Summary
Avances significativos en la identificación de células madre están continuamente haciendo. Para traducir estos descubrimientos, sin embargo, nuevos métodos para la entrega de celulares deben ser concebido. Aquí me informan de que las vías aéreas proporcionen una ruta segura para el trasplante de células madre a los pulmones.
Abstract
La enfermedad pulmonar es la principal causa de muerte y de probabilidades de convertirse en una epidemia dado el aumento de la contaminación y en todo el mundo fumando. Los avances en la terapia de células madre puede aliviar muchos de los síntomas asociados con la enfermedad de los pulmones y provocar la reparación alveolar en los adultos. Al mismo tiempo que la búsqueda permanente de las células madre de aplicación para el tratamiento humano, la entrega precisa y yendo (a la localización de la enfermedad) deben estar tranquilos para una terapia exitosa. Aquí, puedo informar de que las células madre de manera segura puede ser inculcado a través de la tráquea, la apertura de una ruta sin escalas a los pulmones. Este método consiste en una incisión en la piel, la inserción de una cánula de caudal en ya lo largo de la luz traqueal, y la inyección de una mezcla madre de vehículos de células en las vías respiratorias de los pulmones. Una amplia gama de soluciones de medios de comunicación y los estabilizadores pueden ser inculcados a través de traqueotomía, lo que resulta en la capacidad de ofrecer una gama más amplia de tipos de células. Con epitelio alveolar confinar a estas células a la luz, y la expansión de los pulmones durante la inhalación de presión negativa también puede ayudar en la integración de células madre. Entrega de la tráquea de las células madre, con una absorción rápida y la capacidad de manejar una amplia gama de tratamientos, podrían acelerar el desarrollo de terapias basadas en células, abriendo nuevas vías para el tratamiento de la enfermedad pulmonar.
Protocol
Pre-operatorio
- Receptor de ratón y células de donantes
- Plataforma de funcionamiento con un hilo de sutura y la cinta
- 1cc jeringa
- 23G aguja
- Anestesia: avertina 25 mg / ml (alternativamente ketamina 9 mg / ml y xylazin 1 mg / ml)
- Cortapelos con cuchilla # 40
- Guantes estériles
- Torundas con alcohol
- Yodo
- Esterilizar los instrumentos quirúrgicos
- Sutura hilo
- Catéter de 22G
- 200 ul pipeta (estéril)
- Esterilizar pipetas
- Ungüento antibiótico pegamento
- Sharpie contenedor
Operatorio
Técnicas de asepsia se utilizan en este procedimiento.
- Pesar del ratón.
- Inyección intraperitoneal de anestésico (250 mg / kg avertina o, alternativamente, la ketamina 90 mg / kg y xilacina 10 mg / kg) en dosis suficientes para permitir la respiración espontánea, sino que aportan quirúrgica-la concentración de la anestesia. Para la cirugía para comenzar la pizca dedo fue utilizado como un indicador de un dolor profundo, sin respuesta del animal anestesiado.
- Coloque el ratón con los incisivos escondido en hilo de sutura y la cola para estabilizar la cinta.
- Broche para el cabello con una cuchilla # 40 clipper.
- Cambie los guantes (continuar con guantes estériles).
- Desinfectar con alcohol dos veces antes de la incisión de la piel.
- Esterilizar la zona con un yodóforo.
- Utilizando instrumentos estériles hacer una pequeña incisión (<1 cm) en paralelo a la tráquea.
- Cuidadosamente tejido separado del cartílago.
- Un empate se inserta debajo de la tráquea.
- Levante suavemente hacia arriba y atar insertar la aguja en la tráquea expuestos.
- Se retira la aguja e introduzca el tubo sin problemas, sin embargo, rápidamente, hasta que se sienta una ligera resistencia.
- Pipeta de células (hasta 50 microlitros de volumen) directamente en el catéter.
- Inmediatamente retire el tubo y la corbata, mientras que la liberación del ratón de aparatos de maniobra.
- Si es necesario aplique un lado del ratón en posición vertical (vertical), aferrándose las patas anteriores y se mueven suavemente.
- Cerrar la herida con una sutura o pegamento con antibióticos.
Post-operatorio
- Mantenga caliente del ratón.
- La buprenorfina (0,05 mg / kg) se debe administrar como analgesia postoperatoria cada 12 horas durante las primeras 24 horas después del procedimiento.
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Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| 23 G needle | |||
| 1 cc syringe | |||
| 22 G catheter | |||
| suture thread | |||
| antibiotic glue ointment | |||
| Anesthetic | Avertin 25 mg/mL. Alternatively ketamine 9 mg/mL and xylazin 1 mg/ml. |
