Waiting
Login processing...

Trial ends in Request Full Access Tell Your Colleague About Jove
JoVE Journal Medicine
Click here for the English version

Medicine

התערבות טווינה במודל ארנב של דלקת מפרקים ניוונית בברך

Published: August 25, 2023 doi: 10.3791/65763
Automatic Translation
*1, *2, 3, 1, 1, 3, 1, 3, 3
1Shandong University of Traditional Chinese Medicine, 2Liaoning University of Traditional Chinese Medicine, 3Shandong University of Traditional Chinese Medicine Affiliated Hospital
* These authors contributed equally

Summary

הפרוטוקול מתאר שיטה להתערבות טווינה במודל ארנב של דלקת מפרקים ניוונית בברך.

Abstract

דלקת מפרקים ניוונית בברך (KOA) מאופיינת בעיקר בשינויים ניווניים בסחוס של מפרק הברך וברקמות הרכות שמסביב. יעילותה של טווינה בטיפול ב- KOA אושרה, אך יש לחקור את המנגנון הבסיסי. מחקר זה נועד לבסס מודל ארנב KOA אפשרי מבחינה מדעית שטופל בטווינה כדי לחשוף את המנגנונים העומדים בבסיסו. לשם כך, 18, ארנבים ניו זילנדים זכרים בני 6 חודשים חולקו באופן אקראי לקבוצות דמה, מודל וטווינה, עם 6 ארנבים בכל קבוצה. מודל KOA הוקם על ידי הזרקת תמיסת פפאין 4% לחלל מפרק הברך. קבוצת טווינה התערבה עם טווינה בשילוב עם שיטת תיקון סיבובי מפרק הברך במשך 4 שבועות. רק האחיזה והקיבוע הסטנדרטיים בוצעו בקבוצות דמה ומודל. בתום ההתערבות בת השבוע, נצפה טווח התנועה של מפרק הברך (ROM), ובוצע צביעת סחוס המטוקסילין-אאוסין (HE). המחקר מראה כי Tuina יכול לעכב אפופטוזיס chondrocyte, לתקן רקמת סחוס, ולשחזר ROM מפרק הברך. לסיכום, מחקר זה מדגים את ההיתכנות המדעית של טיפול Tuina עבור ארנבים מודל KOA, תוך הדגשת היישום הפוטנציאלי שלו במחקר של KOA ומצבים דומים הקשורים למפרקי הברך.

Introduction

דלקת מפרקים ניוונית בברך (KOA) היא מחלה ניוונית של מפרק הברך, המתבטאת בעיקר בכאבי ברכיים, נפיחות, עיוותים ותנועה מוגבלת, עם שיעור נכות גבוה ושכיחות גבוהה יותר בנשים, עם 527.81 מיליון חולים עם דלקת מפרקים ניוונית ברחבי העולם בשנת 2019 ושכיחותה העולמית מהווה 60.6% מכלל השכיחות העולמית של OA1. מבחינה קלינית, הטיפול ב- KOA מחולק בדרך כלל לטיפולים לא כירורגיים וכירורגיים. טיפולים לא כירורגיים כוללים פיזיותרפיה, טיפול תרופתי והזרקת פלזמה עשירה בטסיות דם 2,3. טווינא היא שיטת טיפול נפוצה, בטוחה, אמינה ויעילה ברפואה הסינית. מחקר זה משתמש בטווינה בשילוב עם שיטת תיקון סיבובי מפרק הברך לטיפול ב- KOA. טכניקות טווינא כגון שיטת הלישה והלחיצה הסיבובית יכולות לאזן את רקמת השריר, להפחית כאב, להתאים את רמות הגורמים הדלקתיים, לשפר את חילוף החומרים ברקמות ולעכב ניוון סחוס מפרקי 4,5. שיטת התיקון הסיבובי של מפרק הברך יכולה להתאים את יישור עצמות הגפיים התחתונות והמפרקים, לשפר את מרווח מפרק הברך, להחזיר את קו הכוח הרגיל ולאזן את הביומכניקה של הגפיים התחתונות 6,7,8,9. תרגילי התנגדות יכולים לשפר את מסת השריר ואת כוחו ולקדם את חידוש רקמת הסחוס10,11. מחקר ראשוני מצא כי פרוטוקול Tuina זה יעיל משמעותית יותר מכמוסות גלוקוזאמין סולפט פומיות בטיפול ב- KOA, עם תחילת פעולה מהירה יותר ועיכוב משמעותי של ניוון כונדרוציטים ותיקון רקמת סחוס פגועה12. בטיפול ב- KOA, בהשוואה לטיפול בטווינה, לתרופות נוגדות דלקת שאינן סטרואידים יש תופעות לוואי ויעילות לא מספקת לטווח ארוך, סיכונים ועלויות ניתוחיות גבוהות יחסית, ודורשות אינדיקציות מסוימות לטיפול כירורגי, עם בעיות לאחר הניתוח וסיבוכים פריפרוסתטיים13,14,15. בהשוואה לטיפול תרופתי וניתוח, טיפול Tuina עבור KOA מציע מספר יתרונות, כולל תופעות לוואי מופחתות, סיכון נמוך יותר, בטיחות משופרת, חסכוניות ויעילות לאורך זמן. בנוסף, הוא יכול להקל ביעילות על כאבי מפרקי ברכיים, נפיחות, קפיצות ותנועה מוגבלת 6,13,16,17.

עם זאת, יש להבהיר את המנגנון של Tuina לטיפול ב- KOA, המגביל את השיפור והשלמות של פרוטוקול הטיפול ב- KOA. לכן, לימוד מנגנון התערבות טווינה ב- KOA באמצעות ניסויים בבעלי חיים היא שיטה יעילה. לארנבים, בהשוואה לחולדות, יש מזג צייתני ומפרקי ברכיים גדולים יותר. המבנה האנטומי והאינדקסים הביוכימיים של הסחוס דומים לאלה של בני אדם, ולכן זהו נושא מתאים לחקר המנגנון של מחלת מפרקי הברך על ידי Tuina18. מודל KOA שהוקם על ידי הזרקת פפאין לחלל מפרק הברך של ארנבים יש את היתרונות של זמן דוגמנות קצר, טראומה מופחתת, שיעור הצלחה גבוה, שיעור הישרדות גבוה, ומנגנון פתולוגי דומה KOA19. מחקר זה נועד לבסס פרוטוקול ניסויי בבעלי חיים אפשרי מבחינה מדעית להתערבות Tuina ב- KOA ולחקור את המנגנון של Tuina.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Protocol

המחקר אושר על ידי ועדת האתיקה של בית החולים המסונף של אוניברסיטת שאנדונג לרפואה סינית מסורתית (מספר אישור: 2020-29).

