먹이 테스트: 드로소필라 멜라노가스터에서 먹이 기본 설정 평가

Overview

이 비디오는 유색 식품이 먹이를 모니터링하는 데 사용되는 과일 파리에 대한 먹이 분석과 추가 된 화합물이 먹이 활동에 미칠 수있는 효과를 설명합니다. 예제 프로토콜은 여러 내분비 방해 화학 물질 (EDC)의 효과를 테스트합니다.

Protocol

이 프로토콜은 Bovier 외에서발췌입니다 ., 드로소필라 멜라노가스터에서내분비 중단을 테스트하는 방법,J. Vis. Exp. (2019). 

1. 먹이 분석

참고: 이 분석은 매체에 선택한 EDC의 존재가 파리 의 공급에 영향을 미칠 수 있는지 테스트하는 것이 좋습니다.

1. 선택한 EDC와 착색 식품의 다른 농도로 보충 된 옥수수 밀 매체 (CM)가 함유 된 바이알에 15 마리의 어린 파리를 넣습니다. 파리가 1일 동안 미디어에 먹이를 줄 수 있도록 허용합니다.
   참고: 예를 들어 빨간색 염료 40호(1 mg/mL)를 사용하십시오.
2. 15개의 어린 파리를 용매만으로 보충한 CM이 함유된 바이알에 넣고 조절을 위한 착색식품을 넣습니다. 파리가 1일 동안 미디어에 먹이를 줄 수 있도록 허용합니다.
3. 에테르로 파리의 각 그룹을 개별적으로 마취합니다.
   1. 각 그룹의 파리를 오픈 엔드에 삽입한 깔때기가 있는 원통형 유리 용기(에테르기)로 이송하여 깔때기 위에 바이알을 반전시키고 두 개의 용기를 부드럽게 두드려 파리가 에테르제이에 빠지게 합니다.
      참고: 깔때기는 에테르기에서 나오는 것을 방지할 수 있습니다.
   2. 마우스 패드와 같은 부드러운 표면에 에테르기를 부드럽게 눌러 아래로 날아 노크하고, 신속하게 에테르에 젖은 면과 거즈 플러그로 깔때기를 교체합니다.
   3. 파리가 바닥으로 떨어지고 움직이지 않을 때까지 약 1 분 기다립니다.
      참고: 시간을 초과하지 마십시오 또는 파리가 죽을 것이다.
4. 스테레오 현미경으로 고정 된 파리를 넣고 대조군에 대하여 각 처리 군의 복부 착색을 비교하십시오.

Materials

Name	Company	Catalog Number	Comments
17α-Ethinylestradiol	Sigma	E4876-1G
Agar for Drosophila medium	BIOSIGMA	789148
Bisphenol A	Sigma	239658-50G
Bisphenol AF	Sigma	90477-100MG
Cornmeal	CA' BIANCA
Diethyl ether	Sigma
Drosophila Vials	BIOSIGMA	789008	25 mm x 95 mm
Drosophila Vials	BIOSIGMA	789009	29 mm x 95 mm
Drosophila Vials	Kaltek	187	22 mm x 63 mm
Ethanol	FLUKA	2860
Etherizer	Crafts		cylindrical glass container with a cotton plug
Hand blender Pimmy	Ariete		food processor
Instant Success yeast	ESKA		Powdered yeast
Red dye no. 40	SIGMA	16035
Stereomicroscope with LED lights	Leica		S4E