ショウジョウバエ 侵略アッセイ:ハエの行動可塑性をテストする方法

Overview

侵略は生来の行動であり、以前の戦闘経験はハエでの後のコンテストの戦いの戦略と結果に影響を与えます。このビデオは、 ショウジョウバエの攻撃的な行動を研究するために使用されるアッセイについて説明します。このプロトコル例は、フライハンドリングを排除し、動物のストレスを軽減するセットアップで実行されるアッセイを特徴とし、そうでなければ被験者のパフォーマンスに影響を与えます。

Protocol

このプロトコルは、Trannoyらからの抜粋であり、侵略を研究するための取り扱いとショウジョウバエメラノガスターの「敗者」効果を排除する新しいアプローチ、J.Vis. Exp.(2015)。 

1. 行動実験

1. 6-7日齢の雄ハエで行動実験を行います。
2. 各戦闘室にプラスチック製の仕切りを挿入します。
3. 隔離チューブから綿栓を取り外し、チューブを装置の側面の開いた穴の下に置きます。
4. ハエは、通常数秒以内に、負のジオタキシスによって戦闘室に入りましょう。
5. フライがチューブを離れ、チャンバーに入った後、スライド式の壁を閉じます。
6. 装置の反対側の戦闘室に第2フライを導入する手順を繰り返します。
7. 照明付きビデオ撮影位置に装置を戻します。
8. ビデオ録画を開始し、フライが相互作用できるようにプラスチック製の仕切りを取り外します。
   1. 侵略実験の場合:
      1. これらの実験では、強い支配関係の形成を確実にするために、少なくとも20分間の戦いを記録します。
      2. 希望の時間が経過したら、ビデオ録画を停止します。
      3. 上記の手順を逆にすることによって戦闘室からハエを削除します。
      4. 使用後は、穏やかな洗剤と水で行動装置を十分に洗い流し、洗い流してください。
   2. 「敗者」効果実験の場合:
      注: これらの実験では、最初の戦いはコンディショニングフェーズと見なされ、第2の戦いはテスト段階と考えられています。戦いの間の休息の期間は異なることができますが、10分は強い「敗者」効果の形成を可能にします。
      1. 最初の戦いを実行するには、上記の手順に従ってください。
      2. 重要なステップ: 「敗者」の精神の形成を誘導するには、強い優位性の関係を確立するために、最初の戦いが少なくとも20分の長さであることを確認してください。20分後、フライを分離するために戦闘室にプラスチック製の仕切りを再挿入します。
      3. 10分間の休息の後、プラスチック製の仕切りをそっと取り外して、ハエが第二の戦いのために相互作用できるようにします。
      4. 2回目の20分の戦いの終わりに、ビデオ録画を停止します。
      5. 上記のように行動室からハエを削除します。
      6. もう一度、行動装置を徹底的に清掃する。

Materials

Name	Company	Catalog Number	Comments
Behavioral chambers	Mike machine		Fabricated in-house. Directly contact the company for more information.
Borosilicate glass vials	VWR International	47729-576	16 x 10 mm
Cotton	Fisherbrand	22-456-881	Any brand can be used
Srew cap tube	VWR International	10011-394	15 mm diameter, 10 mm height
Plastic slices	Electron Microscopy Sciences	70329-40	22 x 40 x 0.25 mm Thickness
Light source (bulb)	VWR International	500003-418	Any brand can be used
Timer	VWR International	62344-641	Any brand can be used
Binocular	Nikon	SMZ-745	Any brand can be used
Camera (SONY Handycam HDR-CX330)	B&H	SOHDRCX330B	Any brand can be used