Waiting
Login processing...

Trial ends in Request Full Access Tell Your Colleague About Jove
Click here for the English version

Encyclopedia of Experiments

드로소필라 구애 컨디셔닝: 파리에서 학습 및 메모리를 테스트하는 방법

Overview

이 비디오는 구애 컨디셔닝이라고 불리는 드로소필라에서학습과 기억을 테스트하는 고전적인 컨디셔닝 분석법을 설명합니다. 분석은 수용하지 않는 예제 여성에 의해 거부를 경험 한 후 남성 구애의 감소에 기초한다. 예제 프로토콜은 단기 및 장기 메모리를 평가하는 데 사용할 수 있는 절차에 대한 설정을 보여 주습니다.

Protocol

이 프로토콜은 Koemans 외. Drosophila 구애 컨디셔닝 학습 및 기억의 척도로 발췌, J. Vis. Exp. (2017).

참고: 아래에 설명된 프로토콜에서 수집, 교육 및 테스트의 복제본이 설명되어 있습니다. 결과의 재현성을 테스트하기 위해, 이러한 단계는 여러 일에 병렬로 반복되어야하며, 별도의 플라이그룹(표 1)을사용해야 한다. 이 프로토콜은 달걀에서 성인까지의 10일 수명 주기를 기반으로 하며, 이는 25°C, 습도 70%, 12h 광/암사이클의 일정한 조건하에서 파리를 사육할 때 정상입니다. 이 프로토콜의 모든 측면은 조건이 전체 분석기 전체에 걸쳐 일정하게 유지된다고 가정합니다. 시간은 조명이 켜지기 전(BLO) 또는 인큐베이터에서 조명이 켜지기 전(ALO) 후 연구원이 선호하는 시간대에 따라 편리하게 설정할 수 있기 때문에 시간으로 표시됩니다. CO2 가스를 사용하여 순진한 수컷 파리의 초기 수집과 미리 메이트된 암컷의 수집에만 사용하십시오. 구애 컨디셔닝을 위한 이 프로토콜은 다음 단계로 구성됩니다.

  1. 여성 수거 문화 정착
  2. 남성 시험 과목 의 수집을위한 문화의 설립
  3. 하우징 블록 준비
  4. 표준화된 미리 메이트된 여성의 생산을 위한 짝짓기 바이알 설립
  5. 남성 시험 과목의 컬렉션
  6. 훈련
  7. 테스트
  8. 비디오 데이터 분석 및 통계

1. 전문화여성수집문화수립

  1. 파워푸드를 준비합니다. 0.8% (w/v) 한천, 8% (w/v) 효모 추출물 2%, 효모 추출물 2% (w/v) 펩톤, 3% (w/v) 자당, 6%(w/v) 포도당, 0.05% (w/v) MgSO4,및 0.05% (w/v) 2.05% (w/v)2.1캐 2.1. 0.05%(w/v) 메틸파라베네(주의:독성)및 0.5% (v/v) 프로피온산(주의:독성)을첨가하기 전에 용액이 70°C로 냉각되도록 허용한다. 균일한 용액을 얻기 위해 50°C까지 더 냉각하면서 교반하여 잘 섞는다.
  2. 음식이 실온에서 고화되기 전에 각 175mL 플라스틱 바이알에 ~ 50mL의 파워푸드를 추가합니다. 음식이 더 식힙니다. 플러그로 바이알을 닫습니다.
    참고: Powerfood는 많은 수의 파리 생산을 위해 특별히 제조 된 전문 식품 혼합물로, 아마도 계란 누워를 유도하여. Powerfood는 비정형 식단과 잠재적 인 혼잡이 개발에 영향을 미칠 수 있기 때문에 행동 분석 (2 단계)에 사용되는 남성 파리를 생산하는 데 사용되지 않습니다.
  3. 당일 -11(표 1)전원 식품 바이알에서 약 60-100 파리 (남성과 여성의 혼합)와 5-20 야생 형 문화를 시작합니다. 이들은 표준화된 미리 메이트된 암컷을 생성하기 위하여 4단계에서 이용될 것입니다. 각 유리병에 필터 용지를 추가하여 애벌레가 새끼를 만들 수 있는 영역을 늘리십시오. 이렇게 하면 닫을 수 있는 파리의 수가 증가합니다.
  4. 실험 전반에 걸쳐 1.1-1.3단계를 주기적으로 반복하여 "표준화된 예매된 암컷의 생산을 위한 짝짓기 바이알 설립"(4단계)에 대한 입력으로서 충분한 새로 클로징 파리를 얻습니다.