1. חיות ניסוי

  1. יש לגדל ארנבים ניו זילנדים זכרים בני 18 חודשים בני 6 חודשים (2.75 ± 0.25 ק"ג) בכלובים בודדים סטנדרטיים (מחזור אור/חושך של 12 שעות, טמפרטורה 20-24 מעלות צלזיוס, לחות אוויר 40%-60%).

2. שיטת קיבוץ

  1. בחר 6 מתוך 18 הארנבים הניו זילנדים כקבוצת דמה בשיטת המספר האקראי והקצה את 12 הארנבים הנותרים לקבוצת הדוגמנות.
  2. לאחר מידול מוצלח, חלקו את ארנבי קבוצת הדוגמנות לקבוצות מודל וטווינה לפי שיטת המספרים האקראיים, עם 6 ארנבים בכל קבוצה.
  3. בצע את התערבות Tuina בקבוצת Tuina. בצע את אותה אחיזה וקיבעון בקבוצת הבושה והמודל ללא טווינה. פעלו אחת ליומיים במשך 4 שבועות (איור 1).

3. ביסוס מודל KOA

  1. בצע האכלה אדפטיבית לארנבים במצב הסטנדרטי בשבוע 1. גישה אד-ליביטום, למים ולמזון. הניחו ארנבים על צדם הימני בקופסאות קיבוע הארנבים כדי להרגיע אותם למשך 15 דקות ביום. מקבעים את ראשם על לוחות קיבוע הראש. תקן את לוחות ההידוק והברגים כך שהארנבים לא יוכלו לזוז. לבשו כפפות מגן כשאתם תופסים ומתקנים את הארנבים (איור 1).
  2. בימים 1, 4 ו-7 בשבוע 2, הניחו את כל 18 הארנבים בצד ימין שלהם בקופסאות קיבוע הארנבים (איור 1). בצע את הפעולות המוזכרות להלן.
  3. הזריקו 3% נתרן פנטוברביטלי (1 מ"ל/ק"ג) לווריד האוזן השולי של הארנב. יש לגלח את מפרק הברך השמאלית של הארנב בעזרת מכונת גילוח לבעלי חיים, והתוצאה היא שאין שיער על העור החשוף.
  4. חיטאו את מפרק הברך השמאלית של הארנב מבפנים החוצה באמצעות יודופור רפואי ו-75% אלכוהול (איור 2A).
  5. כופפו את מפרק הברך השמאלית של הארנב ב-60°. הכנס מחט (22G, 0.7 מ"מ x 30 מ"מ) מ Waixiyan. הזריקו 4% תמיסת פפאין (0.1 מ"ל/ק"ג, 0.275 מ"ל בממוצע לחיה במשקל 2.5 ק"ג) לחלל מפרק הברך של קבוצת הדוגמנות. הזריקו כמות שווה של תמיסת נתרן כלורי 0.9% לקבוצת הדמה. מנת ההזרקה הזו נסבלת היטב על-ידי החיה מבלי לגרום לעדות לכאב או מצוקה (איור 2B).
    הערה: Waixiyan (EX-LE5) ממוקם בהפסקה הצידית של הרצועה הפטלרית, ו- Neixiyan (EX-LE4) ממוקם בהפסקה המדיאלית של הרצועה הפטלרית20,21,22.
  6. לחץ על חור הסיכה למשך 2 דקות כדי למנוע שפיכת תמיסה.
  7. הניחו את ידיכם מעל ומתחת למפרק הברך השמאלי של הארנב. כופפו בעדינות ובאופן פסיבי את מפרק הברך של הארנב והאריכו 10 פעמים בטווח התנועה הפיזיולוגי (ROM) כדי להחדיר את התמיסה לחלל מפרק הברך באופן שווה15. שימו לב לארנב כל 8 שעות למשך הדוגמנות. מתן buprenorphine SR (0.18 מ"ג / ק"ג) כאשר הארנבים מראים סימנים של הסתתרות, רעד של גפיים, נשימה רדודה ומהירה, או אפילו נשיכה ושריטה.
  8. בשבוע 7, שימו לב לברך שמאל של הארנב במצב מכופפת כנפוחה, עם טונוס שרירים מוגבר סביב הברך עם גושים וסטריה, תגובה מוגברת לגירוי מקומי כואב, ירידה ברום הברך, הליכה צולעת, והסטה של מרכז הכובד לצד הבריא. זה קובע את ההצלחה של מודל KOA (איור 1, איור 2C)23,24.

