Summary
Telemetrik EKG, kardiyak aritmiler ve ani kardiyak ölüm için hayvan modellerinde değerlendirilmesinde önemli bir araç olarak ortaya çıkmıştır. Burada, fareler üzerinde yapılan uzun vadeli ambulatuvar EKG monitorizasyonu uygulama için telemetrik EKG kayıtları kademeli bir kılavuz mevcut.
Abstract
Telemetrik EKG kaydı farelerde, aritmiler arkasındaki mekanizmaları, iletim bozuklukları ve ani kardiyak ölüm anlamak için çok önemlidir. Yüzey EKG dalga formu aralıklarla kısa süreli ölçümler için kullanılabilir olmasına rağmen, kalp hızı değişkenliği ya da aritmi yakalama ender atakların uzun vadeli çalışmalar için pratik değildir. Vücuda Yerleştirilebilir EKG telemeters basit bir cerrahi implantasyon, ayaktan fareler electrograms uzun süreli kayıt ve aynı anda birden fazla hayvan kayıtları ile ölçeklenebilirlik avantajları sunuyoruz. Burada, farelerde ambulatuvar EKG kaydı için telemeters implantasyon bir adım-adım rehber sunmaktayız. Aseptik teknik Dikkatli bağlılık, haftalar ve aylar implantasyon ve kayıt imkanı elverişli sağkalım sonuçları için gereklidir. Böylece, implante edilebilir EKG telemetri, fare gibi ayaktan hayvan modellerinde kardiyak elektrofizyoloji kritik bilgilerin tespiti için değerli bir araçtır.
Protocol
1. Cerrahi İmplantasyon için Telemetri hazırlanması
- Fareyi bir EKG uzaktan ölçüm içine yerleştirmeden önce, EKG uzaktan ölçüm, steril ve iyi bir çalışma düzeni içinde emin olmak için önemlidir. Yeni telemetri cihazları genellikle steril bir durumda üretici tarafından sağlanmaktadır. EKG telemeters cihaz en az 4 saat süreyle Tergazyme% 1 solüsyon kullanılarak temizlenebilir olması koşuluyla yeniden olabilir. Uzaktan ölçüm Tergazyme ile temizlendikten sonra steril su ile durulama olabilir. Buna ek olarak, EKG uzaktan ölçüm sterilize etmek için bir gecede Wavicide-01 dezenfektan kullanın. Dezenfektan farelere implantasyonu 48 saat önce steril su ile yıkayın emin olun. Steril bir kapta saklayın.
- Uzaktan ölçüm, iletken teller bütünlüğü ve yalıtım kılıfı kablolarını kontrol ediniz. 5 cm uzaktan ölçüm içinde salladı bir mıknatıs kullanarak telemetri vericisi açın ve bir AM radyo, frekans 530 sinyal test. Sinyal güçlü ve net olmalı ve tellerin manipülasyon dayalı şiddeti ve sahada değişebilir. Model numarası, uzaktan ölçüm seri numarası, ve EKG kalibrasyon değeri kaydedin. Üreticiler genellikle uzaktan ölçüm, implantasyon öncesinde 24 saat Ayrıntılar için özel uzaktan ölçüm için kullanım kılavuzuna bakın gerektiğini öneriyoruz. Bu örnekte, implantasyon için Veri Bilimler International (DSİ) uzaktan ölçüm kullanabilirsiniz.
- Telemetri kurşun hazırlanması yaklaşık olarak 3,5 cm ve 2,5 cm pozitif (kırmızı) kurşun negatif (beyaz) kurşun kesim tarafından elde edilebilir. Bunlar, negatif kurşun sağ göğüs implantasyonu için optimal uzunlukları ve sol karın pozitif kurşun (Bkz. Şekil 2). Sonra, 7 mm tel maruz yalıtım kılıfı çıkarın. Vet-Bond gibi steril superglue, metal kurşun sonuna boya ve metal uçları kurşun kapakları takın. Bu kapaklar yerleşimi yol nedeniyle cilt erozyonu önlemek olacaktır. Yaklaşık 2-3 mm metal tel, doğal kalp ritmi elektrik algılama için açık olmalıdır.
