Test d’alimentation : Évaluation des préférences alimentaires chez Drosophila melanogaster

Overview

Cette vidéo décrit un test d’alimentation pour les mouches des fruits dans lequel les aliments colorés sont utilisés pour surveiller l’alimentation et l’effet que les composés ajoutés peuvent avoir sur l’activité alimentaire. Le protocole d’exemple teste les effets de plusieurs produits chimiques perturbateurs endocriniens (EDC).

Protocol

Ce protocole est un extrait de Bovier et coll.,Methods to Test Endocrine Disruption in Drosophila melanogaster, J. Vis. Exp. (2019).

1. Analyse d’alimentation

REMARQUE: Il est recommandé de vérifier si la présence de la SEE sélectionnée dans le milieu pourrait avoir une incidence sur l’alimentation des mouches.

1. Mettez 15 jeunes mouches dans des flacons contenant du milieu de semoule de maïs (CM) complétés par différentes concentrations de l’EDC sélectionnée et un aliment à colorier. Laissez les mouches se nourrir des médias pendant 1 jour.
   REMARQUE: Par exemple, utilisez le colorant rouge no 40 (1 mg/mL).
2. Mettez 15 jeunes mouches dans des flacons contenant cm complété par le solvant seul et un aliment à colorier pour le contrôle. Laissez les mouches se nourrir des médias pendant 1 jour.
3. Anesthésier individuellement chaque groupe de mouches avec de l’éther.
   1. Transférer les mouches de chaque groupe dans un récipient en verre cylindrique (étherisateur) avec un entonnoir inséré dans l’extrémité ouverte, en inversant le flacon au-dessus de l’entonnoir et en tapant doucement les deux récipients ensemble pour faire tomber les mouches dans l’étherisateur.
      REMARQUE: L’entonnoir les empêchera de sortir de l’étherisateur.
   2. Renversez les mouches en appuyant doucement sur l’étherisateur sur une surface molle, comme un tapis de souris, et remplacez rapidement l’entonnoir par un bouchon de coton et de gaze trempé par l’éther.
   3. Attendez environ 1 min jusqu’à ce que les mouches tombent au fond et cessent de bouger.
      REMARQUE: Ne dépassez pas le temps ou les mouches mourront.
4. Placez les mouches immobilisées sous un microscope stéréo et comparez la coloration abdominale de chaque groupe de traitement par rapport au groupe témoin.

Materials

Name	Company	Catalog Number	Comments
17α-Ethinylestradiol	Sigma	E4876-1G
Agar for Drosophila medium	BIOSIGMA	789148
Bisphenol A	Sigma	239658-50G
Bisphenol AF	Sigma	90477-100MG
Cornmeal	CA' BIANCA
Diethyl ether	Sigma
Drosophila Vials	BIOSIGMA	789008	25 mm x 95 mm
Drosophila Vials	BIOSIGMA	789009	29 mm x 95 mm
Drosophila Vials	Kaltek	187	22 mm x 63 mm
Ethanol	FLUKA	2860
Etherizer	Crafts		cylindrical glass container with a cotton plug
Hand blender Pimmy	Ariete		food processor
Instant Success yeast	ESKA		Powdered yeast
Red dye no. 40	SIGMA	16035
Stereomicroscope with LED lights	Leica		S4E