Overview
此视频描述了如何跟踪自由行走的苍蝇,以评估它们的一般运动能力。特色协议使用视频跟踪软件演示了检测的设置和数据分析。
Protocol
本协议摘自太阳和陈,一种新的方法模型慢性创伤性脑病在 德罗索菲拉 ,J.Vis.Exp.(2017 年)。
1. 视频辅助运动跟踪
- 用透明硅弹性体填充直径为 6 厘米的培养皿,使跟踪竞技场。在硅和盘盖之间留出3毫米的空间,让苍蝇自由行走,但不能飞。
- 麻醉四只苍蝇从假或治疗组每次,并把它们放在竞技场。将苍蝇保持在 22 °C 1 小时。
- 将充电耦合设备 (CCD) 摄像机放置在竞技场上方,并记录 5 分钟。
- 使用 Ctrax 软件分析记录的运动轨迹(从加州理工学院免费获得)。以编程语言(例如 Matlab)兼容的格式导出跟踪数据,并根据每帧行驶的距离分析数据。计算每只苍蝇的平均步行距离,并将其与所有其他记录的苍蝇/组相结合,以获得同一组文件群的平均累积距离。
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Materials
Name | Company | Catalog Number | Comments |
60 mm Petri Dishes | Fisher Scientific | FB0875713A | Used as a tracking arenas |
Flow Regulator | Genesee Scientific | 59-122WC | |
Fine Brush | Genesee Scientific | 59-204 | |
Flypad | Genesee Scientific | 59-114 | |
Sylgard Silicone Elastomer | Dow Corning | 4019862 | |
CCD Camera | Microsoft | HD-5000 | |
Ctrax Walking Fly Tracker | Caltech | Ctrax 0.2.11 | |
MATLAB Image Processing Toolbox | MATLAB | R2015b |