2. Telemetri Cerrahi İmplantasyon
- Fare cerrahi steril tekniği kullanmak için, steril eldiven, steril bir drape ve 6-0 Prolen sütür gerekir. Ayrıca 1 küt uçlu makas çifti, neşter, ve bir iğne sürücüsü, 2 çift steril forseps gerekecektir. Cerrahi aletler santigrat 250 derece ısıtılmış bir cam boncuk sterilizatör sterilize edilebilir. Kullanmadan önce, daha önce açıklandığı gibi, uzaktan ölçüm sterilize ve yıkamak için emin olun.
- Ilk izofluran% 3, 0,5 L / dk% 100 O2 kullanarak bir indüksiyon kutusunda fare anestezi ile ameliyat için fare hazırlayın. Anestezi fare sıcaklığı korumak için, bu sıcak su dolaşır bir T-pompa, bir ısıtma yastığı kullanın. Sıcaklık, istenirse rektal prob tarafından izlenecektir. Fare yeterli sedasyon olduğunda, tamamen fare elektrik kesme makineleri ile karın ve göğüs tıraş. Supin, baş dönük ve size doğru kuyruk, sürekli bir akış tüp fare aktarmadan önce fare izofluran ile yeniden uyutmak. Isıtmalı cerrahi tablo farenin pençeleri aşağı Teyp. Traş saç kaldırmak ve operasyon alanını temizlemek için bir alkollü bez ile karın silin. Betadin çubuklar ile karın ve göğüs dezenfekte etmek için üç ayrı kat uygulayın. Anestezi fare tırnak yatağı üzerinde baskı uygulayarak doğru seviyede olun. Fare ameliyat için hazırlandıktan sonra, steril eldiven ve cerrahi alan steril örtüyü geçerlidir.
- İntraperitoneal uzaktan ölçüm implantasyonu, egzersiz fizyolojisi deney avantajı sunmaktadır. Intraperitoneal ekleme için, karın üzerinde yaklaşık 2,5 cm uzunluğunda cilt dikey bir orta hat kesi oluşturmak için bir neşter kullanılarak ameliyat başlar. Temel bağ dokulardan künt uçlu makas kullanılarak dikkatli bir şekilde ayrı bir cilt. Sonra, linea alba, yaklaşık 1,5 cm uzunluğunda periton üzerinde dikey bir orta hat kesi oluşturun. Ayrıca, periton subkutan için bir çıkış neden olarak hizmet verecek peritoneal insizyon (kafatası) hemen üstünde küçük bir delik oluşturmak. Cerrahi yerine getirirken, bazen steril serum fizyolojik çalışma alanı üzerine damlayan cerrahi site nemli tutmak.
- Uzaktan ölçüm sağ periton boşluğuna yerleştirin. Forseps uzaktan ölçüm üstün deliğe yerleştirin ve periton çıkıntılı, böylece her iki kurşun deliğinden açar çekin. 1.5 cm periton dikey orta hat insizyonu kapatmak için sürekli 6-0 Prolen dikişlerle kullanın.
3. Kurşun İmplantasyon ve Karın Kapanış
- EKG yol açar kurşun II yapılandırma yerleştirilir. Şeffaf / beyaz bir kılıf ile kurşun negatif ve sol üst karın içinde yerleştirilir. İlk olarak, farenin sağ üst göğüs, 0.5 cm'lik cilt insizyonu oluşturun.Sonra, abdominal kesi geri bir tünel oluşturmak için künt makas kullanın. Tünelden kurşun çekin ve pektoral kas kurşun çapa 6-0 Prolen sütür kullanın. Dikiş, kurşun maruz kalan kısmının üstüne, kurşun ve altta yatan kas arasında iyi bir iletişim oluşturur emin olun. Kas kurşun hareketsiz, söz konusu proksimal ikinci bir dikiş kullanın. 6-0 Prolen sütür kullanarak cilt insizyonu kapatın.
- Olumlu kurşun (kırmızı kılıf), sol diyaframın altında, sol karın içinde ve kalp altında yerleştirilir. Kurşun 6-0 Prolen dikiş yatan periton doku demirlemiş ve periton dokusu ile iyi bir iletişim olması gerekir. Kurşun implantasyonu sitesi, dikey orta hat kesi yakın böylece mevcut cerrahi alanında ile kolayca erişilebilir olması nedeniyle ek bir kesi bu adımı gerekli değildir. Periton dokusunun temel bağırsak perforasyonu önlemek için kaldırılmış olması gerektiğini unutmayın.
- Abdominal fasya ve cilt katmanlarında 6-0 Prolen sırayla kapatın.