4. מניפולציה Tuina

  1. בצע אימון באמצעות מכשיר קביעת פרמטרים של טכניקת Tuina לפני מניפולציה Tuina. התאמנו במשך שעה ביום במשך חודש על ידי אותו איש מקצוע.
    1. בצעו את שיטת הלישה והלחיצה הסיבובית עם האגודל על פלטפורמת סימולציית המניפולציה של Tuina בכוח של 5 N ובתדירות של 60 פעמים לדקה (איור 3A,C).
    2. נתחו את הכוח בשלושה כיוונים של צירי X, Y ו-Z באמצעות תוכנת עיבוד פרמטרי המניפולציה של Tuina ובדקו את הגודל, התדירות וזמן הפעולה של הכוח המוצגים על המסך (איור 3B, D).
    3. להעריך את הפרמטרים המכניים של מניפולציית Tuina ולתקנן את מניפולציית Tuina באמצעות התוכנה במהלך האימון. שמור על שיטת הלישה והלחיצה הסיבובית הסטנדרטית עם האגודל בכוח של 5 N, תדירות של 60 פעמים לדקה, וזמן פעולה רציף של 10 דקות. ראו את צורת הגל הכמותית המתוקננת של המניפולציה באיור 3B,D 25,26,27.
  2. הניחו את הארנב על צדו הימני בקופסת קיבוע הארנב. לטפו בעדינות את הארנב במשך 10 שניות כדי להרגיע ולהרגיע את הארנב21. לאחר מכן בצע את התערבות טווינה.
  3. בצעו את שיטת הלישה הסיבובית עם האגודל על נוקשות שרירי הברך השמאלית של הארנב, קשרי גידים ופטלה, עם מניפולציה הלוך ושוב למעלה ולמטה בכוח של 5 N ותדירות של 60 פעמים לדקה למשך 5 דקות.
  4. השתמש בקצה האגודל כדי ללחוץ על Yanglingquan (GB 34), Yinlingquan (SP 9), Waixiyan (EX-LE5), Neixiyan (EX-LE4), Heding (EX-LE2), Xuehai (SP 10), Liangqiu (ST 34) ו- Weizhong (BL 40)20,21,22, בכוח של 5 N ותדירות של 60 פעמים לדקה, והפעל בכל נקודה במשך 30 שניות.
  5. בצע את שיטת התיקון הסיבובי על מפרק ברך הארנב ובצע זאת 3x בנפרד עבור כל חיה בקבוצה.
    1. תקן את עצם הירך ביד אחת. הניחו תחילה את היד השנייה מאחורי מפרק הברך, ולאחר מכן תקנו את הקונדילים הטיביאליים הצדיים והמדיאליים בעזרת האגודל והטבעת, בהתאמה. תקן את fossa popliteal עם האצבע המורה ואת האצבעות האמצעיות. הפעילו כוח משיכה ופיתול.
    2. תקן את עצם הירך ביד אחת. מקבעים את הקצוות המדיאליים והצדדיים של הפטלה בעזרת האגודל והאצבעות הקטנות של היד השנייה. תקן את בסיס הפטלר באמצעות האצבע המורה, האמצעית והטבעת. הפעל כוח פיתול.
    3. שמור על כיוון כוח המתיחה במקביל לציר הארוך של השוקה, וכיוון כוח הפיתול בקו אחד עם כיוון השייאן התחתון. השתמש באצבעות כדי להחזיק את העור במקום כדי למנוע חיכוך בין העור לאצבעות.

5. מדידת ROM של מפרק הברך

הערה: לפני המדידה, הרגיעו את הארנב. סטטיסטיקאי המדידה ומפעיל המדידה שונים זה מזה.

  1. למדוד את הניידות של מפרק הברך השמאלית של ארנבים מכל קבוצה בתחילת הניסוי ובסוף כל שבוע.
  2. מקמו את הארנב על צדו הימני בקופסת קיבוע הארנב וקיבעו את עצם הירך השמאלית שלו ביד אחת.
  3. יישרו את מרכז המעגל של הארתרוסקופ הרפואי עם המרכז הלטרלי של מפרק הברך השמאלי של הארנב. האריכו את זרוע הקיבוע כך שתהיה מקבילה להארכת הקו המחברת בין מרכז המעגל לטרוכנטר הגדול יותר. האריכו את הזרוע הניידת כך שתהיה מקבילה לציר האורך של השוקה.
  4. מניחים את היד השנייה על ציר האורך של השוקה, כ-9 ס"מ ממפרק הברך. יש להפעיל ידנית מומנט של כ-750-850 גרם במהירות זוויתית של 3°/s 28.
  5. בצע זאת עד שמפרק הברך של הארנב כבר לא זז . רשום את מספר המעלות שמציג הגוניומטר כאשר המפרק מפסיק לנוע; זהו ROM מפרק הברך. בעת הקריאה, ודא שקו הראייה מאונך לפני השטח של הסרגל.
  6. למדוד ROM עבור כל ברך 3x ולקחת את הערך הממוצע28.

6. צביעת Hematoxylin-eosin (HE)

  1. אוסף דוגמאות
    1. שבוע מסיום ההתערבות (איור 1), הניחו את הארנב על צדו הימני בקופסת קיבוע הארנב (ארנבים נוטים יותר להישאר רגועים כשהם שוכבים על צדם הימני). הזריקו פנטוברביטון (100 מ"ג/ק"ג) לווריד השולי באוזן הארנב להמתת חסד הומנית29,30.
    2. פתח את חלל ברך שמאל במהירות בעזרת אזמל, מספריים ומלקחיים המוסטטיים כדי להסיר את הרקמה הרכה המחוברת סביב הסחוס של עצם הירך הדיסטלית.
    3. אספו דגימת עצם סחוס בגודל של כ-1X1 ס"מ של עצם הירך הדיסטלית עם מלקחיים נושכים והניחו אותה במי מלח לניקוי.
  2. קיבוע והסתיידות
    1. מניחים את הסחוס בתמיסת פרפורמלדהיד 4% ומקבעים אותו למשך 72 שעות.
    2. יש לשטוף במים זורמים במשך 12 שעות. Decalcify ב ethylenediaminetetraacetic חומצה (EDTA) decalcification פתרון במשך 6 שבועות. שנה את פתרון הסתיידות EDTA כל 3 ימים. לקבוע את נקודת הסיום של decalcification כאשר רקמת העצם הופכת רכה וגמישה, ניתן לכופף בקלות, ו פירסינג בצורה חלקה עם מחט31.
  3. התייבשות של חלקים משובצים
    1. הניחו את הדגימה במייבש אוטומטי להתייבשות.
    2. מניחים את הרקמה השעווה והגזוז על תחתית מיכל מרובע עם שעוות פרפין מומסת למשך שעה אחת. מכניסים אותם לתנור קירור עד שהם מתקררים ומתמצקים לגושים קשים. פורסים את גוש הרקמה המשובץ בפרפין בכלי פריסה לעובי של 4 מיקרומטר.
    3. פתחו את החלקים במכונת האקונומיקה, הניחו אותם על שקופיות דבק, ספרו אותם וייבשו אותם בעזרת מכונת אפייה פרוסה ותנור.
  4. הסרת שעווה והידרציה
    1. אופים את הנתחים בחום של 180 מעלות במשך 60 דקות.
    2. משרים את החלקים בקסילן למשך 7 דקות, ולאחר מכן 2 סיבובים נוספים של השריה בקסילן טרי למשך 7 דקות כל אחד.
    3. משרים את הפרוסה באתנול נטול מים למשך 5 דקות, ולאחר מכן משרים במשך 2 דקות כל אחד ב-95% אתנול, 85% אתנול ו-75% אתנול.
    4. משרים חלקים במים מזוקקים למשך 2 דקות.
  5. צביעת המטוקסילין: מכתים חלקים עם המטוקסילין למשך 20 שניות. יש לשטוף חלקים במים זורמים. משרים חלקים במקטע אתנול חומצה הידרוכלורית למשך 3 שניות. יש לשטוף חלקים במי ברז במשך 5 דקות.
  6. צביעה מחדש של אאוסין: מקטעי כתמים עם אאוזין למשך 30 שניות. יש לשטוף חלקים במי ברז.
  7. התייבשות לשקיפות הדגימה
    1. מניחים חלקים באתנול 95% פעמיים במשך 3 שניות כל אחד, ולאחר מכן מניחים אתנול נטול מים במשך 3 שניות.
    2. שוב, מניחים את הפרוסות באתנול נטול מים למשך דקה אחת, ולאחר מכן 2 סיבובים של שטיפת קסילן למשך דקה כל אחד.
  8. איטום הפרוסות: מוציאים את הפרוסות, מטפטפים חומר אטימת מסטיק ניטרלי, מכסים במכסה ומשאירים את הפרוסות להתייבש במכסה אדים עד לקבלת ריח.
  9. צילום הדגימה: התבוננות וצילום מתחת לשדה הראייה של מיקרוסקופ אור ברזולוציה של 100x.
  10. הערכה: להעריך את רקמת הסחוס לפי ציון מנקין לכל קבוצה32.

