Login processing...

Trial ends in Request Full Access Tell Your Colleague About Jove
Click here for the English version

Biology

Principes van Knaagdieren Chirurgie voor de Nieuwe Surgeon

doi: 10.3791/2586 Published: January 6, 2011

ERRATUM NOTICE

Summary

Voordat u een operatie moet er een nieuwe chirurg zijn opleiding in basis chirurgische technieken en concepten. In dit artikel zal basic chirurgische overwegingen met een nadruk op knaagdieren.

Abstract

Voor zowel wetenschappelijk als om redenen van dierenwelzijn, zou de opleiding in basis-chirurgische technieken en concepten worden ondernomen voordat ooit op zoek naar een operatie uit te voeren op een knaagdier. Studenten, post-doctorale onderzoekers en anderen die geïnteresseerd zijn in het uitvoeren van een operatie aan knaagdieren als onderdeel van een onderzoeksprotocol kan niet gehad hebben formele chirurgische opleiding als deel van hun benodigde cursussen. Operatie zelf is een technische vaardigheid, en een die zal verbeteren met de praktijk. De principes van aseptische techniek, maar blijven vaak onverklaard of onkundige. Voor de meeste nieuwe chirurgen, is deze vitale informatie in stukjes en beetjes mode of geleerd op de baan, die geen van beide is ideaal. Het kan ook leren hoe je een bepaalde operatie moeilijk, omdat de nieuwe chirurg is zowel een chirurgische techniek en de beginselen van asepsis op hetzelfde moment te leren uit te voeren. Dit artikel geeft een overzicht en doet aanbevelingen voor basis-chirurgische vaardigheden en technieken die nodig zijn voor een succesvolle knaagdier chirurgie. Dit artikel is bedoeld om hands-on training aan te vullen door de instelling van de gebruiker.

Protocol

1. Voor uitvoeren van een operatie, Wees ervan bewust dat er wettelijke en ethische eisen rond het gebruik van dieren in onderzoek en onderwijs

  1. Alle chirurgische ingrepen moet worden goedgekeurd door de lokale ethische of wettelijke bevoegdheid (IACUC of Ethische commissie of Home Office, etc.).
  2. Zorg ervoor dat deze goedkeuring is op zijn plaats voor het begin.
  3. Als er sprake is van goedkeuring voor een operatie of goedkeuring voor het gebruik van dieren, niet doorgaan.

2. Inzicht in aseptische techniek

  1. Steriliteit als concept
    1. Het doel van aseptische techniek is te verminderen of te elimineren waar mogelijk de normale bacteriële belasting aanwezig is op het dier en in de omgeving voor het begin van de operatie. Dit betekent dat de instrumenten worden gesteriliseerd, de chirurgische werkvlak is gedesinfecteerd, en het dier en de chirurg handen gedesinfecteerd.
    2. Chirurgie, correct is uitgevoerd, hoeft niet profylactisch antibiotica of andere behandelingen, andere dan de verlichting van de pijn.
    3. Zelfs met een uitstekende aseptische techniek, kunnen bacteriën afkomstig van de chirurgische onderwerp nog worden geïntroduceerd in een chirurgisch gemaakte wond. Een goede aseptische techniek beperkt het risico van insleep van ziekteverwekkers, voornamelijk bacteriën, in de chirurgische sites.
  2. Steriel veld
    1. Het steriele veld omvat de chirurgische gebied, het gebied voorbereid op het dier, en de voorkant van de chirurg.
  3. Breaks in steriliteit
    1. Breekt in steriliteit optreden wanneer de chirurg raakt iets buiten het steriele veld. Dit kan haar gezicht, een lamp, een onvoorbereid deel van het dier, of een niet-steriel instrument zijn.
    2. Dit is de reden profylactisch antibiotica worden gebruikt.
    3. Vergeet niet, is een speciale activiteit plaats. Wees kalm, bedachtzaam en nauwkeurig.

