) direkt in den Katheter.
  14. Unverzüglich entfernen Rohr und Krawatte, während der Befreiung der Maus aus dem operativen Apparat.
  15. Bei Bedarf sanft halten Maus aufrecht (vertikal) durch Festhalten seiner vorderen Pfoten und bewegen sanft.
  16. Schließen Sie die Wunde mit einer Naht oder Antibiotika Leim.

Post-operative

  1. Halten Sie mit der Maus warm.
  2. Buprenorphin (0,05 mg / kg) als postoperative Analgesie gegeben werden alle 12 Stunden für die ersten 24 Stunden nach diesem Verfahren.

Abbildung 1

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Materials

Name Company Catalog Number Comments
23 G needle
1 cc syringe
22 G catheter
suture thread
antibiotic glue ointment
Anesthetic Avertin 25 mg/mL. Alternatively ketamine 9 mg/mL and xylazin 1 mg/ml.

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Tags

Cellular Biology Ausgabe 2 Lungen- Stammzellen Transplantation Luftröhre
Tracheotomie: Eine Methode zur Transplantation von Stammzellen in die Lunge
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Peter, Y. Tracheotomy: A Method forMore

Peter, Y. Tracheotomy: A Method for Transplantation of Stem Cells to the Lung. J. Vis. Exp. (2), e163, doi:10.3791/163 (2007).

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