4. Post-Operatif Bakım
- [1 mg / ml] ameliyattan hemen sonra analjezi için buprenorfin fare 0.1 mL verin. Isıtılmış bir pad üzerinde cerrahi kurtarmak için fare izin verin. Fare, uzun süreli ameliyatlar> 30 dk, ya da fare kuru görünüyorsa, rehidrasyon için periton içine 0.2-0.3 mL steril serum fizyolojik enjekte etti. Devam post-operatif analjezi için üç gün boyunca günde iki kez buprenorfin fareleri sağlamak için standart bir uygulamadır ve her sekiz saat sonra gerektiği gibi.
- Betadin ameliyat sonrası tahrişi önlemek için bir alkollü bez ile temizleyin. Ameliyat sonrası sağlık sonraki belirlenmesi için cerrahi sonrası kilo kaydetmeyi unutmayın.
- Ameliyattan sonra 8-24 saat, bu ağrıyı azaltmak ve farenin ameliyat sonrası yerinde clawing kurşun yerleştirme başarısızlığı azaltmak gibi, fare, ihtiyaç duyulan buprenorfin ile ek analjezi vermek.
5. Temsilcisi Sonuçlar
Cilt altında subkutan yol ile doğru yapıldığında, fare karın kesiler kapalı olmalıdır. Genellikle, fare anestezi kurtarmak için 10-30 dakika sürer. Fareler tamamen ameliyatla kurtarıldı önce hareketlilik post-operatif kilo kaybı ve normalleşme kurtarma kanıtladığı gibi, yaklaşık 7-10 gün sürer.
Ameliyat sonrası en sık görülen komplikasyon, ameliyat sonrası ilk 10 gün içinde deri yoluyla uzuv yol açan erozyon. Bu sık görülen komplikasyon, sıkıca subkutan derialtı dokularda veya periton bağlı kalarak kaçınılmalıdır. Bu teknik, fare ambulates, cilt üzerinde basınç ve sürtünme oluşturmak gevşek yol açar, kaçınır. Rağmen daha az yaygın, enfeksiyon ve sepsis steril tekniği, kullanılan telemeters eksik temizlik hataları oluşabilir.
EKG çıkışı, veri toplama yazılımı, Veri Bilimler International (DSİ) ile birleştiğinde bir alıcı matrisi tarafından kaydedilen olabilir. Dalgaformu sonuçları aşağıda Şekil 3'te görüldüğü gibi açıkça tanımlanmış bir P dalgası, atriyal depolarizasyon gösteren, hem de ventriküler depolarizasyon anlamına QRS dalgası, içermelidir. Kaliteli EKG iz, açıkça tanımlanmış 1:1 oranında net bir şekilde tanımlanmış QRS dalgası önceki bir P dalgası olması gerekir. Düşük arka plan sinyali olmalı ve wild-tip farelerden RR aralıkları düzenli olmalı. Kalitesiz EKG iz sonraki bilgisayar analizi zor hale getirebilir belirsiz P veya QRS dalgaları, ya da arka plan sinyal olabilir. Zayıf bir EKG izlemesi genellikle yeniden implante uzaktan ölçüm açar, bir defada bir sabit olabilir. Uzaktan ölçüm kurşun yeniden implant için, fare anestezi altında yer, ve cerrahi tekniği kullanılarak, doğrudan söz konusu yol örten deride bir kesi yapmak. Kurşun erişildiğinde, kurşun demirleme sütür kesme ve tekrar kurşun demirleme önce istediğiniz konuma kurşun taşımak. Son olarak, 6-0 Prolen cerrahi sitesi kapatın.
Şekil 1: pozitif ve negatif potansiyel müşteriler ile küçük bir hayvan uzaktan ölçüm bir örnek . Genel olarak, kırmızı kurşun olumlu kurşun ve beyaz kurşun negatif kurşun. Her kurşun tel açıkta bir yalıtkan kılıf, 5-7 mm ve deri yoluyla kurşun erozyonu önler plastik kapaklı bir ucu, olması gerekir.
Şekil 2: bir fare uygun uzaktan ölçüm uygulama yerleri gösteren Karikatür. Beyaz (negatif) kurşun, farenin sağ üst göğüs implant ve sol karın, uzaktan ölçüm duyuları gibi "kurşun iki" yapılandırma kırmızı (pozitif) kurşun konur.