3. Voorbereiden voor Heelkunde

  1. Knaagdier operatie niet nodig een speciale chirurgische suite. Idealiter zou operaties worden uitgevoerd in een aparte ruimte in een lab, zoals een kap of laminaire flow kast. Hoe dan ook, moet de gekozen gebied worden netjes, goed verlicht, en uit de verkeersstroom. Knaagdier operaties worden vaak uitgevoerd op een laboratorium benchtop. Voor het regelen van de chirurgische gebied, goed schoon de stationaire met een desinfecterend middel.
  2. Het is nuttig voor de chirurg om een ​​assistent. Deze assistent kan u helpen met een verdoving, voorbereiden dieren, en het toezicht op herstel. Hierdoor kan de chirurg om zich voor te bereiden, terwijl de dieren worden bereid, dus het verkorten van de tijd dier onder narcose, en misschien waardoor meer operaties uit te voeren.
  3. Schik de chirurgische gebied, zodat er drie verschillende zones: de voorbereiding, operatie en herstel.
  4. Voor de voorbereiding gebied, verzamelen die nodig zijn de leveringen:
    1. Smeren oogzalf
    2. Tondeuse of scheerapparaat
    3. Gaas
    4. Chirurgische scrub-oplossingen
      1. Chirurgische scrub oplossingen vaak gebruikt worden jodoforen of chloorhexidine /
      2. 70% isopropyl alcohol wordt ook gebruikt als onderdeel van de chirurgische scrub.
  5. Voor de chirurgische gebied, opbouwen en inrichten van het materiaal dat nodig is.
    1. Warmtebron voor het houden van het knaagdier warm
      1. De ideale warmtebron is een recirculerende water verwarming pad. Elektrische verwarming pads zijn niet aanvaardbaar voor een operatie. Chirurgische handschoenen gevuld met warm water, of chemische de hand warmers kunnen ook worden gebruikt. Als een van de laatste twee worden gebruikt, moeten de temperatuur van het object zorgvuldig te worden gecontroleerd tijdens de operatie.
    2. Chirurgische platform
      1. Dit kan een steriele waterdichte pad geplaatst over de warmtebron worden.
    3. Wegwerp levert
      1. Deze kunnen zijn: steriele chirurgische gordijnen, gaas, katoen applicators, vloeistoffen voor toediening aan het knaagdier, weefsel irrigatie oplossing.
    4. Steriele instrumenten
      1. Het complement van instrumenten zal variëren afhankelijk van de operatie, maar over het algemeen zijn scalpels, weefsel oprolmechanismen, tang, hemostats, en schaar.
      2. Instrument sterilisator of steriliseren oplossing als het dezelfde instrumenten gebruikt moeten worden op meer dan een chirurgische onderwerp
        1. Het gebruik van een hete kraal sterilisator om instrumenten te steriliseren tussen dieren komt veel voor.
    5. Materiaal naar de chirurgische incisie te sluiten.
      1. De gebruikte materialen is afhankelijk van de chirurgische site en applicatie, maar kan omvatten: Suture en naalden, nietjes en een nietje applicator, of weefsel lijm
    6. Alle andere nodige speciale apparatuur (stereotaxische apparatuur, implantaten, operationele microscoop)

4. De voorbereiding van de instrumenten voor Heelkunde

  1. Instrumenten moeten schoon zijn ensteriel aan het begin van de operatie. Dit wordt vaak gedaan door het creëren van een complete chirurgische packs die worden geautoclaveerd.
  2. Instrumenten kunnen worden gebruikt voor meer dan een knaagdier chirurgie zonder autoclaaf en ompakken, maar moet worden gereinigd en gesteriliseerd tussen de knaagdieren.
    1. Als een warme kraal sterilisator wordt gebruikt, moet u tijd te geven voor de instrumenten om af te koelen na sterilisatie. Instrumenten kunnen worden gekoeld door dompelen in steriel water.
    2. Chemische sterilisatiemiddelen kan ook gebruikt worden, maar vereisen een langere contacttijd (~ 10 minuten-zou kunnen worden 30-60 minuten, vereisen spoelen). Alcohol is niet een sterilisatiemiddel.
  3. Schik instrumenten op steriele waterdichte laken in de volgorde waarin ze zullen worden gebruikt.