2. 남성 시험 과목 수집문화 수립

  1. 일반 식품은 0.5%(w/v) 한천, 효모 2.75%, 옥수수 가루 5.2%(w/v) 설탕 11%, (w/v) 설탕, 0.05%(w/v) 메틸파라베인, 0.5%(v/v) 프로피온산으로 만든 일반 식품을 1.1단계로 준비한다. 플라이 바이알 플러그로 175mL 플라스틱 바이알을 닫습니다.
  2. 당일 -10(표 1)에는일반 음식을 함유한 175mL 유리병에 약 30~75마리의 처녀암컷(재료/장비 표)이있는 약 10~20명의 수컷을 배치합니다. 필터 용지를 추가하여 새끼를 위한 표면적을 늘리고 생산성을 극대화합니다.
  3. 유전자형당 3~6mL 바이알을 설치하여 필요한 수의 시험 대상 남성을 확보한다.
    참고: 원하는 유전자형의 생산성에 따라 더 많은 바이알이 필요할 수 있습니다.

3. 주택 블록의 준비(그림 2A)

  1. 주택 블록당 약 50mL의 파워푸드를 전자레인지에 녹이거나 신선하게 준비하십시오.
  2. 멀티 디스펜더 파이펫을 사용하여 96웰, 평평한 바닥 블록의 각 웰에 500 μL의 파워푸드를 추가합니다.
  3. 음식이 실온에서 고화되도록 합니다.
  4. PCR 접착제 필름으로 블록을 덮고 바늘을 사용하여 우물 당 적어도 4 개의 구멍을 만들어 파리에 신선한 공기를 제공합니다.
  5. 각 우물을 열 수 있도록 면도날을 사용하여 각 행 사이에 접착제 필름을 세로로 자릅니다. 필름을 블록의 한쪽 끝에 그대로 둡니다.
  6. 블록은 최대 2 일 동안 4 °C에서 저장할 수 있습니다.
    참고: 블록을 사용하기 전에 실온에 다시 평형화하도록 허용합니다.

4. 표준화된 예비 여성 생산을 위한 짝짓기 병의 설립

  1. -1일째에는 2-5h BLO에서 미리 메이트된 여성 수거 문화에서 모든 성인 야생형 파리를 제거하고 폐기하십시오.
  2. 이 바이알에서 2-3h간격(예: 30분, 2.5시간, ALO 5h)으로 아스피레이터(그림2B)를사용하여 파리를 수집하고 소량의 효모 페이스트 및 필터 용지로 보충된 새로운 파워푸드 바이알에 배치합니다.
  3. 혼잡을 피하고 최적의 짝짓기 분위기를 촉진하기 위해 150-200 개 이상의 파리를 새로운 바이알로 전송하지 마십시오. 적어도 25% 남성을 제공함으로써 모든 여성의 짝짓기를 보장하십시오. 실험의 크기를 수용하기 위해 짝짓기 바이알에 충분한 여성이 있는지 확인하십시오.
    참고: 이것은 프로토콜에서 중요한 단계이기 때문에 새로 동봉 된 파리와 오래된 파리, 애벌레 또는 푸파가 새로운 짝짓기 유리병으로 옮겨져 있지 않도록하십시오.
  4. 모든 여성이 짝짓기를 할 수 있도록 4 일 동안 이러한 "짝짓기 바이알"을 배양하십시오.

5. 남성 테스트 과목 의 컬렉션

  1. 1일차(표1)에서2-3h BLO에서CO2를 사용하여 남성 컬렉션 바이알(2단계)에서 모든 성인 파리를 제거하지만, 앞으로 몇 시간 동안 더 많은 파리가 닫히게 합니다.
  2. 다음 5-6 h 이상, CO2를 사용하여 20-30 분마다 새로 밀폐 된 파리를 제거하고 아스피레이터(도 2B)를사용하여 하우징 블록 (3 단계)의 개별 우물에 각 남성을 넣습니다.
  3. 접착제 PCR 필름으로 우물을 다시 밀봉합니다.
    참고: 이것은 프로토콜에서 중요한 단계입니다. 수컷은 자주 수집해야 합니다. 수집된 수컷은 백과의 시간에 가까운 하우징 블록에서 분리되어야 하며, 창백한 색소 침착과 반투명 복부에 있는 메코늄의 존재를 입증할 때.
    참고: 흡구대를 부드럽게 사용하면 파리를 옮길 수 있습니다. 그러나 부적절한 사용은 파리를 강조하여 분석의 차이를 유발합니다(토론 참조).
  4. 유전자형 당 최대 48명의 남성을 모으는 것을 목표로 합니다. 이것은 순진하고 훈련 된 조건의 분석에 필요한 남성의 최대 수에 작은 초과를 제공, 나중에 전송 단계 동안 약간의 손실을 허용.

