Summary
Denna video beskriver en metod för rening av Wolbachia pipientis från en Anopheles gambiae cellinje och odling av endosymbiont i cell-fria medium. En analys för överlevnad av bakterien kan påvisas.
Abstract
I den här videon protokoll finns rutiner visat sig (1) renar Wolbachia symbionter av odlade mygga celler, (2) Använd ett fluorescerande analys för att fastställa genomförbarheten av det renade Wolbachia och (3) upprätthålla den nu extracellulära Wolbachia i cell-fria medel . Renat Wolbachia leva vidare i det extracellulära fasen, men inte kopiera till dess att inokuleras i eukaryota celler. Extracellulära Wolbachia renas på detta sätt kommer att vara genomförbara för minst en vecka i rumstemperatur, och eventuellt längre. Renat Wolbachia är lämpliga för mikroinjektion, DNA-extraktion och andra applikationer.
