Waiting
Login processing...

Trial ends in Request Full Access Tell Your Colleague About Jove
Click here for the English version

Biology

التحول من الحمض النووي البلازميد في كولاي استخدام أسلوب الصدمة الحرارية

doi: 10.3791/253 Published: August 1, 2007

Summary

Abstract

التحول من الحمض النووي البلازميد في كولاي باستخدام أسلوب الصدمة الحرارية هي تقنية البيولوجيا الجزيئية الأساسية. وهو يتألف من إدخال المنتج الأجنبي أو ربط البلازميد في البكتيريا. هذا البروتوكول الفيديو يصف الطريقة التقليدية في التحول باستخدام البكتيريا المختصة متاحة تجاريا كيميائيا من Genlantis. بعد حضانة قصيرة في الجليد ، ويتم وضع خليط من البكتيريا كيميائيا المختصة والحمض النووي في 42 درجة مئوية لمدة 45 ثانية (الصدمة الحرارية) ، ثم توضع مرة أخرى في الجليد. يضاف SOC وسائل الإعلام ويتم تحضين الخلايا تحولت عند 37 درجة مئوية لمدة 30 دقيقة مع الانفعالات. وأكد أن عزل المستعمرات بغض النظر عن كفاءة التحول ، مطلي كميتين من البكتيريا المتحولة. ويمكن استخدام هذا البروتوكول التقليدية بنجاح لتحويل معظم البكتيريا المختصة متاحة تجاريا. يمكن أيضا أن turbocells Genlantis من أن تستخدم في بروتوكول رواية التحول 3 دقائق ، والمبينة في دليل التعليمات.

التحول من الحمض النووي البلازميد في كولاي استخدام أسلوب الصدمة الحرارية
Play Video
PDF DOI

Cite this Article

Froger, A., Hall, J. E. Transformation of Plasmid DNA into E. coli Using the Heat Shock Method. J. Vis. Exp. (6), e253, doi:10.3791/253 (2007).More

Froger, A., Hall, J. E. Transformation of Plasmid DNA into E. coli Using the Heat Shock Method. J. Vis. Exp. (6), e253, doi:10.3791/253 (2007).

Less
Copy Citation Download Citation Reprints and Permissions
View Video

Get cutting-edge science videos from JoVE sent straight to your inbox every month.

Waiting X
Simple Hit Counter