Drosophila Agressietest: een methode om gedragsplasticiteit bij vliegen te testen

Overview

Agressie is een aangeboren gedrag en eerdere vechtervaring beïnvloedt de vechtstrategie en het resultaat van latere gevechten in vliegen. Deze video beschrijft een test die wordt gebruikt om het agressieve gedrag van Drosophilate bestuderen. Het voorbeeldprotocol bevat de test die wordt uitgevoerd in een opstelling die vliegbehandeling elimineert en daarom stress voor de dieren vermindert, wat anders de prestaties van de proefpersonen zou beïnvloeden.

Protocol

Dit protocol is een fragment uit Trannoy et al., A New Approach that Eliminates Handling for Studying Aggression and the "Loser" Effect in Drosophila melanogaster, J. Vis. Exp. (2015).

1. Gedragsexperiment

1. Voer de gedragsexperimenten uit met 6-7-daagse mannelijke vliegen.
2. Plaats plastic verdelers in elke vechtkamer.
3. Verwijder de katoenen plug van de isolatiebuis en plaats de buis onder een open gat aan de zijkant van het apparaat.
4. Laat de vlieg de vechtkamer binnenkomen door negatieve geotaxi's, meestal binnen een paar seconden.
5. Sluit de schuifwand nadat de vlieg de buis heeft verlaten en de kamer is binnengegaan.
6. Herhaal de procedure om de tweede vlieg in de gevechtskamer aan de andere kant van het apparaat te introduceren.
7. Plaats het apparaat terug in de verlichte videotappositie.
8. Begin met video-opname en verwijder de plastic scheidingswand om vliegen te laten interageren.
   1. Voor agressie-experimenten:
      1. In deze experimenten, record gevechten voor ten minste 20 minuten om de vorming van sterke dominantie relaties te garanderen.
      2. Stop de video-opname na de gewenste tijd.
      3. Verwijder vliegen uit de gevechtskamers door de hierboven beschreven procedure om te keren.
      4. Was het gedragsapparaat na elk gebruik grondig met mild reinigingsmiddel en water en spoel af.
   2. Voor "Loser" Effect Experimenten:
      OPMERKING: In deze experimenten worden eerste gevechten beschouwd als de conditioneringsfase en tweede gevechten als de testfase. De periode van rust tussen gevechten kan verschillen, maar 10 minuten maakt de vorming van een sterk "loser" -effect mogelijk.
      1. Volg de hierboven beschreven procedure om een eerste gevecht uit te voeren.
      2. KRITIEKE STAP: Om de vorming van een "loser"-mentaliteit te induceren, moet u ervoor zorgen dat de eerste gevechten minstens 20 minuten duren om sterke dominantierelaties tot stand te brengen. Na 20 minuten plaatst u de plastic verdeler opnieuw in gevechtskamers om de vliegen te scheiden.
      3. Verwijder na een rustperiode van 10 minuten voorzichtig de plastic verdeler om vliegen te laten interageren voor tweede gevechten.
      4. Aan het einde van de tweede 20 minuten gevecht, stop de video-opname.
      5. Verwijder vliegen uit gedragskamers zoals hierboven.
      6. Reinig nogmaals het gedragsapparaat grondig.

Materials

Name	Company	Catalog Number	Comments
Behavioral chambers	Mike machine		Fabricated in-house. Directly contact the company for more information.
Borosilicate glass vials	VWR International	47729-576	16 x 10 mm
Cotton	Fisherbrand	22-456-881	Any brand can be used
Srew cap tube	VWR International	10011-394	15 mm diameter, 10 mm height
Plastic slices	Electron Microscopy Sciences	70329-40	22 x 40 x 0.25 mm Thickness
Light source (bulb)	VWR International	500003-418	Any brand can be used
Timer	VWR International	62344-641	Any brand can be used
Binocular	Nikon	SMZ-745	Any brand can be used
Camera (SONY Handycam HDR-CX330)	B&H	SOHDRCX330B	Any brand can be used