Teste de Alimentação: Avaliação das Preferências alimentares em Drosophila melanogaster

Overview

Este vídeo descreve um ensaio alimentar para moscas de frutas em que alimentos coloridos são usados para monitorar a alimentação e o efeito que compostos adicionados podem ter na atividade alimentar. O protocolo de exemplo testa os efeitos de vários produtos químicos endócrinos (EDC).

Protocol

Este protocolo é um trecho de Bovier et al., Métodos para Testar a Interrupção Endócrina em Drosophila melanogaster, J. Vis. Exp. (2019).

1. Ensaio alimentar

NOTA: Este ensaio é recomendado para testar se a presença do EDC selecionado no meio poderia afetar a alimentação de moscas.

1. Coloque 15 moscas jovens em frascos contendo meio de fubá (CM) complementados com diferentes concentrações do EDC selecionado e um alimento para colorir. Permita que as moscas se alimentem na mídia por 1 dia.
   NOTA: Por exemplo, use corante vermelho nº 40 (1 mg/mL).
2. Coloque 15 moscas jovens em frascos contendo CM complementados apenas com o solvente e um alimento colorido para controle. Permita que as moscas se alimentem na mídia por 1 dia.
3. Anestesia individualmente cada grupo de moscas com éter.
   1. Transfira moscas de cada grupo para um recipiente de vidro cilíndrico (etherizer) com um funil inserido na extremidade aberta, invertendo o frasco sobre o funil e tocando suavemente os dois recipientes juntos para fazer as moscas caírem no eternte.
      NOTA: O funil vai impedi-los de sair do éterizador.
   2. Knock voa para baixo batendo suavemente no etherizer em uma superfície macia, como um mouse-pad, e substituir rapidamente o funil por um algodão encharcado de éter e tampão de gaze.
   3. Espere cerca de 1 min até que as moscas caiam até o fundo e parem de se mover.
      NOTA: Não exceda o tempo ou as moscas morrerão.
4. Coloque moscas imobilizadas sob um microscópio estéreo e compare a coloração abdominal de cada grupo de tratamento em relação ao grupo controle.

Materials

Name	Company	Catalog Number	Comments
17α-Ethinylestradiol	Sigma	E4876-1G
Agar for Drosophila medium	BIOSIGMA	789148
Bisphenol A	Sigma	239658-50G
Bisphenol AF	Sigma	90477-100MG
Cornmeal	CA' BIANCA
Diethyl ether	Sigma
Drosophila Vials	BIOSIGMA	789008	25 mm x 95 mm
Drosophila Vials	BIOSIGMA	789009	29 mm x 95 mm
Drosophila Vials	Kaltek	187	22 mm x 63 mm
Ethanol	FLUKA	2860
Etherizer	Crafts		cylindrical glass container with a cotton plug
Hand blender Pimmy	Ariete		food processor
Instant Success yeast	ESKA		Powdered yeast
Red dye no. 40	SIGMA	16035
Stereomicroscope with LED lights	Leica		S4E