Summary
Telemetric ईसीजी हृदय arrhythmias और अचानक हृदय मौत के लिए पशु मॉडल का मूल्यांकन करने में एक आवश्यक उपकरण के रूप में उभरा है. यहाँ, हम लंबे समय तक चूहों में चल ईसीजी निगरानी में आवेदन के लिए telemetric ईसीजी रिकॉर्डिंग के लिए एक stepwise गाइड उपस्थित थे.
Abstract
Telemetric चूहों में ईसीजी रिकॉर्डिंग arrhythmias पीछे तंत्र, प्रवाहकत्त्व विकारों, और अचानक हृदय मौत को समझने के लिए आवश्यक है. हालांकि सतह ईसीजी तरंग अंतराल से कम अवधि के मापन के लिए उपयोग किया जाता है, यह दिल दर परिवर्तनशीलता या arrhythmias के दुर्लभ एपिसोड का कब्जा की लंबी अवधि के अध्ययन के लिए व्यावहारिक नहीं है. Implantable ईसीजी telemeters सरल शल्य आरोपण, चल चूहों में electrograms की लंबी अवधि के रिकॉर्डिंग, और कई पशुओं की एक साथ रिकॉर्डिंग के साथ scalability का लाभ प्रदान करते हैं. यहाँ, हम एक कदम-by-कदम चूहों में चल ईसीजी रिकॉर्डिंग के लिए telemeters का आरोपण करने के लिए गाइड उपस्थित थे. सड़न रोकनेवाला तकनीक को सावधानी से पालन सप्ताह से आरोपण और रिकॉर्डिंग के महीने के लिए संभावना के साथ अनुकूल अस्तित्व परिणामों के लिए आवश्यक है. इस प्रकार, implantable ईसीजी टेलीमेटरी माउस के रूप में चल पशु मॉडल में हृदय इलेक्ट्रोफिजियोलॉजी पर महत्वपूर्ण जानकारी का पता लगाने के के लिए एक महत्वपूर्ण उपकरण है.
Protocol
1. दूरमापी के सर्जिकल आरोपण के लिए तैयार
- माउस में एक ईसीजी दूरमापी डालने से पहले, यह महत्वपूर्ण है लगता है ईसीजी दूरमापी बाँझ और अच्छा काम क्रम में है. नई टेलीमेटरी उपकरणों आमतौर पर निर्माता द्वारा एक बाँझ हालत में प्रदान की जाती हैं. ईसीजी telemeters प्रदान reused किया जा सकता है डिवाइस कम से कम 4 घंटे के लिए Tergazyme 1% समाधान का उपयोग करने के लिए साफ किया जाता है. आप बाँझ पानी के साथ Tergazyme के साथ सफाई के बाद दूरमापी कुल्ला हो सकता है. इसके अतिरिक्त, Wavicide-01 के लिए ईसीजी दूरमापी बाँझ रातोंरात निस्संक्रामक का उपयोग करें. निस्संक्रामक धोने से चूहों में आरोपण के 48 घंटे पहले बाँझ पानी के साथ लें. एक बाँझ कंटेनर में स्टोर.
- दूरमापी दोनों आयोजन तारों की अखंडता और इन्सुलेट म्यान के लिए सुराग. टेलीमेटरी एक चुंबक दूरमापी 5 सेमी के भीतर लहराया का उपयोग कर ट्रांसमीटर पर मुड़ें, और एक AM रेडियो, आवृत्ति 530 के साथ संकेत का परीक्षण. मजबूत और स्पष्ट संकेत हो सकता है और तीव्रता और तारों के हेरफेर के आधार पर पिच में भिन्न चाहिए. मॉडल संख्या, दूरमापी सीरियल नंबर, और ईसीजी अंशांकन मूल्य रिकार्ड. निर्माता अक्सर सलाह देते हैं कि दूरमापी पर दाखिल करने से पहले 24 घंटे के लिए विवरण के लिए अपनी विशिष्ट दूरमापी के लिए, अनुदेश मैनुअल देखें चाहिए. इस उदाहरण में, हम आरोपण के लिए एक डाटा विज्ञान इंटरनेशनल दूरमापी (DSI) का प्रयोग करेंगे.
