Summary
يتم عرض بروتوكولات لمهمتين أنشأت محرك التنسيق، وتسريع شريط rotarod والأفقي، أيضا اختبارين المتقدمة في أكسفورد مؤخرا، وقضبان ثابتة والمتوازيين. هذه الاختبارات يمكن الكشف عن الإعاقات الحركية يحتمل أن تكون ذات أهمية في حد ذاتها، فضلا عن كونه المتغيرات المحتملة في اختبارات مناطق أخرى من السلوك.
Abstract
ويتزايد استخدام الفئران في علم الأعصاب السلوكي، لتحل محل إلى حد كبير الفئران والحيوان سلوكي في الاختيار. قبل يمكن تقييم جوانب السلوك مثل الانفعالية أو الإدراك، ومع ذلك، فمن الأهمية بمكان تحديد ما إذا كانت قدرات المحركات من مثل ماوس أو متحولة lesioned يسمح مثل هذا التقييم. قد يكون جيدا ضعف الأداء على مهمة المتاهة التي تتطلب قوة والتنسيق، مثل متاهة موريس المائية، في الماوس عن طريق السيارات، وبدلا من المعرفي، ضعف، لذلك فمن الضروري أن يشرح بشكل انتقائي وهذا الأخير من السابق. على سبيل المثال، تسبب العاهات الحسية التي أثبتت مضادات NMDA لإضعاف الأداء متاهة مائية 2.
وقد جرت العادة على تقييم التنسيق الحركي في الفئران والجرذان من قبل الاختبار rotarod، التي وضعت للحيوان على قضيب أفقي التي تدور حول محورها الطويل؛ الحيوان يجب السير إلى الأمام لتبقى تستقيم ولا تسقط.كلا السرعة المحددة والإصدارات المتسارع للrotarod المتاحة.
الاختبارات الثلاثة الأخرى المذكورة في هذه المقالة (شريط أفقي، وقضبان ثابتة والمتوازيين) كل التنسيق التدبير على جهاز ثابت. يتطلب شريط أفقي أيضا قوة للحصول على أداء ملائمة، ولا سيما من الأطراف الأمامية مثل الماوس السيطرة في البداية شريط فقط مع الجبهة الكفوف.
الفئران الكبار لا يؤدون بشكل جيد في الاختبارات مثل قضبان ثابتة والمتوازيين (الملاحظات الشخصية)؛ تظهر منسقة بشكل أقل من الفئران. لقد اختبرت فقط ذكور الفئران، ومع ذلك، والفئران الذكور تبدو أقل عموما منسقة تنسيقا جيدا من الإناث. تظهر الفئران لديها أعلى قوة: نسبة الوزن من الفئران؛ اسم اللاتينية، المصحف العضلة، يبدو من المناسب تماما. وrotarod، يتم استخدام أشكال مختلفة من الاختبار خطأ القدم 12 أو المنصة (Noldus) 15 جهاز عموما لتقييم التنسيق الحركي في الفئران.
Introduction
يرصد سلوك واضح من خلال العمل، والعمل يتطلب المهارات الحركية، بما في ذلك التنسيق من الجسم. تم تنفيذ واحدة من التجارب الأولى في تاريخ سلوك الحيوان بواسطة كولين ستيوارت، وهو طالب الدكتوراه في جامعة كلارك في الولايات المتحدة 11. قاس آخر من الفئران من خلال وضعها في أسطوانة وتحسب عدد المرات التي التفت. هذا الجهاز في وقت مبكر ربما كان رائد تشغيل الإطارات واختبار rotarod المستخدمة حاليا، وإن كان ذلك في جهاز ستيوارت كانت الفئران داخل البرميل، والحركة التي كان يقودها على الفئران، في حين أنه في rotarod يمشي الحيوان على السطح الخارجي لل طبل بالتناوب أو قضيب الذي هو بالمحركات.
