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Biology

Transformación de ADN plásmido en E. coli utilizando el método de choque térmico

doi: 10.3791/253 Published: August 1, 2007

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Abstract

Transformación de ADN plásmido en E. coli usando el método de choque térmico es una técnica básica de la biología molecular. Consiste en la inserción de un producto extranjero plásmido o la ligadura en las bacterias. Este protocolo de vídeo describe el método tradicional de transformación utilizando comercialmente disponibles a partir de bacterias competentes químicamente Genlantis. Después de un corto de incubación en hielo, una mezcla de químicos y bacterias competentes de ADN se coloca a 42 ° C durante 45 segundos (golpe de calor) y luego se coloca de nuevo en hielo. SOC medios de comunicación y se añade a las células transformadas se incubaron a 37 º C durante 30 minutos con agitación. Para estar seguro de aislar a las colonias, independientemente de la eficiencia de transformación, dos cantidades de bacterias transformadas se siembran. Este protocolo tradicional puede ser utilizado con éxito para transformar bacterias competentes la mayoría de los disponibles en el mercado. El turbocells de Genlantis también puede ser utilizado en un protocolo de transformación la novela de 3 minutos, que se describe en el manual de instrucciones.

Transformación de ADN plásmido en E. coli utilizando el método de choque térmico
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Froger, A., Hall, J. E. Transformation of Plasmid DNA into E. coli Using the Heat Shock Method. J. Vis. Exp. (6), e253, doi:10.3791/253 (2007).More

Froger, A., Hall, J. E. Transformation of Plasmid DNA into E. coli Using the Heat Shock Method. J. Vis. Exp. (6), e253, doi:10.3791/253 (2007).

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