Summary
Stora genombrott i stamcellsforskningen identifiering kontinuerligt görs. Att översätta dessa upptäckter, måste dock nya metoder för cellulära leverans tas fram. Här har jag rapportera att luftvägarna ger en säker rutt för stamcellstransplantation till lungorna.
Abstract
Lungsjukdom är en ledande orsak till död och kommer sannolikt att bli en epidemi ges ökade föroreningar och globalt rökning. Framsteg inom stamcellsterapi kan lindra många av de symptom i samband med lungsjukdom och inducera alveolära reparation hos vuxna. Parallellt med den pågående sökandet efter stamceller som gäller för mänsklig behandling, måste exakt leverans och målsökande (till platsen av sjukdom) vara säkra för framgångsrik behandling. Här rapporterar jag att stamceller säkert kan ingjutit via luftstrupen öppna en direktlinje till lungan. Denna metod innebär en hud snitt, caudal införandet av en kanyl in i och längs luftrör lumen, och injektion av en stamcell fordon blandningen i luftvägarna i lungan. Ett brett utbud av media lösningar och stabilisatorer kan ingjutas via trakeotomi, vilket resulterar i förmågan att leverera ett bredare spektrum av celltyper. Med alveolära epitelet begränsa dessa celler i lumen, kan lung expansion och undertryck vid inandning hjälper även till att stamceller integration. Luftrör leverans av stamceller, med en snabb upptag och förmåga att hantera ett stort utbud av behandlingar kan påskynda utvecklingen av cellbaserade terapier, vilket öppnar nya vägar för behandling av lungsjukdomar.
Protocol
Preoperativ
- Mottagare mus och celler givare
- Drift plattform med tejp och sutur tråd
- 1 ml spruta
- 23G nål
- Bedövningsmedel: AVERTIN 25 mg / ml (alternativt ketamin 9 mg / ml och xylazin 1 mg / ml)
- Hårklippare med # 40 blad
- Sterila handskar
- Spritkompresser
- Jod
- Steriliserade kirurgiska instrument
- Sutur tråden
- 22g kateter
- 200 ul pipett (steril)
- Steriliserade pipettspetsar
- Antibiotika lim salva
- Sharpie container
Operativ
Aseptiska tekniker används under hela detta förfarande.
- Väg mus.
- Intraperitoneal injektion av bedövningsmedel (250 mg / kg AVERTIN alternativt ketamin 90 mg / kg och xylazin 10 mg / kg) vid doser tillräckliga för att ge spontan andning, men ger kirurgisk-koncentration anestesi. För kirurgi påbörjas tån nypa användes som en indikator på djup smärta utan svar från sövda djur.
- Lägg mus med framtänder instoppad sutur tråd och tejp svans att stabiliseras.
- Klipp håret med en # 40 clipper blad.
- Byt handskar (fortsätter med sterila handskar).
- Desinficera två gånger med alkohol innan huden snitt.
- Sterilisera området med en iodophore.
- Använda sterila instrument gör ett litet snitt (<1 cm) parallellt med luftstrupen.
- Separera försiktigt vävnad från brosk.
- En slips sitter under den luftstrupen.
- Dra upp slips uppåt och för in nålen i utsatta luftstrupen.
- Ta bort nålen och sätt i röret smidigt, men ändå snabbt, tills känslan lätt motstånd.
- Pipettera celler (upp till 50 mikroliter volym) direkt i katetern.
- Omedelbart ta bort röret och slips medan befriande musen från den löpande apparater.
- Vid behov försiktigt tag mus upprätt (vertikal) genom att hålla fast sin främre tassar och rör försiktigt.
- Stäng såret med en sutur eller antibiotika lim.
Postoperativ
- Håll musen varm.
- Buprenorfin (0,05 mg / kg) bör ges som postoperativ smärtlindring var 12 timmar för de första 24 timmarna efter detta förfarande.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| 23 G needle | |||
| 1 cc syringe | |||
| 22 G catheter | |||
| suture thread | |||
| antibiotic glue ointment | |||
| Anesthetic | Avertin 25 mg/mL. Alternatively ketamine 9 mg/mL and xylazin 1 mg/ml. |
