Дрозофила Агрессия Анализ: Метод для проверки поведенческой пластичности у мух

Overview

Агрессия является врожденным поведением и предыдущий боевой опыт влияет на стратегию борьбы и результаты более поздних конкурсов в мухах. Это видео описывает анализ, используемый для изучения агрессивного поведенияДрозофилы. В примере протокола содержится анализ, выполненный в установке, которая устраняет обработку мух и, следовательно, снижает нагрузку на животных, что в противном случае повлияло бы на производительность испытуемых.

Protocol

Этот протокол является выдержкой из Trannoy et al., Новый подход, который устраняет обработку для изучения агрессии и "Loser" Эффект в Drosophila меланогастер, J. Vis. Exp. (2015).

1. Поведенческий эксперимент

1. Выполните поведенческие эксперименты с 6-7-дневными самцами мух.
2. Вставьте пластиковые разделители в каждую боевую камеру.
3. Снимите хлопчатобумажную вилку из изоляционные трубки и распоите трубку ниже открытого отверстия на боковой стороне аппарата.
4. Пусть муха войдет в боевую камеру с отрицательным геотаксисом, как правило, в течение нескольких секунд.
5. Закройте раздвижную стену после того, как муха покинула трубку и вошла в камеру.
6. Повторите процедуру введения второй мухи в бойцовую камеру на другой стороне аппарата.
7. Поместите аппарат обратно в освещенном положении видеозаписи.
8. Начните видеозапись и удалите пластиковый разделитель, чтобы мухи взаимодействовали.
   1. Для экспериментов агрессии:
      1. В этих экспериментах, запись борется, по крайней мере 20 минут, чтобы обеспечить формирование сильных отношений доминирования.
      2. После желаемого времени, остановить видеозапись.
      3. Удалите мух из боевых камер, обратив вспять описанную выше процедуру.
      4. Тщательно промыть поведенческий аппарат мягким моющим средством и водой после каждого использования и промыть.
   2. Для "Loser" Эффект Эксперименты:
      ПРИМЕЧАНИЕ: В этих экспериментах, первые бои рассматриваются как этап кондиционирования и второй бои, как этап испытаний. Период отдыха между боями может отличаться, но 10 мин позволяет сформировать сильный эффект «неудачника».
      1. Следуйте описанной выше процедуре, чтобы провести первый бой.
      2. КРИТИЧЕСКИЙ ШАГ: Чтобы вызвать формирование "неудачник" менталитет, убедитесь, что первые бои, по крайней мере 20 минут, с тем чтобы установить прочные отношения доминирования. Через 20 минут, повторно вставить пластиковый разделитель в боевые камеры, чтобы отделить мух.
      3. После 10-минутного периода отдыха аккуратно удалите пластиковый разделитель, чтобы мухи можно было взаимодействовать для второго боя.
      4. В конце второго 20-минутный бой, остановить видеозапись.
      5. Удалите мух из поведенческих камер, как указано выше.
      6. Еще раз, тщательно очистить поведенческий аппарат.

Materials

Name	Company	Catalog Number	Comments
Behavioral chambers	Mike machine		Fabricated in-house. Directly contact the company for more information.
Borosilicate glass vials	VWR International	47729-576	16 x 10 mm
Cotton	Fisherbrand	22-456-881	Any brand can be used
Srew cap tube	VWR International	10011-394	15 mm diameter, 10 mm height
Plastic slices	Electron Microscopy Sciences	70329-40	22 x 40 x 0.25 mm Thickness
Light source (bulb)	VWR International	500003-418	Any brand can be used
Timer	VWR International	62344-641	Any brand can be used
Binocular	Nikon	SMZ-745	Any brand can be used
Camera (SONY Handycam HDR-CX330)	B&H	SOHDRCX330B	Any brand can be used