6. 교육

  1. CO2를 사용하여 짝짓기 바이알(4.2단계)에서 파리를 제거하고 미리 메이트된 암컷을 남성으로부터 분리한다.
  2. 흡착기를 사용하여, 새로운 하우징 블록의 한 행에 각 우물에 하나의 마취, 미리 메이트 된 여성을 추가합니다.
  3. 흡인기를 사용하고 마취없이, 5.2 단계에 설정된 주택 블록에서 개인 순진한 남성을 미리 메이트 된 여성을 포함하는 우물로 옮기. 남성이 우물에 배치 된 후 접착제 필름으로 즉시 다시 밀봉하십시오. 남성이 탈출하는 것을 허용하지 마십시오.
    참고: 전송 남성은 그들의 자연적인 활용 하 여 주택 블록에 구취에서 비행 "부정적인 지질" 행동.
  4. 충분한 남성 여성 쌍이 확립 될 때까지 6.2-6.3 단계를 반복하십시오. 이상적으로, 24 쌍을 설정, 주택 블록의 두 전체 행, 유전자형 당. 5.2 단계에 설정된 원래 주택 블록에 나머지 순진한 남성을 남겨주세요.
  5. 트레이닝 기간 동안 남성-여성 쌍을 방해하지 않고 둡니다(표2, 그림 1B).
    참고: 이 기간 동안 남성은 법정에 출두하여 미리 짝을 이은 여성에 의해 거절될 것입니다. 학습 및 STM의 경우, 훈련 기간은 1h이며 LTM의 경우 훈련 기간은 7-9 h입니다.
  6. 흡인기를 사용하여 수컷을 예식된 여성으로부터 부드럽게 분리하여 훈련을종료(표 2, 도 1B); 마취를 사용하지 마십시오. 분리된 남성을 새 주택 블록에 배치합니다.
  7. 모든 순진한 수컷을 부드럽게 옮기고 5.2 단계에 설정된 주택 블록에서 마취없이 새로운 주택 블록으로 옮길 수 있습니다.
    참고: 이 단계는 STM 및 학습을 위한 선택 사항이지만, 파리가 LTM을 테스트하기 위해 추가로 24시간 동안 보관되기 때문에 LTM에 매우 중요합니다.
  8. STM 및 LTM의 경우, 수컷이 각각 1h 및 ~24h동안 휴식을 취할 수 있도록한다(표 2, 도 1B)테스트 전에(7단계).
  9. 학습을 위해, 즉시 훈련및 순진한 남성 (단계 7)을 테스트합니다.

