Overview
यह वीडियो स्पर्श आदत परख, यंत्रोसेंसेशन का आकलन करने और आदत के लिए समय की मात्रा निर्धारित करने की एक सी एलिगेंस व्यवहार विधि का परिचय देता है।
Protocol
निम्नलिखित प्रोटोकॉल मर्शा एट अल से एक अंश है। कम खुराक विषैले पदार्थों के लिए भ्रूणीय एक्सपोजर के दीर्घकालिक व्यवहार और प्रजनन परिणाम, जे विस Exp। (2018)
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पूर्वकाल स्पर्श आदत परख
- आग से 30 जी प्लेटिनम तार लेने का उपयोग करके लगभग 10 सिंक्रोनाइज्ड युवा वयस्क कीड़े को नई गैर वरीयता प्राप्त एनजीएम प्लेटों में स्थानांतरित करें। कीड़े को 5 मिनट के लिए अव्यवस्थित छोड़ दें ताकि उन्हें नई प्लेट में स्वीकार करने का समय मिल सके।
- आदत प्रतिक्रिया के लिए, लकड़ी के कटार या टूथपिक के अंत से जुड़े एक भौं बालों का उपयोग करें, और 70% इथेनॉल में डुबकी लगाकर बंध्याकरण करें। एक साफ लिंट-फ्री ऊतक के साथ पोंछें और इथेनॉल को वाष्पित करने के लिए 1 मिनट की प्रतीक्षा करें। भौं बालों का उपयोग करके सिर (फरेंगल बल्ब के पूर्वकाल) पर कीड़ा को धीरे-धीरे स्पर्श करें। स्पर्श दोहराएं, जिससे कीड़ा ठीक होने की अनुमति देने के लिए स्पर्श के बीच में 10 एस की अनुमति दें।
- स्पर्श करना जारी रखें (10 अंतर-मध्यांतर की अनुमति देना) जब तक कि कीड़ा अब पीछे की ओर नहीं बढ़ता। इस बिंदु पर, कीड़ा उत्तेजना के आदी हो गया है। कीड़ा को आदत बनाने के लिए आवश्यक स्पर्श के num + ber रिकॉर्ड करें।
- एक तरह से ANOVA का उपयोग कर इलाज और अनुपचारित नियंत्रण की मतलब आदत दरों के बीच अंतर का विश्लेषण है Tukey पोस्ट हॉक परीक्षण के बाद ।
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Materials
Name | Company | Catalog Number | Comments |
EtOH | Sigma-Aldrich | 64-17-5 | |
N2 (Wild-type C. elegans) worms | CGC | Repository at U of Minnesota | |
Platinum wire pick | Genesee Scientific | 59-AWP | |
Petri plates | Fisher | 07-202-011 | |
Dissection Microscope | AmScope | SM-2TYY |