Waiting
Login processing...

Trial ends in Request Full Access Tell Your Colleague About Jove
Click here for the English version

Biology

טרנספורמציה של DNA פלסמיד לתוך החיידק שימוש בשיטה הלם חום

doi: 10.3791/253 Published: August 1, 2007

Summary

Abstract

טרנספורמציה של DNA פלסמיד לתוך החיידק בשיטה הלם חום היא טכניקה בסיסית של ביולוגיה מולקולרית. זה מורכב של החדרת מוצר פלסמיד או קשירת זרים לתוך חיידקים. זה פרוטוקול וידאו המתאר את השיטה המסורתית של שינוי באמצעות זמינים מסחרית חיידקים המוסמכת כימית Genlantis. לאחר דגירה קצרה קרח, תערובת של חיידקים כימית המוסמכת ו-DNA ממוקם ב 42 מעלות צלזיוס למשך 45 שניות (הלם חום) והניח ואז חזרה בקרח. SOC התקשורת מתווסף ותאי שינה מודגרת על 37 מעלות צלזיוס למשך 30 דקות עם תסיסה. כדי להיות סמוך ובטוח של בידוד מושבות ללא תלות יעילות טרנספורמציה, שתי כמויות של חיידקים הם הפכו מצופים. פרוטוקול זה המסורתי יכול לשמש בהצלחה להפוך חיידקים המוסמכת ביותר זמינים מסחרית. Turbocells מ Genlantis יכול לשמש גם בפרוטוקול 3 דקות רומן שינוי, המתוארות במדריך ההוראה.

טרנספורמציה של DNA פלסמיד לתוך החיידק שימוש בשיטה הלם חום
Play Video
PDF DOI

Cite this Article

Froger, A., Hall, J. E. Transformation of Plasmid DNA into E. coli Using the Heat Shock Method. J. Vis. Exp. (6), e253, doi:10.3791/253 (2007).More

Froger, A., Hall, J. E. Transformation of Plasmid DNA into E. coli Using the Heat Shock Method. J. Vis. Exp. (6), e253, doi:10.3791/253 (2007).

Less
Copy Citation Download Citation Reprints and Permissions
View Video

Get cutting-edge science videos from JoVE sent straight to your inbox every month.

Waiting X
Simple Hit Counter