7. ניתוח נתונים

  1. נתח סטטיסטית את נתוני הניסוי באמצעות תוכנת ניתוח. כאשר הנתונים היו נתונים להתפלגות נורמלית, השווה שתי קבוצות של דגימות על ידי מבחן t וקבוצות מרובות על ידי ANOVA בכיוון אחד.
  2. תוצאות מפורשות כממוצע ± סטיית תקן (SD). ייצוג תוצאות כתרשימים סטטיסטיים באמצעות תוכנה מסחרית. ההבדלים היו מובהקים סטטיסטית ב-p <-0.05.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Representative Results

מידת ההגבלה בתנועת הברך והנזק לרקמת הסחוס משקפת את חומרת ה-KOA. הרום של מפרק הברך משקף את מידת ההגבלה של תנועת מפרק הברך. ככל שהרום של מפרק הברך קטן יותר, כך המגבלה בתנועת מפרק הברך חמורה יותר. להיפך, ככל שהרום של מפרק הברך גדול יותר, כך מידת תנועת הברך תקינה יותר. צביעת HE כדי לבחון את המורפולוגיה והמבנה של רקמת הסחוס משקפת את מידת הנזק לרקמת הסחוס. ככל שפני השטח של רקמת הסחוס לא סדירים יותר, קיומם של סדקים ופגמים גבוה יותר, ככל שמספר הכונדרוציטים נמוך יותר, עובי שכבת הסחוס דק יותר, סידור התאים לא מסודר יותר, פיזור התאים לא אחיד יותר, כך השכבות לא ברורות יותר, קו הגאות פחות ברור ושלם, ככל שציון המנקין גבוה יותר, כך הפגיעה ברקמת הסחוס של מפרק הברך חמורה יותר, ולהפך, כך רקמת הסחוס תקינה יותר32. בעת הקמת מודל KOA, ניתן לקבוע את הצלחת הדוגמנות על ידי התבוננות במידת ההגבלה של תנועת מפרק הברך ארנב23,24. ניתן לקבוע את יעילותו של טווינה על ידי התבוננות בשיפור מידת ההגבלה של תנועת מפרק הברך ומידת הנזק לרקמת הסחוס כאשר מפרק הברך ארנב מתערב על ידי טווינה12.

לאחר שבוע 7, השוואת מפרק הברך השמאלית של שתי קבוצות הארנבים גילתה כי השרירים בקבוצת הדוגמנות היו נוקשים יותר והתנועה הייתה מוגבלת, עם ROM של 74.67° ± 1.21°, שהיה נמוך יותר מ-140.17° ±-1.33° בקבוצת הדמה, מה שמרמז על מידול מוצלח (איור 2C, איור 4).

לאחר השבוע ה-12 של מדידה וניתוח, רום מפרק הברך של קבוצת הדמה, קבוצת המודל וקבוצת טווינה היו 140.33° ±-1.37°, 76.33° ±-1.37°, ו-134.33° ±-1.51°, בהתאמה, וניידות מפרקי הברך של קבוצת Tuina הייתה גבוהה משמעותית מזו של קבוצת המודל (p < 0.01), מה שמצביע על כך שטווינה יכול לשפר את תפקוד מפרקי הברך של ארנבי KOA (איור 5).

צביעת הסחוס של מפרק הברך השמאלית של ארנבים בכל קבוצה הראתה כי פני רקמת הסחוס של קבוצת הדמה היו חלקים ושלמים, מספר הכונדרוציטים היה 331.67 ± 13.98, עובי שכבת הסחוס היה 259.42 ± 41.97 מיקרומטר, התאים היו מסודרים היטב ומפוזרים באופן שווה, הרמות היו ברורות, קווי הגאות היו ברורים, רציפים ושלמים, והציון של המנקין היה 0.33 ±-0.52. בהשוואה לקבוצת הדמה, פני רקמת הסחוס של קבוצת המודל היו לא סדירים עם פגמים וסדקים, מספר הכונדרוציטים היה 29.50 ± 8.04, עובי שכבת הסחוס היה 103.15 ± 24.64 מיקרומטר, התאים היו לא מסודרים, התפזרו באופן לא שווה, השכבות לא היו ברורות, קווי הגאות לא היו ברורים ולא שלמים, והציון של מנקין היה 9.33 ± 1.03. בהשוואה לקבוצת המודל, הסחוס של קבוצת טווינה היה בעל משטח רגיל, עם פחות פגמים וסדקים, מספר הכונדרוציטים היה 291.83 ± 8.18, עובי שכבת הסחוס היה 183.58 ± 15.34 מיקרומטר, התאים היו מסודרים יותר, מפוזרים מעט לא אחיד, השכבות היו ברורות יותר, וקווי הגאות היו ברורים ושלמים יחסית, והציון של המנקין היה 3.00 ± 0.63 (תרשים 6)15,23,33. מספר התאים, עובי שכבת הסחוס והציון של מנקין בקבוצת טווינה היו טובים משמעותית מאלה שבקבוצת המודל (p < 0.001), מה שמצביע על כך שטווינה יכול לתקן את רקמת הסחוס הפגועה.