- दूरमापी नेतृत्व तैयारी लगभग 3.5 सेमी और सकारात्मक (लाल) 2.5 सेमी करने के लिए नेतृत्व करने के लिए नकारात्मक नेतृत्व (सफेद) में कटौती करके प्राप्त किया जा सकता है. ये सही सीने में नकारात्मक नेतृत्व के आरोपण के लिए इष्टतम लंबाई, और छोड़ दिया पेट में सकारात्मक नेतृत्व (आंकड़ा 2 देखें) हैं. अगला, बेनकाब म्यान इन्सुलेट के तार के 7 मिमी हटा दें. बाँझ superglue, व्यावसायिक शिक्षा और प्रशिक्षण - बॉण्ड के रूप में के साथ धातु का नेतृत्व के अंत पेंट, और तब धातु सुझावों के नेतृत्व टोपी देते हैं. ये टोपियां त्वचा प्लेसमेंट नेतृत्व के कारण कटाव से बचना होगा. 2-3 लगभग मिमी धातु के तार देशी दिल ताल की बिजली संवेदन के लिए उजागर किया जाना चाहिए.
2. दूरमापी के सर्जिकल आरोपण
- आदेश में murine सर्जरी में बाँझ तकनीक का उपयोग करने के लिए, आप बाँझ दस्ताने, एक बाँझ कपड़ा, और 6-0 Prolene sutures की आवश्यकता होगी. तुम भी निष्फल संदंश के 2 जोड़े के लिए की जरूरत है, कुंद समाप्त कैंची के 1 जोड़ी, एक स्केलपेल, और एक सुई ड्राइवर. सर्जिकल उपकरणों की एक ग्लास मनका 250 डिग्री सेल्सियस गर्म अजीवाणु बनानेवाला पदार्थ में निष्फल हो सकता है. दूरमापी के रूप में पहले से उपयोग करने से पहले वर्णित करने के लिए बाँझ और धो लें.
- शल्य चिकित्सा के लिए पहले एक प्रेरण 0.5 एल / मिनट 100% O2 में तीन isoflurane% का उपयोग कर बॉक्स में माउस anesthetizing द्वारा माउस तैयार करें. एक हीटिंग पैड का प्रयोग करें, जैसे एक टी पंप, जो गर्म पानी circulates, anesthetized माउस का तापमान बनाए रखने के लिए. तापमान गुदा जांच से नजर रखी जा सकता है, अगर वांछित. जब माउस पर्याप्त रूप से बेहोश है, पूरी तरह से और बिजली कतरनी के साथ माउस के पेट और सीने दाढ़ी. निरंतर प्रवाह एक ट्यूब के लिए माउस को स्थानांतरित करने से पहले isoflurane के साथ माउस, पुनः anesthetize लापरवाह सिर दूर का सामना करना पड़ रहा है और आप की ओर पूँछ के साथ. गर्म शल्य तालिका के लिए माउस के पंजे के नीचे टेप. एक शराब झाड़ू के साथ पेट के बाल काटे बालों को हटाने और सहकारी क्षेत्र को साफ साफ कर लें. पेट और सीने को कीटाणुरहित swabs के साथ betadine के तीन अलग कोट लागू करें. संज्ञाहरण के सही स्तर माउस नाखून बिस्तर पर दबाव लागू करने के द्वारा सत्यापित करें. बाद माउस सर्जरी के लिए तैयार किया गया है, बाँझ दस्ताने का उपयोग करें और शल्य चिकित्सा क्षेत्र के लिए बाँझ टांगना लागू.
- Intraperitoneal दूरमापी आरोपण व्यायाम फिजियोलॉजी प्रयोग के लाभ प्रदान करता है. Intraperitoneal सम्मिलन के लिए, एक स्केलपेल का उपयोग करने के लिए त्वचा में एक ऊर्ध्वाधर midline चीरा लगभग 2.5 सेमी लंबाई में overlying पेट बनाने के द्वारा सर्जरी शुरू. ध्यान से कुंद समाप्त कैंची का उपयोग अंतर्निहित संयोजी ऊतकों से अलग त्वचा. फिर, linea अल्बा में एक ऊर्ध्वाधर midline चीरा पेरिटोनियम overlying, मोटे तौर पर लंबाई में 1.5 सेमी बनाएँ. इसके अतिरिक्त, सिर्फ peritoneal चीरा है, जो चमड़े के नीचे के लिए एक आउटलेट सुराग के रूप में काम करेगा करने के लिए ऊपर peritoneum (कपाल) में एक छोटा सा छेद बना. जबकि सर्जरी प्रदर्शन, कभी कभी ऑपरेटिंग मैदान पर बाँझ खारा टपकाव द्वारा शल्य साइट नम रखने के लिए.