Şekil 3: normal sinüs ritmi bir fare Temsilcisi dalga şekli. P dalgası atriyal depolarizasyon temsil eder ve QRS kompleks ventriküler depolarizasyon temsil eder. Yüksek kaliteli dalga 1:1 oranında her QRS kompleksi önceki bir farklı P dalgası olmalıdır.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
Bu prosedürün kritik adımlar fare hayatta kalma ameliyat öncesinde uygun temizlik ve hazırlık. Uzaktan ölçüm ve fare ameliyat yerinin düzgün bir şekilde temizlenir, çok daha iyi bir ameliyat sonrası sonuçları vardır. Ayrıca, yerleştirme yol yakın ilgi, ameliyat sonrası cilt erozyonu azaltır. Tekniğine Olası değişiklikler yan duvar LV fonksiyonu (I yapılandırması yol), veya EKG dalga formu analizi için sadece uzaktan ölçüm değerlendirmek için alternatif yapılandırmaları, aynı zamanda sıcaklık ve hatta kan basıncı analizi [bu makalenin kapsamı dışındadır.] . EKG telemetri kayıt için alternatif bir konuma harici kablo ile subkutan yol yerleştirme, yani olmayan bir implante uzaktan ölçüm. Bu Yenidoğan EKG dalga kaydı için uygun, ancak ambulatuar EKG telemetri için pratik değildir.
Telemetri implantasyon ambulatuvar EKG takibi için güçlü bir araçtır ve ventriküler taşikardi oluşumu, ani kardiyak ölüm, AV nodal blok, atriyal fibrilasyon değerlendirmek için kullanılır olmuştur. 1,2,3 Ayrıca, telemetri analiz uygulamaları vermiştir değerli verilerinizi kalp atış hızı ve kalp hızı değişkenliğinin kontrolüne ilişkin EKG uzaktan ölçüm teknolojisi 4,5 Son gelişmeler çekirdek vücut ısısını ve kan basıncını hassas ölçümler dahil 6 Böylece, uzaktan ölçüm implantasyonu, fare ve diğer hayvan modelleri fizyolojik değişiklikler assaying için değerli bir tekniktir hastalık.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Acknowledgments
Mark McCauley, Ulusal Sağlık Enstitüsü, mentorluk eğitim bursu 5T32HL066991-07 tarafından desteklenen
Xander Wehrens NIH / NHLBI hibe 1R01HL091947-01A209 ve 3R01HL089598-03S109 tarafından desteklenmektedir
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Steri 250 Bead Sterilizer | Inotech | IS-250 | |
| Blunt-Ended Scissors | Roboz Surgical Instruments Co. | RS-5980 | |
| Blunt-Ended Forceps (x2) | Roboz Surgical Instruments Co. | RS-5138 | |
| Veterinary Anesthesia Vaporizer | Surgivet | Isotec 4 | |
| T/Pump | Gaymar Industries | P/N11184-000 | |
| Propylene Blue Monofilament Suture | Ethicon Inc. | 8718 | |
| Povodone Iodine, 10% | Equate | N/A | |
| Alcohol Swabs | PDI | B339 | |
| Tergazyme | Alconox, Inc. | 21837-118 | |
| Wavidicde-01 | Medical Chemical Corporation | Wavicide-01 | |
| ECG Telemeter | DataSciences International | EA-F20 |
References
- Cerrone, M. Bidirectional ventricular tachycardia and fibrillation elicited in a knock-in mouse model carrier of a mutation in the cardiac ryanodine receptor. Circ Res. 96 (10), e77-e77 (2005).
- Chelu, M. G. Calmodulin kinase II-mediated sarcoplasmic reticulum Ca2+ leak promotes atrial fibrillation in mice. J Clin Invest. 119 (7), 1940-1940 (1940).
- Sood, S. Intracellular calcium leak due to FKBP12.6 deficiency in mice facilitates the inducibility of atrial fibrillation. Heart Rhythm. 5 (7), 1047-1047 (2008).
- Swoap, S. J., Gutilla, M. J. Cardiovascular changes during daily torpor in the laboratory mouse. Am J Physiol Regul Integr Comp Physiol. 297 (3), R769-R769 (2009).
- Costa-Goncalves, da, C, A. Role of the multidomain protein spinophilin in blood pressure and cardiac function regulation. Hypertension. 52 (4), 702-702 (2008).
- Wehrens, X. H., Kirchhoff, S., Doevendans, P. A. Mouse electrocardiography: an interval of thirty years. Cardiovasc Res. 45 (1), 231-231 (2000).