كان قضيب الأصلية المستخدمة من قبل دنهام وميا (1957) 7 سرعة مجموعة، ولكن في الوقت الحاضر تسريع الإصدارات (جونز وروبرتس 1968) 9 متوفرة. العيب من rotarod السرعة المحددة هي أن بعض الحيوانات مع ضعف التنسيق سوف تسقط فيبداية، في حين أن لتلك التي لا تبقى على، وسوف تبدأ قريبا اختبار لقياس القدرة على التحمل بدلا من التنسيق في حد ذاته. توزيع النسقين من نقاط البيانات الناتجة قد تكون غير طبيعية بما فيه الكفاية للحيلولة دون تحليل حدودي. عندما يتم استخدام rotarod التعجيل، خصوصا في حال تسارع فقط عندما يتم التوصل إلى معيار مجموعة، مثل البقاء لمدة 10 ثانية، وتوزيع بيانات من المرجح أن يكون التمويه. معدل التسارع يمكن تعديلها بحيث التعب موتور لا يلعب دورا هاما في الأداء؛ ماوس من غير المرجح أن يكون مرهق بشكل ملحوظ بعد فقط 2-3 وقت دقيقة على rotarod.
"اختبار سلسلة" 1 "، معطف شماعات اختبار" أو الشريط الأفقي يقيس قوة forelimb والتنسيق. الصفات اثنين ونقلت الرجوع إلى تطويره؛ أصلا كانت تستخدم سلسلة، ولكن لاحظت في الكتاب أن الأداء يعتمد كثيرا على كيفية مشدود السلسلة كان، وتستخدم بالتالي المجربون المستقبل قضيب معدني، غالبا ما تكون شماعات معطف. لقد وجدنا أن قدرة الفأر لقبضة شريط يتناسب عكسيا مع قطرها، واستخدمت standardly بار 2 مم. في اختبار الأوزان (انظر البروتوكول إن الرب "قياس قوة الفئران") سلك دقيق جدا من الفراء / حجم جامع غلاية يسمح أقوى الحيوانات لتأمين مثل هذا قبضة جيدة يتمكنوا من رفع أكثر من وزنهم جسده. ومع ذلك، باستخدام قضبان قطرها أكبر الأفقي يمكن أن يكون ميزة وحساسية الاختبار يحسن؛ فقط مع شريط 2 مم الأكثر طبيعية C57BL / 6 الفئران وصول إلى الأداء السقف. وبالتالي اعتمدنا مؤخرا جهاز ثلاثة بار، ويمكن للأشرطة يكون متبادل بسهولة لأنها تنسجم مع الشقوق يقتطع من قمم الأعمدة الداعمة. وتعقد القضبان تحت التوتر (مهم خصوصا لجعل شريط 2 مم جامدة) لأنها تناسب فقط الشقوق عند مستويات الدعم رسمها قليلا معا (مثل الأقواس الطويلة وسلسلة بها) (انظر الشكل 3).
وكثيرا ما استخدمت قضبان ثابتة أو الحزملقياس التنسيق، ولكن كان يستخدم دائما حافزا إضافيا لإقناع الحيوانات لاجتياز قضيب. وبعد التفاوض على شعاع الأفقي للوصول إلى الهدف المنشود، مثل قفص المنزل، هربا من الضوء الساطع، أو الطعام (إذا أحرز أنها الجياع). ومع ذلك، في سياق التحقيق في هذا النوع من الاختبار، واكتشفت أن الفئران من شأنه أن يحول بشكل عفوي حول عند وضعه على "فتح" نهاية قضيب الكابولي، ومن ثم اجتياز ذلك حتى وصلوا إلى نهاية معتمد. هذا الأسلوب يلغي الحاجة للتدريب (ضروري في اختبار المتغيرات المذكورة سابقا) كرد فعل فطرية على فأرة الحاسوب ليتم وضعها بالقرب من نهاية قضيب مرتفعة هو محاولة للوصول الى نهاية معتمد. هذا لا، بطبيعة الحال، والقضاء على المشكلة التي تغييرات تحفيزية قد تؤثر على الأداء، الذي هو دائما مع إمكانية هذا النوع من الإجراء.
