Dissection של בלוטות הרוק midgut ו מ AE. aegypti יתושים

Summary

Midgut יתושים בלוטות הרוק הם מפתח כניסה ויציאה עבור וקטור פתוגנים כמו Plasmodium falciparum ואת וירוס דנגה. וידאו זה מדגים את הטכניקות לנתיחה עבור הסרת בלוטות הרוק midgut ו מ Aedes aegypti יתושים.

Abstract

Midgut יתושים בלוטות הרוק הם מפתח כניסה ויציאה של פתוגנים כגון וירוסים וטפילים Plasmodium דנגי. זה פרוטוקול וידאו מדגים טכניקות לנתיחה להסרת בלוטות הרוק midgut ו מ Aedes aegypti יתושים.

Protocol

Dissection של midgut רקמות בלוטות הרוק של יתושים דורש הכנה מוקדמת של פוספט 1X שנאגרו תמיסת מלח (1X PBS) וכן הרדמה של יתושים ידי העמדת לטמפרטורה של 4 ° C, עד כדי שיתוק. יתושים נשארים הרדים ידי הצבת בצלחת פטרי כי נשמר קר על הקרח. חומרים אחרים הנדרשים כוללים: מיקרוסקופ אור מצויד אובייקטיבי pipettor 10x, קנס שקצהו מלקחיים, שקופיות זכוכית, מחט קצה בדיקות.

Midgut לנתיחה

1. מניחים ירידה של 1X PBS לשקופית כוס רכוב תחת מיקרוסקופ אור.
2. העברת יתוש לשקופית שהוכן על ידי דוקר את החזה יתוש עם בדיקה מחט טיפ.
3. בעוד מחזיק את היתושים עם החללית, השתמש מלקחיים לתפוס את השני קטע הבטן האחרון ומשוך בעדינות את הבטן יתוש בתנועה אחת. Midgut צריך להישאר מחובר החזה משותקת.
4. מחק את הבטן. השתמשו במלקחיים כדי לנתק את midgut מהחזה.

בלוטות הרוק לנתיחה

1. מניחים ירידה של 1X PBS לשקופית כוס רכוב תחת מיקרוסקופ אור.
2. תרימי יתוש על ידי stabbling החזה עם בדיקה מחט טיפ.
3. משוך את הרגליים יתושים באמצעות האצבעות.
4. העברת היתושים לשקופית.
5. הסר את ראשו של יתושים באמצעות מלקחיים.
6. בעוד מחזיק את החזה יתוש עם החללית, השתמש עוד בדיקה בעדינות על החזה.
7. בלוטות הרוק ממוקמים בחלק הקדמי של בית החזה יכול להיות מבודד באמצעות בדיקה קצה מחט וניתוק את הקבצים המצורפים המחברים את בלוטת אל החזה. בלוטות הרוק שלם מורכב משלוש אונות: שתי האונות לרוחב ו באונה המדיאלי.