喂养测试：在德罗索菲拉梅拉诺加斯特喂养偏好评估

Overview

此视频描述了果蝇的喂养检测，其中彩色食物用于监测喂养情况以及添加化合物对喂养活动的影响。示例协议测试了几个内分泌干扰化学品 （EDC） 的影响。

Protocol

本协议摘自Bovier等人的摘录，方法测试内分泌破坏在 德罗索菲拉梅拉诺加斯特 ，J.Vis.Exp.（2019 年）。

1. 喂养分析

注： 建议使用此检测来测试介质中选定的 EDC 是否可能影响苍蝇的喂养。

1. 将 15 只幼蝇放入含有玉米粉介质 （CM） 的小瓶中，辅以所选 EDC 的不同浓度和着色食品。允许苍蝇在媒体上喂食1天。
   注： 例如，使用红色染料 40 号（1 毫克/mL）。
2. 将15只幼蝇放入含有CM的小瓶中，单独补充溶剂和色素以进行控制。允许苍蝇在媒体上喂食1天。
3. 用乙醚单独麻醉每组苍蝇。
   1. 将每组苍蝇转移到一个圆柱形玻璃容器（以太化器），将漏斗插入开端，将小瓶倒置在漏斗上，轻轻敲击两个容器，使苍蝇落入以太化器。
      注： 漏斗将阻止他们离开以太化器。
   2. 轻轻敲击软表面（如鼠标垫）上的以太化器，然后用浸泡在乙醚的棉布和纱布插头快速替换漏斗，从而将敲击器击落。
   3. 等待约1分钟，直到苍蝇下降到底部，并停止移动。
      注： 不要超过时间，否则苍蝇会死掉。
4. 将固定苍蝇置于立体显微镜下，并将每个治疗组的腹部着色与对照组进行比较。

Materials

Name	Company	Catalog Number	Comments
17α-Ethinylestradiol	Sigma	E4876-1G
Agar for Drosophila medium	BIOSIGMA	789148
Bisphenol A	Sigma	239658-50G
Bisphenol AF	Sigma	90477-100MG
Cornmeal	CA' BIANCA
Diethyl ether	Sigma
Drosophila Vials	BIOSIGMA	789008	25 mm x 95 mm
Drosophila Vials	BIOSIGMA	789009	29 mm x 95 mm
Drosophila Vials	Kaltek	187	22 mm x 63 mm
Ethanol	FLUKA	2860
Etherizer	Crafts		cylindrical glass container with a cotton plug
Hand blender Pimmy	Ariete		food processor
Instant Success yeast	ESKA		Powdered yeast
Red dye no. 40	SIGMA	16035
Stereomicroscope with LED lights	Leica		S4E