في الوقت الحاضر تستخدم الأنفاق من الورق المقوى بكثير للمنزل قفص تخصيب البيئية، ولكن disad بهمالفضل في السياق الحالي هو أن حتما أن تمارس الحيوانات في التوازن على اسطوانات التي يمكن أن تمايل حول محور الطويل، ومحاكاة المهارات اللازمة لتحقيق التوازن على rotarod. وهكذا الرئيسية تخصيب قفص يحتمل أن تخفي النمط الظاهري السلوكية؛ مثال هو تحسين حال النمط الظاهري مرض هنتنغتون بواسطة تخصيب 14. الحيوانات أيضا في كثير من الأحيان السير على طول المحور الطويل من هذه الأنفاق، كما عند المشي على طول شعاع ثابت مرتفعة. ولذلك، فإنني شيدت زوج من القضبان المتوازية مرتفعة، وضعت الفئران في منتصف مع الأرجل الأمامية في شريط واحد وhindpaws من جهة أخرى، وهي حالة يمكن أن يكونوا قد واجه من قبل. كان الفئران للوصول الى يدعم نهاية المتوازيين في حين تبقى تستقيم لاجتياز الاختبار. وكان جهاز مماثل إلى حد ما سلسلة من المتوازيين وضعت في قفص الماوس لتقييم تطور سكرابي الناجم عن اختلال وظيفي للسيارات 13.
لقد اختبرنا الآن عدة مئات منالفئران لسير السيارات في أكسفورد. تلقت هذه العلاجات المختلفة بما في ذلك وكلاء الدوائية، أو نقل السلبي من الأنسجة (البلازما) من البشر، ولكن في الغالب الحيوانات المعدلة وراثيا. وبعض الحيوانات أكثر ضعاف على قوة من مهام التنسيق والعكس بالعكس الآخرين. وكانت بعض الفئران أكثر ضعاف على rotarod من على ركائز ثابتة مثل قضبان ثابتة والمتوازيين، بالعكس الآخرين. وبالتالي فإن المادة والبروتوكول المرافق له إن الرب "قياس قوة في الفئران") تصف كيفية توصيف طريقة العلاج والطفرات المختلفة يمكن أن تؤثر بشكل مختلف وظيفة الحركة في الفئران. وبصرف النظر عن rotarod الجهاز الموصوفة هنا هو بسيطة ورخيصة ومناسبة خاصة للمختبرات غير متخصصة لاختبار المهارات الحركية. لتحليل المشية على نطاق وغرامة، ونظام المنصة هو نظام أكثر تطورا من الأساليب القديمة مثل إقناع الماوس على المشي من خلال حمام الحبر ثم أسفل قطعة من الورق، بل هو مكلفهه قطعة من الجهاز.
وقد صممت جميع هذه الاختبارات لقياس التنسيق بدلا من قوة، على الرغم من الواضح أن درجة الحد الأدنى من العضلات هو ضروري لمجرد الماوس لاستخدام أطرافه. لتقييم قوة، الإجراء الشاشة مقلوب 10 هو أكثر ملاءمة، أو، إذا كنت بحاجة لقياس أكثر متدرج، واختبار الأوزان أو لها الآلي شريط سحب ما يعادل (إن الرب هو موضح في البروتوكول "قياس قوة في الفئران"). والاستثناء هو اختبار شريط أفقي، الأمر الذي يتطلب على حد سواء قوة والتنسيق للأداء الناجح.
Protocol
1. جهاز
لجميع الاختبارات، ويتم وضعها على سطح مبطن لينة عند قاعدة جهاز لتخفيف أي الفئران التي تسقط. NB لا يظهر هذا في الأرقام، لكي لا يحجب أي جزء من الجهاز. خلال اختبار مئات من الفئران، على حد سواء طبيعية ومتحولة، لاحظنا أبدا أي إصابات تنجم عن السقوط من هذه الأجهزة، والذي هو عادة 30-50 سم ارتفاع. أيضا، تأكد من تنظيف وتعقيم المعدات بين كل فأر اختبار.
1.1 Rotarod
هناك عدة نسخ تجارية من هذا الجهاز في السوق، ولكن بعض لها عيوب، مثل عدم التعجيل في سرعة كافية للكشف عن اتناسق موتور (بدلا من القدرة على التحمل). خطأ آخر شائع هو أن قضيب ليست عالية بما فيه الكفاية فوق قاعدة، مما أدى في الفئران تميل إلى إسقاط أو القفز.
