Overview
このビデオでは、タッチ慣化アッセイ、メカノセンセーションを評価し、習慣化までの時間を定量化する C.エレガンス 行動方法を紹介します。
Protocol
以下のプロトコルは、メルシャらからの抜粋 である。 低用量毒性物質への胚暴露の長期的な行動および生殖結果, J. Vis. Exp.(2018)
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前触れ慣性アッセイ
- 約10個の同期した若い成虫を、殺菌した30Gプラチナワイヤーピックを使用して、新しい播種されていないNGMプレートに移します。ワームを5分間邪魔さず、新しいプレートに順応する時間を与えます。
- 習慣的な反応のために、木製の串や爪楊枝の端に取り付けられた眉毛を使用し、70%エタノールに浸漬して殺菌します。きれいな糸くずのないティッシュで拭き取り、エタノールが蒸発するのを1分待ちます。眉毛を使って頭の上の虫(咽頭球の前部)をそっと触れます。ワームが回復できるように、タッチの間に10 sを許可し、タッチを繰り返します。
- ワームが後方に移動しなくなるまで、タッチを続けます(10 sの間の間隔を許可します)。この時点で、ワームは刺激に慣れている。ワームが習慣化するために必要なタッチの num+ber を記録します。
- 一方向ANOVAを使用し、続いてTukeyのポストホックテストを使用して、治療対象コントロールと未処理コントロールの平均習慣率の差を分析します。
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Materials
Name | Company | Catalog Number | Comments |
EtOH | Sigma-Aldrich | 64-17-5 | |
N2 (Wild-type C. elegans) worms | CGC | Repository at U of Minnesota | |
Platinum wire pick | Genesee Scientific | 59-AWP | |
Petri plates | Fisher | 07-202-011 | |
Dissection Microscope | AmScope | SM-2TYY |