- सही peritoneal गुहा में दूरमापी डालें. दूरमापी के लिए बेहतर छेद में संदंश डालें और पुल दोनों नेतृत्व छेद के माध्यम से जाता है ताकि वे पेरिटोनियम से फैला हुआ हैं. लगातार 6-0 Prolene sutures का उपयोग करने के लिए 1.5 सेमी peritoneal ऊर्ध्वाधर midline चीरा को बंद.
3. लीड आरोपण और पेट क्लोजर
- ईसीजी सुराग नेतृत्व द्वितीय विन्यास में रखा जाता है. म्यान / सफेद पारदर्शी के साथ नेतृत्व नकारात्मक है, और बाएँ ऊपरी पेट में रखा है. सबसे पहले, माउस के ऊपरी दाएँ सीने में 0.5 सेमी त्वचा चीरा बनाने के लिए.अगला, कुंद कैंची वापस पेट चीरा के लिए एक सुरंग बनाने का उपयोग करें. सुरंग के माध्यम से नेतृत्व खींचो और छाती पर का कवच की मांसपेशियों के लिए नेतृत्व लंगर के लिए एक 6-0 Prolene सीवन का उपयोग करें. यकीन है कि सिवनी नेतृत्व के उजागर हिस्से के शीर्ष पर है, और नेतृत्व और अंतर्निहित मांसपेशियों के बीच एक अच्छा संपर्क बनाता है. एक दूसरे aforementioned एक प्रॉक्सिमल सिवनी का प्रयोग करें, मांसपेशियों के लिए नेतृत्व स्थिर. त्वचा चीरा एक 6-0 Prolene सीवन का उपयोग बंद.
- सकारात्मक नेतृत्व (लाल म्यान) बाएँ डायाफ्राम के नीचे छोड़ दिया पेट में और दिल के नीचे रखा गया है. नेतृत्व 6-0 Prolene सीवन द्वारा अंतर्निहित peritoneal ऊतक के लिए लंगर डाले है और peritoneal ऊतक के साथ अच्छा संपर्क होना चाहिए. एक अतिरिक्त चीरा इस चरण में आवश्यक नहीं है क्योंकि नेतृत्व आरोपण की साइट ऊर्ध्वाधर midline चीरा के लिए करीब है, इस प्रकार मौजूदा शल्य चिकित्सा क्षेत्र के साथ आसानी से पहुँचा जा सकता है है. ध्यान दें कि peritoneal ऊतक करने के लिए अंतर्निहित आंत का वेध से बचने के लिए उठाया जाना चाहिए.
- परतों में 6-0 Prolene के साथ पेट प्रावरणी और त्वचा sequentially बंद.
4. पोस्ट ऑपरेटिव केयर
- तुरंत सर्जरी के बाद analgesia के लिए buprenorphine [मिलीग्राम / एमएल 1] के माउस 0.1 एमएल दीजिए. एक गर्म पैड पर सर्जरी से उबरने के लिए माउस की अनुमति दें. यदि माउस लंबे समय तक> सर्जरी 30 मिनट, या अगर माउस सूखी दिखाई देता है, तो आप पुनर्जलीकरण के लिए peritoneum में 0.2-0.3 एमएल बाँझ खारा इंजेक्षन सकता है पड़ा है. पोस्ट ऑपरेटिव जारी रखा analgesia के लिए यह मानक तीन दिनों के लिए buprenorphine साथ चूहों प्रदान दो बार दैनिक अभ्यास है, और तब के रूप में हर आठ घंटे की जरूरत है.
- शल्य चिकित्सा के बाद जलन से बचने के लिए एक शराब झाड़ू के साथ बंद betadine साफ़. शल्य चिकित्सा के बाद स्वास्थ्य के बाद के निर्धारण के लिए शल्य चिकित्सा के बाद वजन रिकॉर्ड के लिए याद रखें.
- सर्जरी के बाद 8-24 घंटे, माउस जब जरूरत buprenorphine साथ अतिरिक्त analgesia दे, के रूप में इस दर्द को कम करने और माउस की शल्य चिकित्सा के बाद साइट पर clawing से नेतृत्व प्लेसमेंट विफलता कम हो जाएगा.