تم اتخاذ rotarod هو مبين في الشكل 1 لتصميمللمؤلف من قبل أقسام الهندسة من قسم الصيدلة، جامعة أكسفورد. قضيب هو 3 سم في القطر، وأيد 30 سم فوق قاعدة الجهاز. ومخرش السطح في سلسلة من التلال الموازية على طول المحور الطولي، وتمكين الفئران لقبضة بشكل فعال (الشكل 2). NB عمق التلال هو التفصيل الحيوية، وإذا كان الماوس لا يمكن الحصول على قبضة جيدة الاختبار سيكون أصعب بكثير جدا، ومن ناحية أخرى، إذا كانت قبضة جيدة جدا الماوس سوف "عجلة العربة" حول قضيب من خلال عقد بسلبية إلى ذلك. ل "صناع rotarod الهواة" قد يكون من المفيد أن نعرف أن dowelling خشبية مخرش من حجم مناسب بالنسبة للفئران يتوفر تجاريا، بل ستكون بالطبع تحتاج إلى أن تعامل مع الورنيش جيدة للماء قبل الاستخدام. يتم ضبط سرعة بدء إلى 4 دورة في الدقيقة، ومعدل التسارع إلى 20 دورة في الدقيقة / دقيقة. السرعة القصوى هي 40 دورة في الدقيقة.
اثنين من الشفاه منع الماوس من مغادرة قضيب. هم 30 سم وقطرها (هذاربما يمكن أن تخفض إلى 20 سم). تم تعيين انفصالهما في 6 سم (كحد أقصى) ولكن قد تحتاج إلى تعديل أصغر للفئران دون الكبار إذا كانت تميل إلى الالتفاف على قضيب.
1.2 قضبان أفقية الثلاثي (الشكل 3)
مصنوعة من قضبان النحاس، 38 سم، 49 سم عقد فوق سطح مقاعد البدلاء بواسطة عمود خشبي الدعم في كل نهاية. يتم تأمين الأعمدة إلى قاعدة خشبية ثقيلة. هي ثلاثة أقطار شريط المتاحة: 2 و 4 و 6 ملم. شريط 2 مم هو معيار واحد التي نستخدمها، ولكن العديد من الفئران وصول إلى أقصى درجات على هذا. ولذلك أدرجت قضبان قطرها أكبر في محاولة لصقل الاختبار، كما الفئران لا يمكن أن قبضة هذه على ما يرام.
1.3 قضبان ثابت
خمسة المسامير خشبية أو قضبان من سماكة متفاوتة (35 (قضيب 1)، 28، 22، 15 و 9 (قضيب 5) ملم قطر) كل 60 سم يتم إصلاحها طويلة من قبل G-المشبك إلى رف مختبر من هذا القبيل أن قضبان تبرز أفقيا في الفضاء (الشكل 4). نهايةمن قضيب بالقرب من مقاعد البدلاء لديه علامة 10 سم من نهاية، للدلالة على خط النهاية. ارتفاع قضبان فوق الأرض هو 60 سم.
إذا كنت بحاجة لاختبار أقصر وأقل تفصيلا، فقط استخدام أكبر وأصغر وقضبان الأوسط. فان بعجات وآخرون. 14 تستخدم فقط على قضيب واحد لتقييم التقدم من مرض هنتنغتون في الفئران.
1.4 القضبان المتوازية
اثنين من قضبان الصلب موازية 1 م في الطول و 4 مم في القطر يتم إصلاحها 30 ملم (في مراكزها) وبصرف النظر على أعمدة خشبية دعم في غاياتهم (الشكل 5). قضبان هي 60 سم فوق الأرض.