Figure 1
איור 1: פרוטוקול להקמה וטווינה של ארנבים מודל KOA. לאחר האכלה אדפטיבית של ארנבים במשך שבוע אחד, לבנות את מודל KOA על מפרק הברך השמאלית של ארנבים במשך 6 שבועות, עם זריקות של 4% תמיסת פפאין בימים 1, 4, ו -7 של תחילת הדוגמנות. התערבו במפרק הברך השמאלית של הארנבים על ידי טווינה במשך 4 שבועות, פעם אחת פעם ביומיים. לאחר שבוע של האכלה, למדוד את ROM של מפרק הברך השמאלית של ארנבות ולקחת דגימות. אנא לחץ כאן כדי להציג גרסה גדולה יותר של איור זה.

Figure 2
איור 2: הקמת מודל KOA . (A) מפרק הברך השמאלית של הארנבים הוכן ועבר חיטוי. (B) המחט הוחדרה מוואישיאן, ותמיסת 4% פפאין ותמיסת נתרן כלורי 0.9% הוזרקו לחלל מפרק הברך של קבוצות דוגמנות וקבוצות דמה של ארנבים, בהתאמה. (C) ארנבים מדגם KOA שעוצבו בהצלחה עם תנועה מוגבלת של מפרק הברך השמאלי. אנא לחץ כאן כדי להציג גרסה גדולה יותר של איור זה.

Figure 3
איור 3: אימון לטכניקות טווינה באמצעות מכשיר קביעת פרמטרים של טכניקת טווינה. (A) התאמנו לשיטת הלישה הסיבובית בעזרת אגודל. (B) העקומה של שיטת הלישה הסיבובית עם אגודל. (C) אמן את שיטת הלחיצה עם קצה האגודל. (D) העקומה של שיטת הלחיצה עם קצה האגודל. אנא לחץ כאן כדי להציג גרסה גדולה יותר של איור זה.

Figure 4
איור 4: ROM של מפרק ברך שמאל בארנבים לפני ואחרי מידול. הנתונים עובדו על ידי מבחן t על קבוצות ההונאה והדוגמנות, והתוצאות בוטאו כממוצע ± SD. ns p > 0.05,***p < 0.001. אנא לחץ כאן כדי להציג גרסה גדולה יותר של איור זה.

Figure 5
איור 5: רום מפרק ברך שמאל של ארנבים. עבור קבוצות דמה, מודל וטווינה, הנתונים עובדו על ידי ANOVA, והתוצאות בוטאו כממוצע ± SD. בשבוע 1, ROM עלה מעט בכל שלוש הקבוצות. בהשוואה לקבוצת הדמה, ה- ROM ירד בהדרגה בקבוצות המודל והטווינה בזמן הדוגמנות (p < 0.001). בניגוד לקבוצת המודל, ROM גדל בהדרגה לאחר התערבות בקבוצת Tuina (p < 0.001). אנא לחץ כאן כדי להציג גרסה גדולה יותר של איור זה.

Figure 6
איור 6: הכתמת סחוס של מפרק ברך ארנבת . (A) צביעת HE של קבוצת הדמה. (B) צביעת HE של קבוצת המודל. (ג) צביעת HE של קבוצת טווינא. (D) השוואת מספר הכונדרוציטים בין קבוצות. (ה) השוואת עובי שכבת הסחוס בין קבוצות. (ו) השוואת הציון של מנקין בין קבוצות. הנתונים עובדו על ידי ANOVA, והתוצאות בוטאו כממוצע ± SD. לאחר 12 שבועות, כפי שניתן לראות על ידי צביעת HE, רקמת הסחוס של הקבוצה הייתה שלמה מבחינה מבנית עם מספר תאים תקין וסידור; רקמת הסחוס של קבוצת המודל נהרסה מבנית עם מספר תאים נמוך וסידור לא מסודר; רקמת הסחוס של קבוצת טווינה הייתה שלמה עם מספר תאים וסידור נורמליים יחסית. ***p < 0.001. סרגל קנה מידה = 100 מיקרומטר. N = 6. אנא לחץ כאן כדי להציג גרסה גדולה יותר של איור זה.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Discussion

תכנון פרוטוקול הניסוי חשוב במיוחד כדי לחקור את המנגנון של טווינה בטיפול ב- KOA. דוגמנות KOA בוצעה על ארנבים על ידי הזרקת פפאין בוואישיאן. Waixiyan ממוקם בקריפטה הצידית של הרצועה הפטלרית, שקל לאתר, והחלל המשותף בין עצם הירך לטיביה גדול כאן במהלך כיפוף הברך, מה שמקל על הזרקה לחלל מפרק הברך ומונע נזק לרקמות הסובבות, כך שקל להקים את מודל KOA34. במהלך התערבות טווינה בארנבי KOA, ארנבי המודל הוצבו כראוי כדי להקל על ניהול טווינה. הארנבים הוכנסו לקופסת קיבוע הארנבים בצד הבריא שלהם, כשראשם קבוע, ורגשותיהם נרגעו כדי להרגיע את כל גופם ולא להיאבק. כדי לתקנן את החוזק והתדר של Tuina ולשפר את ההומוגניות של התערבויות Tuina, Tuina מבוצעת על ידי מפעיל שעבר הכשרה קפדנית במניפולציה של Tuina על ידי מכשיר קביעת פרמטרים של טכניקת Tuina.

שלב המפתח בפרוטוקול זה הוא שימוש בטווינה בשילוב עם שיטת תיקון סיבובי מפרק הברך לטיפול ב- KOA. לפני הניתוח, מישש את הגפיים התחתונות הפגועות של הארנב מהמותן ועד הקרסול, תוך התמקדות באזור סביב מפרק הברך, חיטוט אחר קשרים בגידים ונוקשות שרירים, ולאחר מכן כיפוף והארכה של מפרק הברך כדי לבחון את גובה נייקסיאן וויקסיאן למניפולציה מדויקת של טווינה. שיטת הלישה והלחיצה הסיבובית יכולה לשחרר מתח ועווית שרירים, לשפר את זרימת הדם במפרק הברך, לקדם את חילוף החומרים של חומרים דלקתיים ולהפחית נפיחות וכאב35,36. נקודות דיקור הן נקודות התגובה והטיפול של המחלה, ו- GB 34 ו- EX-LE2 הן נקודות בעלות רגישות גבוהה לטיפול ב- KOA, ועל ידי גירוי שלהן, הן יכולות לפעול על תאי פיטום, ובכך להשפיע על שחרור של 5-הידרוקסיטריפטמין, טריפטאז והיסטמין37. כריית נתונים גילתה כי GB 34, SP 9, EX-LE5, EX-LE4, EX-LE2, SP 10, ST 34 ו- BL 40 הם כולם נקודות דיקור נפוצות בפרקטיקה הקלינית38,39. נקודות אלה יש את ההשפעות של הקלה על גידים וקשרים, הפעלת זרימת הדם, והקלה על כאב38,39. מחקרים הראו כי גירוי של נקודות הדיקור הנ"ל יכול להפחית את רמות הסרום של גורמים דלקתיים כגון גורם נמק הגידול α ואינטרלוקין-1β ולעכב את הרס השלד של כונדרוציטים, ובכך לטפל KOA 39,40,41.

