Summary
Este vídeo descreve um método para purificar Wolbachia pipientis a partir de uma linhagem de células Anopheles gambiae e cultura do endossimbionte na célula meio livre. Um ensaio para a viabilidade da bactéria é demonstrada.
Abstract
Neste protocolo de vídeo, os procedimentos são demonstrados a (1) purificar simbiontes Wolbachia para fora das células cultivadas mosquito, (2) usar um teste de fluorescência para verificar a viabilidade da Wolbachia purificada e (3) manter a Wolbachia agora extracelular na célula meio livre . Purificada Wolbachia permanecem vivos na fase extracelular, mas não replicar até re-inoculado em células eucarióticas. Wolbachia extracelular purificada desta forma irá permanecer viável por pelo menos uma semana à temperatura ambiente, e possivelmente por mais tempo. Purificada Wolbachia são adequados para micro-injeção, extração de DNA e outras aplicações.