2. إجراء
لجميع الاختبارات، وجلب الفئران إلى الغرفة التجريبية 5-20 دقيقة قبل إجراء الاختبار، للتأكد من أنها مستيقظا تماما. كقاعدة عامة، للسماح للانتعاش من قوة العضلات والعودة إلى مستويات طبيعية من الإثارة، ضع الفئران عن طريق العودة إلى قفص المنزل بعد كل اختبار المحرك. </ P>
2.1 Rotarod
تعيين rotarod مع سرعة بدء من 4 دورة في الدقيقة، ومعدل التسارع 20 دورة في الدقيقة / دقيقة. عقد الماوس من ذيله، ووضعه على قضيب الدورية، التي تواجه بعيدا عن اتجاه دوران لذلك يجب أن السير إلى الأمام على البقاء في وضع مستقيم. هذا هو أسهل أن تفعل إذا تم جلب الفأر يصل نحو قضيب بزاوية 45 درجة أدناه الأفقي؛ سوف محاولة لخفض الماوس من فوق ينتج في انتشاره رجليه الخلفيتين واستيعاب حواف الشفاه. الافراج بسرعة الماوس عندما لمس تقريبا قضيب، فقط إلى الأمام من وفوق قضبان أعلى مركز ميت، مما مكنها من قبضة بسهولة قضيب. A (ربما أسهل وأكثر موثوقية) تقنية هو استخدام رقيقة (10-15 ملم) وتد. عقد الماوس في يد واحدة، خفضه إلى وتد، موازية للمحور طويلة. ومن زاوية وتد مع أسفل الرأس الماوس، حوالي 30 درجة لإعطائها المزيد من الوقت لقبضة rotarod مرة واحدة فإنه يتم تحريرها. خفض الماوس ووتد بين اله الشفاه من rotarod، ومرة واحدة على قضيب الدورية للسحب أسفل وتد بعيدا عن الماوس، والتي سوف فهم قضيب والسير إلى الأمام.
في 10 ثانية بعد وضع الماوس على قضيب، بدء التسارع (طالما الماوس تواجه إلى الأمام: إذا لم يكن كذلك، انتظر حتى أنه لا وجه إلى الأمام قبل بدء تسارع)، ونلاحظ السرعة التي الماوس يقع قبالة. إذا كان يقع قبالة قبل 10 ثانية، لاحظ وقت الخريف والمحاولة مرة أخرى، وتصل إلى ثلاثة مرات في المجموع، وتسجيل سرعة في سقوط الأول بعد نقطة ثانية 10. ومع ذلك، يقع قبل 5 ثوانى التي هي نتيجة لضعف الطرح من قبل المجرب لا ينبغي أن يتم تسجيلها. متوسط السرعة في الخريف هو مسند؛ بدلا من استخدام الحد الأقصى للسرعة، وهذا يصحح لممارسة اضافية الماوس يتلقى خلال أشواط الفاشلة، التي يفترض أن تساعد الأداء. وهكذا ماوس الذي يقع قبل 10 ثانية مرة واحدة ثم يبقى على حتى 12 دورة في الدقيقة عشرات المرة الثانية (4 +12) / 2 = 8 دورة في الدقيقة. فأر السقوط مرتين ثمالبقاء على دورة في الدقيقة لمدة 10 درجات (4 +4 +10) / 3 = 6 دورة في الدقيقة. إذا فشل الماوس لقبضة في 10 ثانية ثلاث مرات تعيينه على درجة من 4 دورة في الدقيقة.
مشكلة واحدة هي أن الفئران وقف أحيانا المشي إلى الأمام وقبضة قضيب بدلا بحزم، بحيث بسلبية شقلبة الجولة، على الرغم من أن تقع معظم نهاية المطاف قبالة. ولذلك قد يكون من المفيد أن نلاحظ أيضا سرعة عند حدوث أول تلك انقلاب. أحد الحلول الممكنة قد يكون استخدام قضيب التي يبلغ قطرها أكبر أو التلال أقل وضوحا.