שיטת התיקון הסיבובי של מפרק הברך המבוצעת תחת תרגילי התנגדות אקטיביים עם רמות כוח מתכווננות קלה לביצוע ומונעת את הסיכון הפוטנציאלי לפציעה בוויסות מבנה הברך בהשוואה לטכניקות תנועה פסיבית כגון כיפוף ודחיסה. הזווית משפיעה על המומנט, וחוסר איזון בין מומנט הסגירה הפנימי של מפרק הברך למומנט החטיפה יכול להגביר עומס מפרק חריג, מה שיכול להפעיל KOA42,43,44,45. מחקרים מסוימים הראו כי התערבות טווינא עם תרגילי התנגדות קבועים יכולה לשפר את צפיפות העצם, לשחרר התכווצויות שרירים, לשחזר מסת שריר וכוח, להפחית כאב, ולטפל ביעילות KOA 46,47,48,49,50. מכיוון שברך הארנב קטנה יותר מהברך האנושית ואינה יכולה לבצע תנועות התנגדות רצוניות, הטווינה המקורית לשני אנשים שונתה לטוינה של אדם אחד, בשתי ידיים כדי להבטיח יעילות טובה יותר וקלות תפעול של שיטת התיקון הסיבובי של מפרק הברך תחת התנגדות12. כעת, על ידי קיבוע עצם הירך של הארנב ביד אחת כדי לדמות את תנועת ההתנגדות, היד השנייה משמשת לביצוע שיטת התיקון הסיבובי של מפרק הברך על ידי הפעלת כוח פיתול ומתיחה על השייאן התחתון כך שוואישיאן וניקסיאן נמצאים באותו גובה והגובה היחסי של הרמה הטיביאלית האמצעית והצידית מותאם. ניתן לכוונן את מפרק הברך גם פנימה והחוצה כדי לווסת את המומנטים שלו פנימה והחוצה, לקדם יישור צירי, להתאים את היישור של המפרקים הפמורוטיביים והפמורופטלריים, לשחזר את מבנה הכוח התקין של מפרק הברך, להפחית את העומס על מפרק הברך, להגביר את יציבות מפרק הברך, ולהחזיר את התנועתיות והתפקוד הפיזיולוגי התקין של מפרק הברך42, 43,44,45.

מחקרים קליניים קודמים של הצוות הראו את יעילותה של שיטה זו בטיפול ב- KOA, ומחקרים בבעלי חיים הראו כי היא יעילה יותר מגלוקוזאמין סולפט בטיפול ב- KOA12. Tuina יכול לתווך את אינטרלוקין 1β (IL-1β) ואת קינאז מווסת אות חוץ-תאי 1/2 (ERK1/2)-גורם שעתוק גרעיני κB (NF-κB) מסלולי איתות, להפחית את ריכוז IL-1β בסרום ההיקפי ארנב ובנוזל המפרקים, להגדיל את רמת הביטוי של לימפומה של תאי B-2 (Bcl-2), ולהפחית את רמות הביטוי של ERK1/2, Bcl-2 הקשורים x חלבון, NF-κB p65, וציסטאין אספרטט פרוטאז 3. זה עוזר לווסת את אפופטוזיס והתפשטות של chondrocytes ולאזן את הסביבה הפנימית chondrocyte מופרע, ובכך לשפר את השינויים הפתולוגיים בסחוס12.

המגבלה של שיטה זו היא שההתערבות של טווינה מבוצעת על ידי אדם ולא על ידי מכונה, וקשה למפעיל להשיג הומוגניות מלאה בחוזק ובתדירות של טווינה.

לסיכום, טווינה יכולה להפחית ביעילות את הדלקת במפרקי הברך, לעכב את ניוון סחוסי הברך ולהחזיר בהדרגה את הניידות הפיזיולוגית התקינה, ומחקר זה יכול לספק פרוטוקול מחקרי מדעי וישים למנגנון הטיפול בטווינה במחלות מפרקי הברך.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Disclosures

המחברים מצהירים כי אין ניגודי עניינים פוטנציאליים.

Acknowledgments

עבודה זו נתמכה על ידי פרויקט המדע והטכנולוגיה של הרפואה הסינית המסורתית במחוז שאנדונג (2021Q080) ופרויקט הירושה של בית הספר האקדמי לרפואה סינית מסורתית של בית הספר לרפואה סינית מסורתית [Lu-Wei-Letter (2022) 93].

Materials

Name Company Catalog Number Comments
0.9 % sodium chloride injection Sichuan Keren Pharmaceutical Co. Z22121903
-20°C refrigerator Haier BD-328WL
4 % fixative solution Solarbio P1110
4°C refrigerator Haier SC-315DS
Anhydrous ethanol Sinopharm
Automatic tissue dewatering machine Dakowei (Shenzhen) Medical Equipment Co. HP30
Blast drying oven Shanghai Yiheng Scientific Instruments Co. DHG-9070A
Coverslip Biyuntian FCGF50
Electric thermostat water bath Shanghai Yiheng Scientific Instruments Co. HWS-26
Embedding freezing table Changzhou Paishijie Medical Equipment Co. BM450
Embedding machine Changzhou Paishijie Medical Equipment Co. BM450A
Ethylenediaminetetraacetic acid decalcification solution Servicebio G1105-500ML
Fluorescent inverted microscope Leica Leica DM IL LED
Hematoxylin-eosin staining kit Cisco Jet EE0012
Hydrochloric acid Laiyang Economic and Technological Development Zone Fine Chemical Plant
Medical joint goniometer KOSLO
Neutral gum Cisco Jet EE0013
Normal-grade male New Zealand rabbit Jinan Xilingjiao Breeding and Breeding Center SCXK (Lu) 2020 0004
Papain(3000 U/mg) Bioss D10366
Pathological tissue bleaching and drying instrument Changzhou Paishijie Medical Equipment Co. PH60
Pet electric clippers Codos CP-3180
Rabbit fixing box any brand
Rotating Slicer Leica 531CM-Y43
Tuina technique parameter determination instrument Shanghai DuKang Instrument Equipment Co. Ltd. ZTC-Equation 1
Ventilator TALY ELECTRIC C32
Xylene Fuyu Reagent

