Biology

Ae midgut ve Tükürük Bezlerinin Diseksiyon. aegypti Sivrisinekler

Published: July 4, 2007 doi: 10.3791/228

Judy Coleman¹, Jennifer Juhn¹, Anthony A. James²

¹Department of Molecular Biology and Biochemistry, University of California, Irvine (UCI), ²Department of Molecular Biology and Biochemistry, Department of Microbiology and Molecular Genetics, University of California, Irvine (UCI)

Summary

Sivrisinek midgut ve tükürük bezlerinin Plasmodium falciparum ve dang virüsü gibi vektör patojenler için anahtar giriş ve çıkış noktaları vardır. Bu video Aedes aegypti sivrisinek midgut ve tükürük bezleri kaldırmak için diseksiyon teknikleri göstermektedir.

Abstract

Sivrisinek midgut ve tükürük bezlerinin Plasmodium parazitler ve Dang virüsler gibi patojenler için anahtar giriş ve çıkış noktaları vardır. Bu video protokolü Aedes aegypti sivrisinek midgut ve tükürük bezlerinin çıkarılması için diseksiyon teknikleri gösteriyor.

Protocol

Sivrisinek midgut ve tükürük bezi dokuları Diseksiyon 1X Fosfat ön hazırlık immobilize ° C kadar sıcaklık 4 tabi Salin (1X PBS) çözümü ve sivrisineklerin anesthetization Tamponlu gerektirir. Sivrisinekler, soğuk buz üzerinde tutulur bir Petri kabındaki koyarak anestezi kalır. Için gerekli olan diğer malzemeler şunlardır: 10x amacı, pipet, ince uçlu forseps, cam slayt, iğne ucu probları ile donatılmış ışık mikroskobu.

Midgut diseksiyonu

1X PBS bir damla ışık mikroskobu altında monte edilmiş bir cam slayt üzerine yerleştirin.
Bir sivrisinek, bir iğne ucu probu ile sivrisinek toraks bıçaklama tarafından hazırlanan slayt üzerine aktarın.
Probu ile sivrisinek basılı tutarken, son karın segment ikinci kavramak için forseps kullanabilir ve tek bir hareket sivrisinek karın yavaşça çekin. Midgut immobilize toraks bağlı kalmalıdır.
Karın atın. Forseps toraks midgut ayırmak için kullanın.

Tükürük bezi diseksiyonu

1X PBS bir damla ışık mikroskobu altında monte edilmiş bir cam slayt üzerine yerleştirin.
Bir sivrisinek, bir iğne ucu prob ile toraks stabbling Pick up.
Parmaklarınızı kullanarak sivrisinek bacaklar çekin.
Sivrisinek slayt üzerine aktarın.
Forseps kullanarak sivrisinek başkanı çıkarın.
Probu ile sivrisinek toraks basılı tutarken, toraks yavaşça aşağı itmek için başka bir prob kullanın.
Tükürük bezleri, toraks ön kısmı bulunan ve bir iğne ucu prob kullanarak ve toraks bezi bağlayan ekleri kesilmesinin izole edilebilir. Iki yan loblar ve medial lob: Bozulmamış tükürük bezleri üç loblar oluşur.