2.2 قضبان أفقية
كما الفئران تجد أن من الأسهل لفهم ضيق شريط 2 مم، فإنه من المستحسن أن يختبرهم أولا على هذا واحد. عقد الماوس من ذيله، وضعه على مقاعد البدلاء أمام الجهاز، الانزلاق بسرعة الى الوراء حوالي 20 سم (وهذا ينسجم أنه عمودي على شريط)، ورفع بسرعة ودعها فهم الشريط الأفقي في النقطة المركزية مع الأرجل الأمامية فحسب، والافراج عن الذيل، وتبدأ في وقت واحد stopclock. هذا جويكون من الصعب تحقيق كفاءة؛ بعض الفئران قبضة أفضل إذا تم الإفراج عن ذيل فجأة؛ اذا شعروا انهم لا تزال معتمدة أنها قد تفشل في قبضة. نقطة المعيار هو إما سقوط من شريط قبل الماوس تصل إلى واحد من الأعمدة نهاية الشريط، أو الوقت حتى forepaw واحد يمس عمود. وقت اختبار الحد الأقصى (قطع الوقت) هو 30 ثانية.
إذا فشل الماوس لفهم شريط بشكل صحيح أول مرة، ويبدو أن هذا يعزى إلى تقنية المجرب، بدلا من الماوس، حاول مرة أخرى (بعد راحة قصيرة في حين يتم اختبار واحد أو اثنين من الفئران آخر) وعدم تسجيل هذا الخريف. إذا انخفض الماوس قبل 5 ثوانى وهذا على ما يبدو ليس بسبب ضعف الطرح من قبل المجرب، وتكرار ما يصل إلى ثلاث مرات في محاولة للحصول على> 5 ثوانى النتيجة. إذا> 5 ثانية في المحاولة الثانية، لا تفعل محاكمة ثالثة. اتخاذ أفضل النتيجة عندما مسند. A الفأر الذي فشل مرارا وتكرارا لدعم نفسها ل> 5 درجات ثوانى فقط 1.
إذا كان يتم استخدام الإصدار الثلاثي بار، إذا عشرات الماوس 5 على هذا أول شريط 2 مم وعندئذ يمكن اختباره على القضبان أكثر سمكا، وبعد فترة راحة قصيرة في حين يتم اختبار واحد أو اثنين من الفئران آخر. نظام التسجيل لل4 و 6 مم القضبان هو نفس لشريط 2 مم، والنتيجة النهائية هي مجموع المتراكمة. وهكذا ماوس أن عشرات 5 على شريط 2 مم ولكن يسقط من شريط 4 ملم بعد 13 ثانية عشرات 5 +3 = 8.
2.2.1
بتسجيله قضبان أفقية: فترات الأولين هي أقل بكثير من الماضي اثنين مرة واحدة كما الفئران تتقن البداية المهمة أنهم أقل عرضة للسقوط:
الواقعة بين 1-5 ثانية = 1
تقع بين 6-10 ثانية = 2
الواقعة بين 11-20 ثانية = 3
الواقعة بين 21-30 ثانية = 4
السقوط بعد 30 ثانية = 5
وضع forepaw واحد على دعم شريط من دون الوقوع = 5
NB كما الاستخدام الاختياري لل4 و 6 مم القضبان هو إضافة جديدة إلى بروتوكول لدينا أننا لا نملك حتى الآن واسعةتجربة معهم.
2.3 قضبان ثابت
ضع الماوس في نهاية بكثير من أوسع قضيب (طول الأنف طرف رئيس واحد من نهاية مثالية). اتخاذ إجراءين: دوام التوجه (الوقت المستغرق لتوجيه 180 درجة من نقطة الانطلاق نحو الجرف) وعبور الزمن (الوقت الذي يستغرقه السفر إلى نهاية الجرف (الأنف وراء سم علامة 10 من نهاية الرف للقضيب).
التوجه يعتمد على الماوس البقاء تستقيم، وإذا كان يتحول رأسا على عقب ويتمسك تحت قضيب، تعيين تعسفا ذلك (لأغراض إحصائية) النتيجة التوجه الحد الأقصى من 120 ثانية. لا اختبار على قضبان أصغر؛ أيضا على وقت العبور يصبح الحد الأقصى للقيمة مثل الماوس التي تعبر تستقيم ومن الواضح أن أفضل تنسيقا من واحد التي تعبر في حين معلقة على رأسا على عقب.