7. 테스트

  1. CO2를 사용하여 짝짓기 바이알(4.2단계)에서 파리를 수집하고 미리 메이트된 암컷을 남성으로부터 분리합니다.
  2. 암컷이 정상적인 음식을 포함하는 유리병에 있는 적어도 1 시간 동안 마취에서 회복하게 하십시오.
  3. 테스트가 시작되기 전에 모든 장비를 준비하기 위해 비디오레코더(그림2C)를미리 장착합니다.
  4. 학습, STM 및 LTM(표2, 그림 1B)에대한 다양한 타임라인에 따라 테스트를 시작합니다. 학습 을 위한 훈련 직후, STM 에 대한 교육 후 1 시간, LTM에 대한 교육 후 24 시간 테스트를 수행합니다.
  5. 아스피레이터를 사용하여, 학습이 테스트되는 경우 휴식 주택 블록또는 교육 주택 블록에서 개별 남성을 부드럽게 전송 (단계 6.7, 훈련; 단계 6.8, 순진함) 칸막이 폐쇄와 구애 경기장의 절반에(그림 2D; 건물 계획에 대한 파일 S1 참조).
    참고: 자연적인 "부정적인 지질 학적"행동의 사용은 구애 경기장에 아스피레이터에서 남성 파리를 전송하기에 충분해야한다.
  6. 빠르지만 부드럽게 다음 경기장으로 엔트리 홀을 이동하고 모든 18 경기장이 하나의 남성을 포함 할 때까지 7.5 단계를 반복합니다.
  7. 아스피라기를 사용하고 CO2없이,모든 18 경기장의 나머지 절반에 하나의 미리 메이트 된 여성 (단계 7.2에서 수집)을 추가합니다.
  8. 조심스럽게 코트챔버를 카메라 아래에 놓고 우물의 개구부를 아래로 향하게한다(그림2C).
  9. 남성과 미리 메이트 된 여성 사이의 직접적인 상호 작용을 허용하기 위해 경기장의 칸막이를 제거합니다.
  10. 즉시 최소 10분 동안 동작 기록을 시작합니다.
    참고: 2대의 카메라 설정을 사용하는 경우 두 개의 구애 플레이트의 병렬 레코딩을 중복된 기간 내에 수행하여 효율성을 극대화할 수 있습니다.
  11. 핸드 헬드 진공 청소기를 사용하여 구애 경기장을 비우고 다시 사용하기 전에 구애 실이 환기 할 수 있습니다.
  12. 모든 유전자형 및조건(즉, 순진하고 훈련된)의 시험이 완료될 때까지 7.4-7.11을 반복한다.

8. 비디오 데이터 분석 및 통계

  1. 각 남성 비행에 대해 테스트 기간의 첫 10분 동안 남성 법원이 법원에 있는 시간의 백분율로 정의된 구애 지수(CI)를 계산합니다.
    참고: 이는 고정관념적인 구애동작(그림 1A)을관찰하거나 컴퓨터 소프트웨어를 사용하여 구애 동작의 자동화된 정량화를 통해 수동으로 수행할 수 있습니다.
    참고: 충분한 통계력을 달성하고 CI 데이터의 일관성을 판단하기 위해 3일 동안 조건당 40-60명의 남성을 분석하는 것이 좋습니다.
  2. 순진한 남성(LI=(CI순진한 -CI훈련)/ CI 순진함에 비해 훈련된 남성의 평균 CI의 백분율 감소로 정의된 학습 지수(LI)를계산합니다. 테스트의 각 일에 대한 LI를 평가하고 결합 된 모든 테스트 일에서 계산 된 누적 LI와 비교합니다.
  3. 헤더로 "유전자형" 및 "CI"가 있는 별도의 2열 탭 데이터 파일을 만듭니다.
    참고: 이러한 제목은 경우에 민감합니다. 각 CI에 대한 유전자형의 이름은 발밑 및 훈련조건(예를 들어, genotype_N 및 genotype_LTM 등, N = 순진한 및 LTM = 장기 기억, 예를 들어 보충 파일 S2 참조)에 대한 설명으로 구성되어야 합니다. 이 음표는 함수 아나학습이 "유전자형" 열의 첫 번째 밑줄 이후에 존재하는 문자를 기반으로 훈련된 및 순진한 파리를 식별하기 때문에 필수적입니다.
  4. analearn R 스크립트(보충 파일 S3)를 사용하여 임의화 테스트를 수행하여 서로 다른 유전자형으로부터 LI 값 간의 차이의 통계적 유의를 판단합니다.
    1. 스크립트(추가 파일 S3)를 R으로 소스로 전환하여 "analearn"이라는 함수를 정의합니다.
      참고: 함수 정의는 : 아나학습 & - 기능 (nboot = 10,000, 순진한 수준 = 'N', refmutation = NA, datname = NA, 헤더 = TRUE, 시드 = NA, 쓰기 출력 = TRUE).
    2. R 명령줄에 "analearn()"을 입력하고 팝업 창을 통해 분석할 데이터 파일(8.3단계에서 생성)을 선택하여 기능을 시작합니다.
    3. 대조군 유전자형인 참조 돌연변이를 선택하고, 해당 번호를 입력하고 enter를 누른다.
      참고: 참조 유전자형을 선택한 후 스크립트는 10,000부트스트랩 복제를 수행하는 데 몇 초 정도 걸립니다.
    4. 유전자형, 학습 조건(즉, 학습, STM 또는 LTM)을 포함하는 출력 테이블(표 3)을 관찰하여, 평균 CI 순진함, 평균 CI 훈련, LI, 실험 조건(LI dif),하한(LL) 및 상한(UL)의 95% 신뢰 구간의 평균 CI 훈련, LI 사이의 차이, LI 디프의 95% 신뢰 구간의 상한(LL) 및 상한(UL)의 차이가 크다는 것을 나타내지 않는다.
      참고: analearn은 데이터 파일이 있는 디렉토리에 출력 텍스트 파일을 저장합니다. 그러나 출력 테이블도 R-Studio 콘솔에 나타납니다. 기본 이름은 제공된 데이터 파일의 이름을 기반으로 구성됩니다.
    5. analearn 함수에는 부트 트래핑의 매개 변수를 조정하기 위해 함수의 기본 설정을 변경하는 데 사용할 수 있는 몇 가지 인수가 있습니다.
      참고: "nboot"는 부트스트랩 복제 수를 정의하며 기본적으로 10,000개로 설정됩니다. 이 값은 0보다 큰 정수 번호로 변경할 수 있습니다. 표 5는 함수의 기본 설정을 변경하는 데 사용할 수 있는 여러 인수를 참여시습니다. 그러나 부트스트랩 복제 수가 적은 경우 생성되는 데이터를 사용하지 않는 것이 좋습니다.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Representative Results