DOWNLOAD MATERIALS LIST

References

  1. Long, H. B., et al. Prevalence trends of site-specific osteoarthritis from 1990 to 2019: findings from the global burden of disease study 2019. Arthritis & Rheumatology. 74 (7), 1172-1183 (2022).
  2. Tschopp, M., et al. A randomized trial of intra-articular injection therapy for knee osteoarthritis. Investigative Radiology. 58 (5), 355-362 (2023).
  3. Buchanan, W. W., Kean, C. A., Kean, W. F., Rainsford, K. D. Osteoarthritis. Inflammopharmacology. , (2023).
  4. Wang, W. Y., et al. A randomized, parallel control and multicenter clinical trial of evidence-based traditional Chinese medicine massage treatment VS External Diclofenac Diethylamine Emulgel for the treatment of knee osteoarthritis. Trials. 23 (1), 555 (2022).
  5. Wang, M. N., et al. Mechanism of traditional Chinese medicine in treating knee osteoarthritis. Journal of Pain Research. 13, 1421-1429 (2020).
  6. Katz, J. N., Arant, K. R., Loeser, R. F. Diagnosis and treatment of hip and knee osteoarthritis: A review. The Journal of the American Medical Association. 325 (6), 568-578 (2021).
  7. Chang, A., et al. The relationship between toe-out angle during gait and progression of medial tibiofemoral osteoarthritis. Annals of the Rheumatic Diseases. 66, 1271-1275 (2007).
  8. Jenkyn, T. R., Hunt, M. A., Jones, I. C., Giffin, J. R., Birmingham, T. B. Toe-out gait in patients with knee osteoarthritis partially transforms external knee adduction moment into flexion moment during early stance phase of gait: a tri-planar kinetic mechanism. Journal of Biomechanics. 41 (2), 276-283 (2008).
  9. Brouwer, G. M., et al. Association between valgus and varus alignment and the development and progression of radiographic osteoarthritis of the knee. Arthritis & Rheumatism. 56 (4), 1204-1211 (2007).
  10. Liao, C. D., et al. Effects of protein supplementation combined with resistance exercise training on walking speed recovery in older adults with knee osteoarthritis and sarcopenia. Nutrients. 15 (7), 1552 (2023).
  11. Thudium, C. S., et al. Cartilage tissue turnover increases with high-compared to low-intensity resistance training in patients with knee OA. Arthritis Research & Therapy. 25 (1), 22 (2023).
  12. Zheng, L. J., et al. Shutiao Jingjin massage can stabilize intracellular environment of rabbit chondrocytes following knee osteoarthritis-induced cartilage injury. Zhongguo Zuzhi Gongcheng Yanjiu. 27, (2023).
  13. Liu, K. Q., et al. Efficacy and safety of Tuina (Chinese therapeutic massage) for knee osteoarthritis: A randomized, controlled, and crossover design clinical trial. Frontiers in Medicine. 10, 997116 (2023).
  14. Wang, Z., et al. Systematic Review and Network Meta-analysis of Acupuncture Combined with Massage in Treating Knee Osteoarthritis. BioMed Research International. 2022, 4048550 (2022).
  15. Li, Y. Y., et al. Therapeutic effect of acupotomy at Sanheyang for cartilage collagen damage in moderate knee osteoarthritis: a rabbit model. Journal of Inflammation Research. 16, 2241-2254 (2023).
  16. Guo, G. X., et al. Cerebral mechanism of Tuina analgesia in management of knee osteoarthritis using multimodal MRI: study protocol for a randomised controlled trial. Trials. 23 (1), 694 (2022).
  17. Perlman, A., et al. Efficacy and safety of massage for osteoarthritis of the knee: a randomized clinical trial. Journal of General Internal Medicine. 34 (3), 379-386 (2019).
  18. Chen, B. J., et al. Aerobic exercise combined with glucosamine hydrochloride capsules inhibited the apoptosis of chondrocytes in rabbit knee osteoarthritis by affecting TRPV5 expression. Gene. 830, 146465 (2022).
  19. Rasheed, M. S., Ansari, S. F., Shahzadi, I. Formulation, characterization of glucosamine loaded transfersomes and in vivo evaluation using papain induced arthritis model. Scientific Reports. 12 (1), 19813 (2002).
  20. Li, Z. R. Experimental acupuncturology. Beijing: China Press of Traditional Chinese Medicine. 2003, 314-319 (2003).
  21. Hu, Y. L. Manual of practical animal acupuncture. Beijing: China Press of Agriculture. 2003, 286-298 (2014).
  22. Liu, J., et al. Effects of "knot-loosing" of acupotomy on motor function and morphological changes of knee joint in knee osteoarthritis rabbits. Zhen Ci Yan Jiu. 46 (2), 129-135 (2021).
  23. Li, Q., et al. The protective effects and mechanism of Ruyi Zhenbao Pill, a Tibetan medicinal compound, in a rat model of osteoarthritis. Journal of Ethnopharmacology. 308, 116255 (2023).
  24. Kwon, M., Nam, D., Kim, J. Pathological characteristics of monosodium iodoacetate-induced osteoarthritis in rats. Tissue Engineering and Regenerative Medicine. 20 (3), 435-446 (2023).
  25. Wang, J. G., Tang, C. L. Experimental Tuina science. Beijing: China Press of Traditional Chinese Medicine. Chinese. , (2017).
  26. Fang, M., Song, B. L. Tuina science. Beijing: China Press of Traditional Chinese Medicine. , (2016).
  27. Jin, X. Y., Yu, Y. Y., Lin, Y. Y., Yang, J. P., Chen, Z. H. Tendon-regulating and bone-setting manipulation promotes the recovery of synovial inflammation in rabbits with knee osteoarthritis via the TLR4-MyD88-NF-κB signaling pathway. Annals of Translational Medicine. 11 (6), 245 (2023).
  28. Wang, M., Liu, C., Xiao, W. Intra-articular injection of hyaluronic acid for the reduction in joint adhesion formation in a rabbit model of knee injury. Knee Surgery, Sports Traumatology, Arthroscopy: Official Journal of the ESSKA. 22 (7), 1536-1540 (2014).
  29. Xu, C., et al. Bacterial cellulose membranes used as artificial substitutes for dural defection in rabbits. International Journal of Molecular Sciences. 15 (6), 10855-10867 (2014).
