Ensayo de habituación táctil: un método para estudiar el aprendizaje no asociativo en C. elegans

Overview

Este video introduce el ensayo de habituación táctil, un método conductual C. elegans para evaluar la mecanosensación y cuantificar el tiempo a la habituación.

Protocol

El siguiente protocolo es un extracto de Mersha et al. Consecuencias conductuales y reproductivas a largo plazo de la exposición embrionaria a tóxicos de dosis bajas, J. Vis. Exp. (2018)

1. Ensayo de habituación táctil anterior
   1. Transfiera aproximadamente 10 gusanos adultos jóvenes sincronizados a nuevas placas NGM sin semilla utilizando una selección de alambre de platino de 30 G esterilizada contra incendios. Deje los gusanos sin perturbar durante 5 minutos para darles tiempo para aclimatarse a la nueva placa.
   2. Para la respuesta de habituación, utilice un cabello de ceja unido al extremo de un pincho de madera o palillo de dientes, y esterilizar sumergiendo en 70% etanol. Limpie con un tejido limpio y libre de pelusas y espere 1 minuto para que el etanol se evapore. Toque suavemente el gusano en la cabeza (anterior de la bombilla faríngea) usando el pelo de la ceja. Repita los toques, permitiendo 10 s entre toques para permitir que el gusano se recupere.
   3. Continúe tocándose (permitiendo intervalos de interestimulus de 10 s) hasta que el gusano ya no se mueva hacia atrás. En este punto, el gusano se ha habituado al estímulo. Registre el número+ber de toques necesarios para que el gusano habitue.
   4. Analice la diferencia entre las tasas medias de habituación de los controles tratados y no tratados utilizando ANOVA unidireccional seguido de la prueba post hoc de Tukey.

Materials

Name	Company	Catalog Number	Comments
EtOH	Sigma-Aldrich	64-17-5
N2 (Wild-type C. elegans) worms	CGC		Repository at U of Minnesota
Platinum wire pick	Genesee Scientific	59-AWP
Petri plates	Fisher	07-202-011
Dissection Microscope	AmScope	SM-2TYY