Summary
L'intestin moyen des moustiques et les glandes salivaires sont d'entrée clés et points de sortie pour les agents pathogènes comme le vecteur de Plasmodium falciparum et le virus de la dengue. Cette vidéo montre les techniques de dissection pour enlever les glandes salivaires de l'intestin moyen et les moustiques Aedes aegypti.
Abstract
L'intestin moyen des moustiques et les glandes salivaires sont d'entrée clés et points de sortie pour les agents pathogènes tels que les parasites Plasmodium et virus de la dengue. Ce protocole vidéo montre les techniques de dissection pour l'ablation des glandes salivaires de l'intestin moyen et les moustiques Aedes aegypti.
Protocol
La dissection de l'intestin moyen et les tissus salivaires de moustiques nécessite une préparation préalable du phosphate 1X saline tamponnée (PBS 1X) solution et anesthésie de moustiques en soumettant à une température de 4 ° C, jusqu'à ce que immobilisé. Les moustiques restent anesthésiés en les plaçant dans une boîte de Pétri qui est conservé au froid sur la glace. D'autres matériaux requis comprennent: microscope optique équipé d'objectif 10x, pipette, à pointe fine pince, lame de verre, aiguille à pointe sondes.
Dissection intestin
- Déposer une goutte de PBS 1X sur une lame de verre monté sous le microscope optique.
- Transfert d'un moustique sur la lame préparé par poignardé au thorax moustique avec une sonde d'aiguille à pointe.
- Tout en maintenant enfoncé le moustique avec la sonde, utilisez la pince pour saisir la seconde au dernier segment abdominal et retirez doucement l'abdomen de moustiques dans un seul mouvement. L'intestin moyen doit rester attaché au thorax immobilisé.
- Jeter l'abdomen. Utilisez la pince pour détacher l'intestin moyen du thorax.
Dissection des glandes salivaires
- Déposer une goutte de PBS 1X sur une lame de verre montée sous un microscope optique.
- Procurez-vous un moustique par stabbling le thorax avec une sonde d'aiguille à pointe.
- Retirez les jambes contre les moustiques en utilisant vos doigts.
- Transfert du moustique sur la lame.
- Retirer la tête du moustique en utilisant une pince.
- Tout en maintenant enfoncé le thorax des moustiques avec la sonde, utiliser une autre sonde pour pousser doucement vers le bas sur le thorax.
- Les glandes salivaires sont situées à la partie antérieure du thorax et peut être isolé en utilisant une sonde aiguille pointe et rompre les attaches qui relient la glande au thorax. Intact glandes salivaires sont composées de trois lobes: deux lobes latéraux et un lobe.