5. De voorbereiding van de Animal voor Heelkunde

  1. De drie dingen die worden toegediend voor de operatie zijn verdoving, pijnstilling en antibiotica.
    1. Anesthesie noodzakelijk is voor een operatie. Anesthetica kunnen worden toegediend via inhalatie of injectie.
      1. De meest voorkomende inhaleren verdoving in gebruik is op dit moment isofluraan.
      2. De meest voorkomende injecteerbare verdoving wordt gebruikt is een combinatie van ketamine en xylazine, eventueel met een ander kalmerend middel toegevoegd.
      3. Raadpleeg uw installatie diergeneeskundig personeel voor de juiste doseringen.
    2. Pre-emptieve analgetica worden aanbevolen en dient te worden toegediend voor de operatie begint.
      1. Vaak gebruikte niet-steroïdale anti-inflammatoire onder flunixine en carprofen.
      2. Beschikbare opiaten kan buprenorfine, morfine, fentanyl of.
      3. Raadpleeg uw installatie diergeneeskundig personeel voor de juiste doseringen en wijze van toediening.
    3. Met goed uitgevoerde operatie, zijn antibiotica in het algemeen niet nodig is, met uitzondering van enkele hoog-risico gastro-intestinale chirurgie.
      1. Als antibiotica worden gebruikt, gebruikt bieden peri-operatief (voor de eerste incisie).
      2. Raadpleeg uw installatie diergeneeskundig personeel voor de juiste antibiotica, doseringen, en de wijze van toediening.
  2. Chirurgisch voorbereiding van de incisie
    1. Scheer de incisie site. Over het algemeen scheren een oppervlakte van ongeveer 3 keer de grootte van de voorgestelde incisie. De grootte van de geschoren en bereid gebied kan worden beperkt door de grootte van het dier of het gebied op het dier.
    2. Het geschoren gebied wordt gedesinfecteerd met meerdere toepassingen van chirurgische scrub oplossing en isopropyl alcohol. Toepassing is meestal chirurgische scrub eerst, dan de alcohol. Eindig met een uiteindelijke toepassing van struikgewas oplossing.
    3. Chirurgische schrobben is uitgevoerd in een cirkelvormig patroon, te beginnen in het midden en spiraalvormige naar buiten, of op kleinere dieren, een unidirectioneel mode.
      1. Als schrobben een richting, plaats steriel gaasje op de crainial marge van het geschoren gebied, die het haar van het dier. Begrijpen en voorzichtig stabiliseren van het dier door de steriele gaas. Toe te passen scrub oplossing en alcohol een richting weg van het steriele gaas.
  3. Verplaatsen van het dier naar het operatiegebied
    1. Beweegt het dier met de voorbereide operatiewond naar boven, en zonder contact met de voorbereide site.
    2. Plaats het dier op het chirurgische gebied, zodat de operatiewond is naar boven, naar de chirurg.
  4. Draperen van het dier
    1. Als het dier wordt gedrapeerd door de assistent, moet de assistent niet vergeten dat het buitenoppervlak van het laken wordt beschouwd als onderdeel van het steriele veld en mogen niet worden gehanteerd door de assistent. Draperen wordt vaak overgelaten aan de chirurg, en drapeer is opgenomen in de chirurgische verpakking.
    2. Een standaard waterdicht wegwerp papier laken wordt algemeen aanbevolen.

6. De voorbereiding van de chirurg voor Heelkunde

  1. Voorbereiding van de chirurg moeten benadrukken dat een speciale activiteit zal plaatsvinden, een waarin de chirurg moet bewust zijn van hun elke beweging in en uit het steriele veld.
  2. Het haar en gezicht worden over het algemeen bedekt met een muts en masker, respectievelijk. Deze moeten nieuw zijn bij de start van de chirurgische sessie, maar hoeven niet te worden veranderd tussen de dieren.
  3. Chirurgen moeten dragen een disposable chirurgische jurk, schone wegwerp laboratoriumjas of op zijn minst een schone laboratoriumjas. Dit hoeft niet te worden gewijzigd tussen de dieren, maar moet worden veranderd tussen chirurgie sessies.
  4. Handen moeten worden gereinigd goed voor de operatie. Chirurgische handschoenen of examen handschoenen moeten worden gebruikt. Als examen handschoenen worden gebruikt, moeten ze worden gewassen met een chirurgische ontsmettingsmiddel voordat het wordt gebruikt. Handschoenen moeten worden veranderd tussen de dieren.

7. Tijdens de operatie

  1. Onderhoud van het steriele veld.
    1. Zodra uw handen steriel en de operationele veld is steriel, moet u zorgvuldig te bewegen en niet om steriliteit te breken onthouden. Deze includes met een steriel veld waarop u kunt neergelegd instrumenten, herinneren niet aan je neus krabben, en alleen het uitdelen van de chirurgische patiënt door de steriele laken.
  2. Tissue behandeling
    1. Voorzichtig behandelen weefsels. Houden weefsels vochtig, vooral als een operatie wordt verlengd. Minimaliseer het creëren van weefsel zakken en onnodige dissectie.
    2. Juiste weefsel behandeling vermindert de kans en het risico van postoperatieve infecties, versnelt de genezing en vermindert de post-operatieve pijn.
  3. Vervanging van verloren vloeistoffen
    1. De gebruikelijke routes van toediening van vocht bij knaagdieren zijn subcutane of intraperitoneale. Gebruik maken van kleine hoeveelheden voor kleine dieren-1-2 ml intraperitoneaal voor muizen, bijvoorbeeld.
    2. Verwarmde vloeistoffen kan helpen voorkomen dat een daling van de lichaamstemperatuur. Muis en rat lichaamstemperatuur hoger is dan de mens, zodat vloeistoffen moeten worden warmer.
  4. Behouden warmte
    1. Plaatsing van een verwarmings-pad onder het dier tijdens de operatie en de kooi tijdens het herstel is een standaard manier om een ​​dier lichaamstemperatuur te behouden.
      1. Voorzichtig met verwarming alleen pads gebruiken die zijn gemarkeerd voor de operatie. Anderen kunnen veroorzaken thermisch letsel.
    2. Verwarmde vloeistoffen, gegeven intraperitoneaal, kan ook helpen warm dieren.
  5. Operationele microscoop-kunnen sommige procedures te vergemakkelijken (microvasculaire chirurgie, oudere chirurgen, etc. Kan ook worden bereikt door het gebruik van loepen, zoals loepen, enz.)

