Overview
Это видео описывает, как отслеживать свободно ходить мух, чтобы оценить их общую способность передвижения. Рекомендуемый протокол демонстрирует установку анализа анализа данных с помощью программного обеспечения для отслеживания видео.
Protocol
Этот протокол является выдержкой из Sun and Chen, Новый метод моделирования хронической травматической энцефалопатии в Дрозофиле, J. Vis. Exp. (2017).
1. Отслеживание движения с помощью видео
- Заполните 6-сантиметровую чашку Петри прозрачным кремниевым еластомером, чтобы сделать арену слежения. Оставьте 3 мм пространство между кремнием и крышкой блюда, чтобы мухи свободно ходить, но не летать.
- Анестезировать четыре мухи либо из обмана или обработанной группы каждый раз и поместить их на арену. Оставьте мух при 22 градусов по Цельсию на 1 ч.
- Распоитить камеру Charge-Coupled Device (CCD) над аренами и записать в течение 5 минут.
- Проанализируйте записанные траектории движения с помощью программного обеспечения Ctrax (в свободном доступе в Caltech). Экспорт отслеживаемых данных на языке программирования (например, Matlab)-совместимый формат и анализ данных на основе пройденного расстояния за кадр. Рассчитайте среднее расстояние ходьбы для каждой мухи и объедините его со всеми другими зарегистрированными мухами/группами, чтобы получить среднее кумулятивное расстояние, пройденное популяцией файлов в той же группе.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| 60 mm Petri Dishes | Fisher Scientific | FB0875713A | Used as a tracking arenas |
| Flow Regulator | Genesee Scientific | 59-122WC | |
| Fine Brush | Genesee Scientific | 59-204 | |
| Flypad | Genesee Scientific | 59-114 | |
| Sylgard Silicone Elastomer | Dow Corning | 4019862 | |
| CCD Camera | Microsoft | HD-5000 | |
| Ctrax Walking Fly Tracker | Caltech | Ctrax 0.2.11 | |
| MATLAB Image Processing Toolbox | MATLAB | R2015b |
