Overview
סרטון זה מתאר מבחני האכלה לזבובי פירות שבהם מזון צבעוני משמש לניטור האכלה וההשפעה שעשויה להיות לתרכובות נוספות על פעילות ההזנה. פרוטוקול הדוגמה בודק את ההשפעות של מספר כימיקלים משבשים אנדוקריניים (EDC).
Protocol
פרוטוקול זה הוא קטע מתוך Bovier et al., שיטות לבדיקת הפרעה אנדוקרינית ב Drosophila melanogaster, J. Vis. Exp. (2019).
1. האכלת מבחני האכלה
שים לב: בדיקה זו מומלץ לבדוק אם נוכחות של EDC שנבחר באמצעי יכול להשפיע על האכלה של זבובים.
- שים 15 זבובים צעירים בבקבוקונים המכילים בינוני קמח תירס (CM) בתוספת ריכוזים שונים של EDC שנבחר מזון צביעה. אפשר לטסים להזין את המדיה למשך יום אחד.
שים לב: לדוגמה, השתמש בצבע אדום מס ' 40 (1 מ"ג / מ"ל). - שים 15 זבובים צעירים בבקבוקונים המכילים CM בתוספת הממס לבד מזון צביעה לשליטה. אפשר לטסים להזין את המדיה למשך יום אחד.
- יש למרדים בנפרד כל קבוצת זבובים עם אתר.
- מעבירים זבובים של כל קבוצה למיכל זכוכית גלילי (אתרייזר) עם משפך מוכנס לקצה הפתוח, הופכים את הבקבוקון מעל המשפך ומקשים בעדינות על שני מיכלים יחד כדי לגרום לזבובים ליפול לתוך האתר.
שים לב: המשפך ימנע מהם לצאת מהאתר. - לדפוק עף למטה על ידי הקשה בעדינות על האתר על משטח רך, כגון משטח העכבר, במהירות להחליף את המשפך עם כותנה ספוגה אתר ותקע גזה.
- המתן כשעה עד שהזבובים ייפלו לתחתית ויפסיקו לזוז.
שים לב: אל תחרוג מהזמן או שהזבובים ימותו.
- מעבירים זבובים של כל קבוצה למיכל זכוכית גלילי (אתרייזר) עם משפך מוכנס לקצה הפתוח, הופכים את הבקבוקון מעל המשפך ומקשים בעדינות על שני מיכלים יחד כדי לגרום לזבובים ליפול לתוך האתר.
- שים זבובים משותקים תחת סטריאו מיקרוסקופ ולהשוות את צביעת הבטן של כל קבוצת טיפול ביחס לקבוצת הביקורת.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| 17α-Ethinylestradiol | Sigma | E4876-1G | |
| Agar for Drosophila medium | BIOSIGMA | 789148 | |
| Bisphenol A | Sigma | 239658-50G | |
| Bisphenol AF | Sigma | 90477-100MG | |
| Cornmeal | CA' BIANCA | ||
| Diethyl ether | Sigma | ||
| Drosophila Vials | BIOSIGMA | 789008 | 25 mm x 95 mm |
| Drosophila Vials | BIOSIGMA | 789009 | 29 mm x 95 mm |
| Drosophila Vials | Kaltek | 187 | 22 mm x 63 mm |
| Ethanol | FLUKA | 2860 | |
| Etherizer | Crafts | cylindrical glass container with a cotton plug | |
| Hand blender Pimmy | Ariete | food processor | |
| Instant Success yeast | ESKA | Powdered yeast | |
| Red dye no. 40 | SIGMA | 16035 | |
| Stereomicroscope with LED lights | Leica | S4E |