8. Post-operatieve herstel Overwegingen

  1. Dieren moeten herstellen op een plat papier beddengoed (steriele papieren handdoeken, enz.) in plaats van standaard veeteelt beddengoed.
  2. Houd het dier warm. Warmte helpt bij spoedig herstel toe. Dit wordt vaak gedaan door het plaatsen van het herstel kooi half-op een verwarmingselement, zodat de dieren kunnen hun gewenste temperatuur kiezen als ze herstellen.
  3. Niet terug te keren dieren of kooien om het dier wachtruimte totdat alle dieren lijken normaal. Elk dier dat geopereerd moet weer de mogelijkheid om recht zelf in de kooi en in staat zijn om normaal te bewegen over voordat ze terug naar de wachtruimte.
  4. Monitor dieren post-operatief voor onverwachte tekenen van ziekte of infectie. Dieren zullen over het algemeen verliezen een kleine hoeveelheid van het gewicht na de operatie, maar met de juiste pijnstilling en het verstrekken van voedsel, moeten ze het gewicht snel terug te krijgen.

9. Post-operatieve Monitoring is het laatste deel van een succesvolle operatie

  1. Voor de vijf tot zeven dagen na de operatie, toezicht houden op de algemene toestand van het dier.
    1. Post-operatief, moeten de dieren worden helder, alert en actief. Ze moeten normaal gesproken te maken krijgen met lotgenoten, eten en drinken, en in staat om een ​​normale soort-specifieke houdingen te bereiken.
    2. Dieren die zich depressief voelt, eetlustremmende of traag moeten worden onderzocht om de oorzaak van deze verandering. Overweeg de mogelijkheid van een onbehandelde pijn of infectie.
  2. Eten / drinken is ook belangrijk om herstel.
    1. Er zal een aantal drop-off zijn van de consumptie na de operatie. Dit kan worden verminderd door het maken van voedsel en water beter toegankelijk.
      1. Langere sipper buizen nuttig zou kunnen zijn.
      2. Dagelijkse provisie van natte voedsel in de bodem van de kooi kan ook verleiden dieren om te eten.
    2. Sommige analgetica bij ratten leidt tot pica, dus wees ervan bewust dat dieren kunnen ongepaste items (zoals bedden) eten letsel.
  3. Monitor dieren op tekenen van infectie bij de incisie. Het gevaar periode is de eerste 7 dagen en dieren moeten dagelijks worden gecontroleerd.
    1. Tekenen van infectie zijn roodheid, zwelling, afscheiding (purulent of sereuze), pijn, of het openen van de incisie (dehiscentie).

10. Na de ingreep is voltooid, is de laatste stap IJkopname succes van uw operatie

  1. Was het model geïnduceerde / part verwijderd hersteld / functionaliteit?
  2. Was er zo weinig pijn als mogelijk?
  3. Was er geen infectie?
  4. Succes!

Discussion

Experimentele operatie aan knaagdieren wordt zelden uitgevoerd door dierenartsen en artsen. In plaats daarvan wordt vaak uitgevoerd door biomedische onderzoekers met weinig of geen formele opleiding in de beginselen van chirurgie en aseptische techniek. In een onderzoekssetting, een operatie is meestal geleerd van collega's, zich meestal niet formeel beide opgeleid. Operatie uitgevoerd in het laboratorium kan ook gezien worden in de eerste plaats als een methode voor het opstellen van een diermodel met als doel het genereren van een set van dieren voor een studie. Terwijl een bepaalde operatie is meestal een kwestie van hand-oog coördinatie en technische vaardigheid, die beide kunnen worden verworven via de praktijk, principes en vaardigheden in verband met het concept van de aseptische techniek (en dus een operatie zonder infectie) kan niet alleen worden verworven via de praktijk en zijn vaak niet volledig overgebracht naar onderzoekers.

