Drosophila Saldırganlık Testi: Sineklerde Davranışsal Plastisiteyi Test Etmek İçin Bir Yöntem

Overview

Saldırganlık doğuştan gelen bir davranıştır ve önceki dövüş deneyimi, sineklerde daha sonraki yarışmaların stratejisini ve sonucunu etkiler. Bu videoda Drosophila'nınsaldırgan davranışlarını incelemek için kullanılan bir test açıklanmaktadır. Örnek protokol, sinek işlemeyi ortadan kaldıran ve bu nedenle hayvanlar için stresi azaltan ve aksi takdirde deneklerin performansını etkileyecek bir kurulumda gerçekleştirilen tahlilleri içerir.

Protocol

Bu protokol, Trannoy ve ark., Saldırganlığı İncelemeyi Ortadan Kaldıran Yeni Bir Yaklaşım ve Drosophila melanogaster, J. Vis. Exp. (2015)'deki "Kaybeden" Etkisi'nden bir alıntıdır.

1. Davranış Deneyi

1. Davranış deneylerini 6-7 günlük erkek sineklerle gerçekleştirin.
2. Her dövüş odasına plastik bölücüler yerleştirin.
3. Pamuk fişini izolasyon tüpünden çıkarın ve tüpü cihazın yan tarafındaki açık bir deliğin altına yerleştirin.
4. Sinek, genellikle birkaç saniye içinde negatif jeotaksi ile dövüş odasına girsin.
5. Sinek tüpden çıktıktan ve odaya girdikten sonra kayan duvarı kapatın.
6. İkinci sineği cihazın diğer tarafındaki dövüş odasına sokmak için prosedürü tekrarlayın.
7. Cihazı tekrar ışıklı video kaydı konumuna getirin.
8. Video kaydına başlayın ve sineklerin etkileşime girmesine izin vermek için plastik bölücüyü çıkarın.
   1. Saldırganlık Deneyleri İçin:
      1. Bu deneylerde, güçlü hakimiyet ilişkilerinin oluşumunu sağlamak için en az 20 dakika boyunca dövüşleri kaydedin.
      2. İstediğiniz süreden sonra video kaydını durdurun.
      3. Yukarıda açıklanan prosedürü tersine çevirerek sinekleri dövüş odalarından çıkarın.
      4. Davranış aparatını her kullanımdan sonra hafif deterjan ve suyla iyice yıkayın ve durulayın.
   2. "Kaybeden" Efekt Deneyleri için:
      NOT: Bu deneylerde ilk dövüşler kondisyon aşaması, ikinci dövüşler ise test aşaması olarak kabul edilir. Dövüşler arasındaki dinlenme süresi farklı olabilir, ancak 10 dakika güçlü bir "kaybeden" etkisinin oluşmasına izin verir.
      1. İlk dövüşü gerçekleştirmek için yukarıda açıklanan prosedürü izleyin.
      2. KRİtİk ADIM: "Kaybeden" bir zihniyetin oluşmasını sağlamak için, güçlü hakimiyet ilişkileri kurmak için ilk kavgaların en az 20 dakika uzunluğunda olmasını sağlayın. 20 dakika sonra, sinekleri ayırmak için plastik bölücüyü dövüş odalarına yeniden yerleştirin.
      3. 10 dakikalık bir dinlenme süresinden sonra, sineklerin ikinci dövüşler için etkileşime girmesine izin vermek için plastik bölücüyü hafifçe çıkarın.
      4. İkinci 20 dakikalık kavganın sonunda video kaydını durdurun.
      5. Yukarıdaki gibi davranış odalarından sinekleri çıkarın.
      6. Bir kez daha, davranış aygıtını iyice temizleyin.

Materials

Name	Company	Catalog Number	Comments
Behavioral chambers	Mike machine		Fabricated in-house. Directly contact the company for more information.
Borosilicate glass vials	VWR International	47729-576	16 x 10 mm
Cotton	Fisherbrand	22-456-881	Any brand can be used
Srew cap tube	VWR International	10011-394	15 mm diameter, 10 mm height
Plastic slices	Electron Microscopy Sciences	70329-40	22 x 40 x 0.25 mm Thickness
Light source (bulb)	VWR International	500003-418	Any brand can be used
Timer	VWR International	62344-641	Any brand can be used
Binocular	Nikon	SMZ-745	Any brand can be used
Camera (SONY Handycam HDR-CX330)	B&H	SOHDRCX330B	Any brand can be used