5. प्रतिनिधि परिणाम
जब सही ढंग से प्रदर्शन किया, माउस पेट चीरों बंद होनी चाहिए साथ चमड़े के नीचे त्वचा के नीचे जाता है. आमतौर पर, माउस संज्ञाहरण से उबरने में 10-30 मिनट लगते हैं. यह के बारे में 7-10 दिन लगते हैं पहले चूहों पूरी तरह से सर्जरी से बरामद किया है, के रूप में पोस्ट ऑपरेटिव वजन और गतिशीलता के नुकसान के सामान्यीकरण की वसूली द्वारा evidenced.
सर्जरी से सबसे आम समस्या अंग सुराग की त्वचा के माध्यम से सर्जरी के बाद पहले 10 दिनों में कटाव है. यह आम समस्या दृढ़ता से पालन उपचर्म उपचर्म ऊतकों या peritoneum के लिए सुराग से बचा जा सकता है. इस तकनीक सुस्त होता है, जो दबाव और त्वचा पर घर्षण बनाने के लिए जब माउस ambulates से बचा जाता है. हालांकि कम आम संक्रमण है, और पूति बाँझ तकनीक में, या इस्तेमाल किया telemeters की अधूरी सफाई से त्रुटियों से हो सकता है.
ईसीजी उत्पादन एक रिसीवर डेटा डेटा विज्ञान इंटरनेशनल (DSI) के रूप में अधिग्रहण सॉफ्टवेयर, के साथ मिलकर मैट्रिक्स के द्वारा दर्ज की जा सकती है. तरंग परिणाम एक स्पष्ट रूप से परिभाषित पी लहर, आलिंद विध्रुवण denoting, और भी एक क्यूआर लहर है जो निलय विध्रुवण का प्रतीक है, के रूप में नीचे 3 चित्र में दिखाया शामिल करना चाहिए. एक अच्छी गुणवत्ता ईसीजी ट्रेस एक स्पष्ट रूप से परिभाषित पी लहर पिछले एक 1:1 के अनुपात में एक स्पष्ट रूप से परिभाषित क्यूआर लहर होना चाहिए. कम पृष्ठभूमि संकेत हो सकता है और आरआर के अंतराल जंगली प्रकार चूहों में नियमित किया जाना चाहिए चाहिए. एक गरीब गुणवत्ता ईसीजी ट्रेस अस्पष्ट पी या क्यूआर, लहरें, या पृष्ठभूमि संकेत है, जो बाद में कंप्यूटर विश्लेषण कठिन बना सकता है हो सकता है. एक गरीब ईसीजी ट्रेस फिर दाखिल दूरमापी होता है, आम तौर पर एक समय में एक के द्वारा निर्धारित किया जा सकता है. एक दूरमापी नेतृत्व को फिर से प्रत्यारोपण के लिए, संज्ञाहरण के तहत माउस जगह है, और सर्जिकल तकनीक का उपयोग कर, सीधे प्रश्न में नेतृत्व overlying त्वचा में एक चीरा बनाने के. जब नेतृत्व पहुँचा है, नेतृत्व प्रस्तोता सिवनी में कटौती, और फिर नेतृत्व प्रस्तोता पहले इच्छित स्थान पर ले जाने के नेतृत्व. अंत में, 6-0 Prolene के साथ शल्य साइट बंद.
चित्रा 1: सकारात्मक और नकारात्मक सुराग के साथ एक छोटे जानवर दूरमापी का एक उदाहरण है. सामान्य में, लाल नेतृत्व सकारात्मक नेतृत्व है, और सफेद नेतृत्व नकारात्मक नेतृत्व है. प्रत्येक नेतृत्व एक इन्सुलेट म्यान, उजागर तार के 5-7 मिमी, और एक प्लास्टिक की छाया टिप है, जो त्वचा के माध्यम से नेतृत्व के कटाव को रोकता है चाहिए.
चित्रा 2: एक चूहे पर उचित दूरमापी आरोपण साइटों दिखा कार्टून. सफेद नेतृत्व (नकारात्मक) माउस के दाएँ ऊपरी सीने में प्रत्यारोपित किया जाता है, और लाल (सकारात्मक) का नेतृत्व छोड़ दिया पेट, जैसे कि टेलिमीटर होश "प्रमुख दो" विन्यास में रखा गया है.
