Waiting
Login processing...

Trial ends in Request Full Access Tell Your Colleague About Jove
Click here for the English version

Biology

열 충격 방법을 사용 E. 대장균에 플라스미드 DNA의 변화

Published: August 1, 2007 doi: 10.3791/253

Summary

Abstract

열 충격 방법을 사용하여 E. 대장균에 플라스미드 DNA의 변화 분자 생물학의 기본 기술입니다. 그것은 박테리아에 외국 플라스미드 또는 결합 제품을 삽입 구성되어 있습니다. 이 비디오 프로토콜은 Genlantis에서 상용 화학적으로 유능한 박테리아를 사용하여 변화의 전통적인 방법을 설명합니다. 얼음에 짧은 부화 후, 화학적 능력 박테리아와 DNA의 혼합물은 45 초 동안 42 ° C에 배치됩니다 (열충격) 후 얼음에 다시 배치. SOC 미디어가 추가되고 변형 세포 ° C 30 분 교반과 함께 37 incubated 수 있습니다. 관계없이 변환 효율의 식민지를 고립을 보장하기 위해서, 변형 박테리아의 두 수량은 도금 있습니다. 이것은 전통적인 프로토콜은 대부분의 상용 유능한 박테리아를 변환하기 위해 성공적으로 사용될 수 있습니다. Genlantis에서 turbocells이 설명서에 설명된 소설 3 분 변환 프로토콜에도 사용할 수 있습니다.

Tags

제 6 기본 프로토콜 DNA 변형 플라스미드 복제
열 충격 방법을 사용 E. 대장균에 플라스미드 DNA의 변화
Play Video
PDF DOI

Cite this Article

Froger, A., Hall, J. E.More

Froger, A., Hall, J. E. Transformation of Plasmid DNA into E. coli Using the Heat Shock Method. J. Vis. Exp. (6), e253, doi:10.3791/253 (2007).

Less
Copy Citation Download Citation Reprints and Permissions
View Video

Get cutting-edge science videos from JoVE sent straight to your inbox every month.

Waiting X
Simple Hit Counter