Figure 1
그림 1: 구애 지수 결정 및 실험 개요. (A)여성 비행을 향한 고정관념적인 남성 구애 동작을 보여주는 이미지. 구애 행동의 다른 단계가 표시됩니다 : 방향 (I), 다음 (II), 날개 진동 (확장) 및 도청 (III), 핥기 (IV), 시도 된 교합 (V). (B)인큐베이터 광 사이클에 비해 교육 및 테스트 시간의 회로도 개요, 시간에 표시. 교육 시간은 막대로 표시되고 STM 및 LTM의 휴식 기간은 파선으로 표시되며 테스트 시작 점은 화살표로 표시됩니다. LTM의 테스트 시간은 교육 후 의 날입니다. 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭하십시오.

Figure 2
그림 2: 드로소필라 구애 조정 분석에 사용되는 장비. (A)하우징 블록은 우물당 500μL의 평평한 바닥 블록입니다. 0.8mm 직경의 주사기 바늘을 이용하여 생성된 웰당 4홀 이상을 가진 qPCR 접착제 필름으로 밀봉된다. 개별 행은 면도날을 사용하여 스트립으로 세로로 절단되어 개폐를 허용합니다. (B)마취를 사용하지 않고 남성과 여성의 파리를 부드럽게 옮기기 위해서는 흡인기가 필요합니다. 인세트는 아스피라이터의 끝을 보여주며, 끝 내에 파리를 유지하기 위해 면 조각으로 닫힙습니다. (C)두 개의 구애실의 동시 녹화를 위한 2카메라 시스템의 설정. (D)18개의 경기장이 있는 구애실. 슬라이딩 엔트리 홀은 경기장에 파리를 배치하는 데 사용됩니다. 백색 분할은 남성과 여성 사이의 상호 작용을 시작하기 위해 동시에 열 수 있습니다. 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭하십시오.

표 1: 개별 일에 세 번의 복제를 통해 LTM 테스트를 위한 예제 타임라인입니다.

일반 모으다 기차 테스트
일 -11 미리 메이트된 여성 컬렉션 문화 시작(1.3단계)
일 -10 남성 시험 과목 의 수집을위한 문화 시작 (단계 2.2)
1일차 담당자 1
2일차 담당자 2
3일차 담당자 3
4일차 담당자 4 담당자 1
5일차 담당자 2 담당자 1
6일차 담당자 3 담당자 2
7일차 담당자 4 담당자 3
8일차 담당자 4
9일차 비디오 데이터 분석 및 통계(8단계)
담당자 = 반복

표 2: 학습, STM 및 LTM을 위한 교육 시간, 교육 시간 및 테스트 시간

공부 STM LTM
훈련 시간 1h. 1h. 8 시간.
휴식 시간 0 h. 1h. ~ 24 시간.
교육 시작 0 h. ALO 0 h. ALO 4h. BLO
교육 중지 1h. ALO 1h. ALO 4시간. ALO
테스트 시작 1h. ALO 2시간. ALO 0h. ALO (다음날)
ALO = 조명이 켜진 후 BLO = 조명이 켜지기 전, STM = 단기 메모리, LTM = 장기 메모리

표 3: 아나학습 스크립트에서 생성된 통계 데이터입니다.
analearn 스크립트에서 생성된 통계 데이터입니다. 유전자형, 학습 조건(즉, 학습, STM 또는 LTM)을 포함하는 부트트래핑 R 스크립트의 출력 파일은 CI 순진한 평균, 평균 CI 훈련, LI, 실험 상태(LI dif)에 비해 제어의 LI 사이의 차이, 하한(LL) 및 상한(UL)의 95% 신뢰 구간을 포함하는 상당한 차이가 없음을 나타내지 않는다.