चित्रा 3: सामान्य साइनस लय में एक माउस के प्रतिनिधि तरंग. पी लहर आलिंद विध्रुवण का प्रतिनिधित्व करता है और क्यूआर जटिल निलय विध्रुवण का प्रतिनिधित्व करता है. एक उच्च गुणवत्ता तरंग एक अलग पी एक 1:1 के अनुपात में प्रत्येक क्यूआर जटिल पिछले लहर होना चाहिए.
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Discussion
इस प्रक्रिया के महत्वपूर्ण कदम उचित और अस्तित्व सर्जरी से पहले माउस की सफाई तैयारी कर रहे हैं. जब एक दूरमापी और माउस ऑपरेटिव साइट ठीक से साफ कर रहे हैं, वहाँ एक बहुत बेहतर परिणाम शल्य चिकित्सा के बाद है. इसके अतिरिक्त, करीब ध्यान प्लेसमेंट नेतृत्व शल्य चिकित्सा के बाद त्वचा कटाव को कम कर देता है. तकनीक के लिए संभावित संशोधनों पार्श्व एल.वी. दीवार (सीसा मैं विन्यास) समारोह में, या ईसीजी तरंग विश्लेषण के लिए न केवल दूरमापी का उपयोग का मूल्यांकन करने के लिए वैकल्पिक विन्यास शामिल हैं, लेकिन यह भी के लिए तापमान और भी रक्तचाप विश्लेषण [इस लेख के दायरे से परे] . ईसीजी टेलीमेटरी रिकॉर्डिंग के लिए एक वैकल्पिक स्थान उपचर्म नेतृत्व प्लेसमेंट बाहरी तारों के साथ है, एक गैर प्रत्यारोपित दूरमापी अर्थात्. यह नवजात ईसीजी waveforms की रिकॉर्डिंग के लिए उपयुक्त है, लेकिन चल ईसीजी टेलीमेटरी के लिए व्यावहारिक नहीं है.
दूरमापी आरोपण चल ईसीजी निगरानी के लिए एक शक्तिशाली उपकरण है, और ventricular tachycardia, अचानक हृदय मौत की घटना, ए वी नोडल ब्लॉक, और atrial fibrillation का मूल्यांकन किया गया है 1,2,3 इसके अतिरिक्त, टेलीमेटरी विश्लेषण के आवेदन मिले है मूल्यवान डेटा. दिल की दर और हृदय की दर परिवर्तनशीलता के नियंत्रण के बारे में ईसीजी दूरमापी प्रौद्योगिकी में 4,5 हाल ही में प्रगति मुख्य शरीर का तापमान और रक्तचाप के संवेदनशील माप शामिल है. 6 इस प्रकार, दूरमापी आरोपण चूहों और अन्य पशु मॉडल में शारीरिक परिवर्तन परख करने की क्रिया के लिए एक महत्वपूर्ण तकनीक है रोग के.
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Acknowledgments
मार्क McCauley एक NIH mentored - प्रशिक्षण 5T32HL066991 07-अनुदान द्वारा समर्थित है
Xander Wehrens NIH / NHLBI 1R01HL091947 01A209 अनुदान और 3R01HL089598-03S109 द्वारा समर्थित है
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Steri 250 Bead Sterilizer | Inotech | IS-250 | |
| Blunt-Ended Scissors | Roboz Surgical Instruments Co. | RS-5980 | |
| Blunt-Ended Forceps (x2) | Roboz Surgical Instruments Co. | RS-5138 | |
| Veterinary Anesthesia Vaporizer | Surgivet | Isotec 4 | |
| T/Pump | Gaymar Industries | P/N11184-000 | |
| Propylene Blue Monofilament Suture | Ethicon Inc. | 8718 | |
| Povodone Iodine, 10% | Equate | N/A | |
| Alcohol Swabs | PDI | B339 | |
| Tergazyme | Alconox, Inc. | 21837-118 | |
| Wavidicde-01 | Medical Chemical Corporation | Wavicide-01 | |
| ECG Telemeter | DataSciences International | EA-F20 |
References
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- Wehrens, X. H., Kirchhoff, S., Doevendans, P. A. Mouse electrocardiography: an interval of thirty years. Cardiovasc Res. 45 (1), 231-231 (2000).
