Overview
이 비디오는 유색 식품이 먹이를 모니터링하는 데 사용되는 과일 파리에 대한 먹이 분석과 추가 된 화합물이 먹이 활동에 미칠 수있는 효과를 설명합니다. 예제 프로토콜은 여러 내분비 방해 화학 물질 (EDC)의 효과를 테스트합니다.
Protocol
이 프로토콜은 Bovier 외에서발췌입니다 ., 드로소필라 멜라노가스터에서내분비 중단을 테스트하는 방법,J. Vis. Exp. (2019).
1. 먹이 분석
참고: 이 분석은 매체에 선택한 EDC의 존재가 파리 의 공급에 영향을 미칠 수 있는지 테스트하는 것이 좋습니다.
- 선택한 EDC와 착색 식품의 다른 농도로 보충 된 옥수수 밀 매체 (CM)가 함유 된 바이알에 15 마리의 어린 파리를 넣습니다. 파리가 1일 동안 미디어에 먹이를 줄 수 있도록 허용합니다.
참고: 예를 들어 빨간색 염료 40호(1 mg/mL)를 사용하십시오. - 15개의 어린 파리를 용매만으로 보충한 CM이 함유된 바이알에 넣고 조절을 위한 착색식품을 넣습니다. 파리가 1일 동안 미디어에 먹이를 줄 수 있도록 허용합니다.
- 에테르로 파리의 각 그룹을 개별적으로 마취합니다.
- 각 그룹의 파리를 오픈 엔드에 삽입한 깔때기가 있는 원통형 유리 용기(에테르기)로 이송하여 깔때기 위에 바이알을 반전시키고 두 개의 용기를 부드럽게 두드려 파리가 에테르제이에 빠지게 합니다.
참고: 깔때기는 에테르기에서 나오는 것을 방지할 수 있습니다. - 마우스 패드와 같은 부드러운 표면에 에테르기를 부드럽게 눌러 아래로 날아 노크하고, 신속하게 에테르에 젖은 면과 거즈 플러그로 깔때기를 교체합니다.
- 파리가 바닥으로 떨어지고 움직이지 않을 때까지 약 1 분 기다립니다.
참고: 시간을 초과하지 마십시오 또는 파리가 죽을 것이다.
- 각 그룹의 파리를 오픈 엔드에 삽입한 깔때기가 있는 원통형 유리 용기(에테르기)로 이송하여 깔때기 위에 바이알을 반전시키고 두 개의 용기를 부드럽게 두드려 파리가 에테르제이에 빠지게 합니다.
- 스테레오 현미경으로 고정 된 파리를 넣고 대조군에 대하여 각 처리 군의 복부 착색을 비교하십시오.
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Materials
Name | Company | Catalog Number | Comments |
17α-Ethinylestradiol | Sigma | E4876-1G | |
Agar for Drosophila medium | BIOSIGMA | 789148 | |
Bisphenol A | Sigma | 239658-50G | |
Bisphenol AF | Sigma | 90477-100MG | |
Cornmeal | CA' BIANCA | ||
Diethyl ether | Sigma | ||
Drosophila Vials | BIOSIGMA | 789008 | 25 mm x 95 mm |
Drosophila Vials | BIOSIGMA | 789009 | 29 mm x 95 mm |
Drosophila Vials | Kaltek | 187 | 22 mm x 63 mm |
Ethanol | FLUKA | 2860 | |
Etherizer | Crafts | cylindrical glass container with a cotton plug | |
Hand blender Pimmy | Ariete | food processor | |
Instant Success yeast | ESKA | Powdered yeast | |
Red dye no. 40 | SIGMA | 16035 | |
Stereomicroscope with LED lights | Leica | S4E |