유전자 형 공부 CI CI 하한 상한 p-값
조건 순진한 훈련 다름 (95% 공채 간격) (95% 공채 간격)
제어 STM 0.467 0.116 0.752 NA NA NA NA
다프 앳-RNAi STM 0.699 0.257 0.633 0.119 -0.03 0.265 0.116
제어 LTM 0.59 0.384 0.348 NA NA NA NA
다프 앳-RNAi LTM 0.697 0.65 0.068 0.28 0.103 0.446 0.003

보충 파일 S1 : 구애 실의 계획 구축. 파일은 .stp 확장(CAD-files)을 허용하는 모든 응용 프로그램과 함께 열 수 있습니다. 이 파일을 다운로드하려면 여기를 클릭하십시오.

추가 파일 S2: 아나학습 스크립트용 입력 파일의 예입니다. 이 파일을 다운로드하려면 여기를 클릭하십시오.

보충 파일 S3: Analearn.R 스크립트. 파일은 R-studio에서 열 수 있습니다. 이 파일을 다운로드하려면 여기를 클릭하십시오.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Materials

Name Company Catalog Number Comments
P{KK101437}VIE-260B VDRC 101437 Dhat-at-RNAi in 60100 background
P{KK108109}VIE-260B - - Control-RNAi in 60100 background (gift from K. Keleman)
w+, UAS-dcr2/yhh;;elav-Gal4 (III) - - panneuronal driver line
Containers for plant tissue culture VWR 960177 175 mL plastic vials
Folded filters Whatman 10311643 Filter paper to enlarge area flies can pupate on
Flat-bottom blocks (96-wells) Qiagen 19579 Used for housing blocks
MicroAmp Clear Adhesive Film Applied Biosystems 4306311 PCR adhesive film as lid on flat-bottom blocks
Razor blade - - Any sharp will do
Needle - - 0.8 mm diameter
Aspirator - - Cut a 1mL pipet tip with scissors in order to have two pieces. The narrow tip of the pipettip is placed as fly entrance in a ~80 cm flexible hose. To prevent a fly from getting in the hose, a normal piece of cotton or small mesh gaze is placed in between the tip and the hose. The other half of the pipettip can be used as mouth piece at the end of the hose.
Courtship chambers - - file S1 can be opened with indicated CAD software
Camcorder Sony - camera specification: >4M pixels, full HD.
For manual quantification, any simple video recording device has the potential to produce a video of sufficient quality to observe courtship behavior accurately. For automated quantification, there will likely be different requirements depending on the software to be used, and users should investigate this thoroughly if automated quantification is desired.
Name Company Catalog Number Comments
power food
Agar Sigma A7002
Yeast Bruggeman -
Yeast extract MP biomedicals 0210330391
Peptone Sigma P6838
Sucrose Sigma S9378
Glucose Sigma G7021
MgSO4 Sigma M2643
CaCl2 Merck 1023780500
Methylparabene (CAUTION) Sigma H5501
Propionic acid (CAUTION) Sigma P1386
Demineralized water -
Yeast paste - yeast grains and water mixture in a 1:1 ratio
Name Company Catalog Number Comments
normal food
Agar MP biomedicals 215017890
Yeast bruggeman -
Corn flour de Molen -
Sugar de Molen -
Methylparabene (CAUTION) Sigma H5501
Propionic acid (CAUTION) Sigma P1386
Demineralized water -

DOWNLOAD MATERIALS LIST

Tags

빈 값 문제
<em>드로소필라</em> 구애 컨디셔닝: 파리에서 학습 및 메모리를 테스트하는 방법
Play Video
DOWNLOAD MATERIALS LIST

출처: Koemans, T. S., 외. 드로소필라 구애 컨디셔닝 학습및 기억의 척도로. J. 비스 익스펙. (2017).

View Video

Get cutting-edge science videos from JoVE sent straight to your inbox every month.

Waiting X
Simple Hit Counter