Summary
Des avancées significatives dans l'identification de cellules souches sont continuellement en cours. Pour traduire ces découvertes, cependant, de nouvelles méthodes pour la livraison cellulaires doivent être élaborées. Ici je signale que les voies respiratoires fournir un itinéraire sûr pour la transplantation de cellules souches pour les poumons.
Abstract
La maladie pulmonaire est une cause majeure de décès et susceptible de devenir une épidémie donnée augmentation de la pollution et dans le monde de fumer. Les progrès de la thérapie par cellules souches peuvent atténuer bon nombre des symptômes associés aux maladies pulmonaires et induisent la réparation alvéolaire chez les adultes. Parallèlement à la recherche permanente de cellules souches pour le traitement applicable humaine, la livraison précis et homing (sur le site de la maladie) doivent être rassurés pour le succès du traitement. Ici, je déclare que les cellules souches peut sans risque être inculquée par la trachée ouvrant une route non-stop au niveau du poumon. Cette méthode implique une incision de la peau, l'insertion d'une canule caudale dans et le long de la lumière trachéale, et l'injection d'un mélange de cellules souches du véhicule dans les voies aériennes du poumon. Une large gamme de solutions de médias et de stabilisants peuvent être inculqué par une trachéotomie, résultant en la capacité de livrer une gamme plus large de types de cellules. Avec épithélium alvéolaire confiner ces cellules à la lumière, l'expansion du poumon et la pression négative lors de l'inhalation peut également aider à l'intégration de cellules souches. La livraison trachéale de cellules souches, avec une absorption rapide et la capacité de gérer un large éventail de traitements, pourrait accélérer le développement de thérapies cellulaires, ouvrant de nouvelles avenues pour le traitement des maladies pulmonaires.
Protocol
Pré-opératoire
- Souris receveuse et de cellules du donneur
- Exploitation plateforme avec du fil de suture et des bandes
- Seringues 1cc
- Aiguille 23G
- Anesthésiques: Avertin 25 mg / ml (alternativement kétamine à 9 mg / ml et xylazin 1 mg / ml)
- Tondeuse à cheveux avec la lame n ° 40
- Gants stériles
- Tampons alcoolisés
- L'iode
- Instruments chirurgicaux stérilisés
- Fil de suture
- Cathéter 22G
- 200 ul pipette (stérile)
- Embouts de pipette stérilisée
- Une pommade antibiotique de la colle
- Sharpie conteneurs
Opératoire
Des techniques aseptiques sont utilisés tout au long de cette procédure.
- Peser souris.
- L'injection intrapéritonéale d'anesthésique (250 mg / kg de kétamine Avertin ou alternativement 90 mg / kg et de xylazine à 10 mg / kg) à des doses suffisantes pour permettre la respiration spontanée, mais fournissent de chirurgie de concentration anesthésie. Pour la chirurgie de commencer le pincement de l'orteil a été utilisé comme un indicateur de la douleur profonde avec absence de réponse de l'animal anesthésié.
- Lay à la souris avec les incisives niché dans un fil de suture et la queue de bande à se stabiliser.
- Cheveux clip à l'aide d'une lame # 40 clipper.
- Gants Changement (continuer avec des gants stériles).
- Désinfectez à deux reprises avec de l'alcool avant l'incision cutanée.
- Stériliser zone avec un iodophore.
- Utiliser des instruments stériles faire une petite incision (<1 cm), parallèlement à la trachée.
- Soigneusement tissus séparés du cartilage.
- Une liaison est inséré sous la trachée.
- Soulevez doucement le haut et cravate insérer l'aiguille dans la trachée exposés.
- Retirer l'aiguille et insérer le tube en douceur, mais rapidement, jusqu'à ce sentiment de légère résistance.
- Pipeter cellules (jusqu'à 50 microlitres de volume) directement dans le cathéter.
- Retirer immédiatement le tube et la cravate tandis souris libérateur d'un appareil d'exploitation.
- Si nécessaire délicatement maintenez la souris verticale (vertical) en s'accrochant ses pattes antérieures et déplacer doucement.
- Fermez la plaie avec une suture ou colle aux antibiotiques.
Post-opératoire
- Gardez la souris chaude.
- La buprénorphine (0,05 mg / kg) doit être donné comme analgésie postopératoire toutes les 12 heures pendant les 24 premières heures suivant cette procédure.
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Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| 23 G needle | |||
| 1 cc syringe | |||
| 22 G catheter | |||
| suture thread | |||
| antibiotic glue ointment | |||
| Anesthetic | Avertin 25 mg/mL. Alternatively ketamine 9 mg/mL and xylazin 1 mg/ml. |