  30. Leary, S., et al. AVMA guidelines for the euthanasia of animals: 2020 edition. Schaumburg: American Veterinary Medical Association. 2020, (2020).
  31. Amirtham, S. M., Ozbey, O., Kachroo, U., Ramasamy, B., Vinod, E. Optimization of immunohistochemical detection of collagen type II in osteochondral sections by comparing decalcification and antigen retrieval agent combinations. Clinical Anatomy. 33 (3), 343-349 (2020).
  32. Niazvand, F., et al. Curcumin-loaded poly lactic-co-glycolic acid nanoparticles effects on mono-iodoacetate-induced osteoarthritis in rats. Veterinary Research Forum: An International Quarterly Journal. 8 (2), 155-161 (2017).
  33. Liu, A., et al. Intra-articular injection of umbilical cord mesenchymal stem cells loaded with graphene oxide granular lubrication ameliorates inflammatory responses and osteoporosis of the subchondral bone in rabbits of modified papain-induced osteoarthritis. Frontiers in Endocrinology. 12, 822294 (2022).
  34. Hall, M. M. The accuracy and efficacy of palpation versus image-guided peripheral injections in sports medicine. Current Sports Medicine Reports. 12 (5), 296-303 (2013).
  35. Xing, L., et al. Traditional Chinese medicine ointment combined with Tuina therapy in treatment of pain and swelling after total knee arthroplasty. World Journal of Orthopedics. 13 (10), 932-939 (2022).
  36. Xu, H., et al. The effectiveness of Tuina in relieving pain, negative emotions, and disability in knee osteoarthritis: a randomized controlled trial. Pain Medicine. 24 (3), 244-257 (2023).
  37. Ding, N., et al. Mast cells are important regulator of acupoint sensitization via the secretion of tryptase, 5-hydroxytryptamine, and histamine. The Public Library of Science One. 13 (3), e0194022 (2018).
  38. Cai, F. H., Li, F. L., Zhang, Y. C., Li, P. Q., Xiao, B. Research on electroacupuncture parameters for knee osteoarthritis based on data mining. European Journal of Medical Research. 27 (1), 162 (2022).
  39. Mei, Z. G., Cheng, C. G., Zheng, J. F. Observations on curative effect of high-frequency electric sparkle and point-injection therapy on knee osteoarthritis. Journal of Traditional Chinese Medicine. 31 (4), 311-315 (2011).
  40. Xiao, G., et al. Effect of manipulation on cartilage in rats with knee osteoarthritis based on the Rho-associated protein kinase/LIM kinase 1/Cofilin signaling pathways. Journal of Traditional Chinese Medicine. 42 (2), 194-199 (2022).
  41. Wu, M. X., et al. Clinical study on the treatment of knee osteoarthritis of Shen-Sui insufficiency syndrome type by electroacupuncture. Chinese Journal of Integrative Medicine. 16 (4), 291-297 (2010).
  42. Richards, R. E., Andersen, M. S., Harlaar, J., van den Noort, J. C. Relationship between knee joint contact forces and external knee joint moments in patients with medial knee osteoarthritis: effects of gait modifications. Osteoarthritis Cartilage. 26 (9), 1203-1214 (2018).
  43. Shull, P. B., et al. Toe-in gait reduces the first peak knee adduction moment in patients with medial compartment knee osteoarthritis. Journal of Biomechanics. 46 (1), 122-128 (2013).
  44. Adouni, M., Shirazi-Adl, A. Partitioning of knee joint internal forces in gait is dictated by the knee adduction angle and not by the knee adduction moment. Journal of Biomechanics. 47 (7), 1696-1703 (2014).
  45. Kutzner, I., Trepczynski, A., Heller, M. O., Bergmann, G. Knee adduction moment and medial contact force--facts about their correlation during gait. The Public Library of Science One. 8 (12), e81036 (2013).
  46. Camacho-Cardenosa, A., et al. Resistance circuit training combined with hypoxia stimulates bone system of older adults: a randomized trial. Experimental Gerontology. 169, 111983 (2022).
  47. Babur, M. N., Siddiqi, F. A., Tassadaq, N., Arshad Tareen, M. A., Osama, M. Effects of glucosamine and chondroitin sulfate supplementation in addition to resistance exercise training and manual therapy in patients with knee osteoarthritis: A randomized controlled trial. The Journal of the Pakistan Medical Association. 72 (7), 1272-1277 (2022).
  48. Wang, H. N., et al. Effect of low-load resistance training with different degrees of blood flow restriction in patients with knee osteoarthritis: study protocol for a randomized trial. Trials. 23 (1), 6 (2022).
  49. Cheon, Y. H., et al. Relationship between decreased lower extremity muscle mass and knee pain severity in both the general population and patients with knee osteoarthritis: Findings from the KNHANES V 1-2. The Public Library of Science One. 12 (3), e0173036 (2017).
  50. Murton, A. J., Greenhaff, P. L. Resistance exercise and the mechanisms of muscle mass regulation in humans: acute effects on muscle protein turnover and the gaps in our understanding of chronic resistance exercise training adaptation. The International Journal of Biochemistry & Cell Biology. 45 (10), 2209-2214 (2013).

Tags

התערבות טווינה מודל ארנב דלקת מפרקים ניוונית בברך (KOA) שינויים ניווניים סחוס רקמות רכות יעילות טווינה מנגנון בסיסי אפשרי מדעית מודל ארנב KOA טווינה בשילוב עם שיטת תיקון סיבובי מפרק הברך טווח תנועה של מפרק הברך (ROM) אפופטוזיס כונדרוציטים תיקון רקמת סחוס שחזור ROM של מפרק הברך יישום פוטנציאלי
התערבות טווינה במודל ארנב של דלקת מפרקים ניוונית בברך
Play Video
PDF DOI DOWNLOAD MATERIALS LIST

Cite this Article

Zhang, S., Zhang, X., Sun, G., Wang, … More

Zhang, S., Zhang, X., Sun, G., Wang, K., Qiao, Y., He, Y., Li, M., Li, H., Zheng, L. Tuina Intervention in Rabbit Model of Knee Osteoarthritis. J. Vis. Exp. (198), e65763, doi:10.3791/65763 (2023).

Less
Copy Citation Download Citation Reprints and Permissions
View Video

Get cutting-edge science videos from JoVE sent straight to your inbox every month.

Waiting X
Simple Hit Counter