Summary
El intestino medio del mosquito y las glándulas salivales son clave de entrada y salida de los agentes patógenos, como vector de Plasmodium falciparum y el virus del dengue. Este video muestra las técnicas de disección para la eliminación de las glándulas salivales y del intestino medio del mosquito Aedes aegypti.
Abstract
El intestino medio del mosquito y las glándulas salivales son clave de entrada y salida de los agentes patógenos, como los parásitos Plasmodium y los virus del dengue. Este protocolo de vídeo se muestran las técnicas de disección para la eliminación de las glándulas salivales y del intestino medio del mosquito Aedes aegypti.
Protocol
La disección del intestino y los tejidos de las glándulas salivales de los mosquitos requiere una preparación previa de fosfato 1X solución salina (PBS 1X) y solución de anestesia de los mosquitos al someter a una temperatura de 4 ° C, hasta el inmovilizado. Los mosquitos permanecen anestesiados mediante la colocación de una placa de Petri que se mantiene frío en hielo. Otros materiales necesarios son: microscopio óptico equipado con objetivo de 10x, pipeta, pinzas de punta fina, portaobjetos de vidrio, las sondas de punta de la aguja.
Intestino medio de disección
- Coloque una gota de PBS 1X en un portaobjetos de vidrio montada bajo el microscopio de luz.
- La transferencia de un mosquito en la diapositiva preparada por apuñalar en el tórax de mosquitos con una sonda de punta de aguja.
- Mientras mantiene presionado el mosquito con la sonda, utilice las pinzas para agarrar el segundo al último segmento abdominal y tire suavemente hacia fuera del abdomen del mosquito en un solo movimiento. El intestino medio debe permanecer unido al tórax inmovilizado.
- Deseche el abdomen. Use las pinzas para separar el intestino medio del tórax.
Disección de las glándulas salivales
- Coloque una gota de PBS 1X en un portaobjetos de vidrio montada en un microscopio de luz.
- Recoger un mosquito por stabbling el tórax con una sonda de punta de aguja.
- Tirar de las piernas de los mosquitos utilizando los dedos.
- Transferir el mosquito en la diapositiva.
- Quitar la cabeza del mosquito con el fórceps.
- Mientras mantiene presionado el tórax de mosquitos con la sonda, utilizar otra sonda para empujar suavemente hacia abajo en el tórax.
- Las glándulas salivales se encuentran en la parte anterior del tórax y se puede aislar mediante el uso de una sonda de punta de aguja y la ruptura de los accesorios que se conectan a la glándula en el tórax. Intactas las glándulas salivales están formadas por tres lóbulos: dos lóbulos laterales y un lóbulo.