De afwezigheid van formele opleiding in de chirurgische principes kan leiden tot een gebrek aan begrip van de gelijke betekenis van zowel technisch correct chirurgie en pre-en post-operatieve zorg van de dieren. Behandeling van zowel de operatie zelf en de peri-operatieve zorg van de dieren zal resulteren in een toename van het welzijn van dieren en de kwaliteit van de gegevens verkregen uit het chirurgisch model. Kan bijvoorbeeld subklinische post-operatieve infectie verwarren resultaten, zoals veranderingen in gedrag en fysiologie gezien met pijn. Als prooi soorten, de meeste knaagdieren zijn verrassend stoïcijns en hoewel die lijden aan post-operatieve pijn of infectie kunnen vertonen weinig klinische symptomen. De subtiele tekenen van pijn of ongemak bij knaagdieren worden verder verduisterd door een algemeen gebrek aan opleiding van biomedische onderzoekers in de erkenning van zulke tekenen bij knaagdieren. Bovendien, knaagdieren zijn het meest actief tijdens de donkere cyclus, wanneer medewerkers zijn over het algemeen niet beschikbaar voor de klinische en gedragsmatige tekenen van pijn na een operatie te bekijken. Deze video is geen vervanging voor een goede chirurgische opleiding, die idealiter zou zowel hands-on en die door hun instelling, maar is ontworpen om onderzoekers een overzicht van de gemeenschappelijke zorgen en visual demonstratie van geaccepteerde aseptische procedures en technieken nodig zijn om een ​​minimale competentie te ontwikkelen bij de uitvoering van de operatie te overleven bij knaagdieren.

Disclosures

Alle auteurs werken voor Charles River, een belangrijke leverancier van chirurgisch-gemodificeerde dieren voor onderzoek.

References

  1. American College of Laboratory Animal Medicine Position on Rodent Surgery. Forthcoming.
  2. Animal Welfare, 9 CFR, Parts 1, 2, and 3. Forthcoming.
  3. Bradfield, J. F., Schachtman, T. R., McLaughlin, R. M., Steffen, E. K. Behavioral and physiologic effects of inapparent wound infection in rats. Lab Anim Sci. 42, 572-578 (1992).
  4. Brown, M. J., Pearson, P. T., Tomson, F. N. Guidelines for animal surgery in research and teaching. AVMA Panel on Animal Surgery in Research and Teaching, and the ASLAP (American Society of Laboratory Animal Practitioners). Am J Vet Res. 54, 1544-1559 (1993).
  5. Brown, P. A., Hoogstraten-Miller, S. Principles of Aseptic Rodent Survival Surgery: Parts I & 2. Laboratory Animal Medicine and Management. Reuter, J. D., Suckow, M. A. International Veterinary Information Service. Ithaca. (2004).
  6. Institute of Laboratory Animal Resources, National Research Council. Guide for the Care and Use of Laboratory Animals. National Academy Press. Washington, DC. 556-570 (1996).
  7. Popp, M. B., Brennan, M. F. Long-term vascular access in the rat: importance of asepsis. Am J Physiol. 241, H606-H612 (1981).
  8. Rutala, W. A. APIC guideline for selection and use of disinfectants. Am J Infect Control. 24, 313-342 (1996).

Erratum

Formal Correction: Erratum: Principles of Rodent Surgery for the New Surgeon.
Posted by JoVE Editors on 05/04/2011. Citeable Link.

A correction was made to Principles of Rodent Surgery for the New Surgeon. The order of the authors was incorrect. The order of the authors has been changed to :

Kathleen R. Pritchett-Corning, Guy B. Mulder, Yiying Luo, William J. White

Instead of:

Kathleen R. Pritchett-Corning, Yiying Luo, Guy B. Mulder, William J. White

Principes van Knaagdieren Chirurgie voor de Nieuwe Surgeon
Play Video
PDF DOI

Cite this Article

Pritchett-Corning, K. R., Mulder, G. B., Luo, Y., White, W. J. Principles of Rodent Surgery for the New Surgeon. J. Vis. Exp. (47), e2586, doi:10.3791/2586 (2011).More

Pritchett-Corning, K. R., Mulder, G. B., Luo, Y., White, W. J. Principles of Rodent Surgery for the New Surgeon. J. Vis. Exp. (47), e2586, doi:10.3791/2586 (2011).

Less
Copy Citation Download Citation Reprints and Permissions
View Video

Get cutting-edge science videos from JoVE sent straight to your inbox every month.

Waiting X
simple hit counter