إذا، بعد توجيه، الماوس يسقط أو أن تصل إلى أقصى وقت الاختبار (ضبط تعسفي في 120 ثانية) لا اختبار على ققضبان maller. للأغراض الإحصائية، يتم تعيين الفئران تعيين هبوط 120 لأن قضيب خاص والمخططات اللاحقة، حيث يفترض أنها ستقع مرة أخرى من قضيب أضيق. إذا كان الماوس يتحول رأسا على عقب، لاحظ أيضا هذا الحدث؛ العبور الناجحة فضلا عن التوجه أنه يجب أن يبقى تستقيم على قضيب. تعيينه الدرجة القصوى خلاف ذلك. إزالة الماوس بعد أن تصل إلى نهاية قضيب أو السقوط.
بعد إجراء تجارب على قضيب واحد عودة الماوس إلى قفص المنزل للراحة أثناء اختبار الماوس آخر. ثم وضعه على حجم المقبل قضيب أصغر واختباره في نفس الطريق مرة أخرى. وقف التجارب إذا كان الماوس يقع قبالة قضيب بعد أن عليه لأكثر من 5 ثوانى. إذا سقطت في أقل من 5 ثوانى يحل محله والسماح محاولة أخرى (كما تقع ضمن 5 ثانية يمكن أن يكون بسبب وضعها الخاطئ من قبل المجرب)، لمدة أقصاها ثلاث محاكمات، واستخدام أفضل نتيجة.
2.4 القضبان المتوازية
ضع الماوس في تيانه مركز من القضبان اثنين مع عمودي على المحور الطولي إلى أن من القضبان، وينبغي أن يكون على حد سواء الجبهة الكفوف على شريط واحد، على حد سواء الكفوف الخلفيتين على شريط الأخرى. التهديف هو مماثلة لتلك التي لقضبان ثابتة. اتخاذ إجراءين: الوقت الذي يستغرقه حتى يوجه الماوس 90 درجة الى موضع بداية، والوقت حتى يصل في وقت لاحق واحدة من يدعم نهاية. إذا كان الماوس يتحول رأسا على عقب، لاحظ أيضا هذا الحدث. أما بالنسبة لقضبان ثابتة يجب أن يتحقق الاختبار، والتوجه والعبور دون أن تحول رأسا على عقب، وإلا تم تخصيص الحد الأقصى للوقت. فمن النادر بالنسبة للفئران سليمة بشكل معقول أن يسقط في أقل من 5 ثوانى، بل إذا كان هذا لا يحدث على الأرجح بسبب ضعف الطرح. وبالتالي تجاهل النتيجة وإعادة اختبار الماوس.
Representative Results
النتائج المتوقعة
أسفر ذلك عن إصابة قضيب ثابت في الأصل تستخدم لرصد التقدم المحرز من مرض هنتنغتون في فئرانا معدلة وراثيا، مع أو من دون تخصيب البيئية في أقفاص وطنهم 14. برنامج تخصيب تأخرت بشكل كبير بداية من محرك اختلال وظيفي على قضيب، والذي توازيه تأخير في ظهور مخلب هند الشبك، علامة العامة للإعاقة للجهاز العصبي.
وأظهرت الفئران المصابة سكرابي انخفاض في الأداء شريط أفقي من الأسبوع 16 بعد الحقن، في اختبار rotarod من الأسبوع 18، وقضبان ثابتة من أسبوع على الأقل 19 8 (لم يتم تنفيذ الاختبار في وقت سابق). تم ضعاف KATP قناة الوحيدات Kir6.2 الفئران KO على قضبان ثابتة وشريط أفقي، ولكن ليس على rotarod 4. كان آفات الحصين أي تأثير على أي قدر من القدرة الحركية 5، ولكن تم ضعاف الفئران 129S2/Sv نسبة إلى C57BL / 6 الضغط على قضبان rotarod وثابت 3. C57Bكان L/10 الفئران أيضا الأداء الحركي أسوأ من C57BL / 6 الفئران 6، وإن لم يكن بنفس القدر كما الفئران 129S2/Sv.
الشكل 1. وrotarod.
الشكل 2. التفاصيل من قضيب مخرش للrotarod.
الشكل (3). أشرطة أفقية ثلاثة أضعاف شريط عقدت في الشقوق هي الأساسية 2 مم واحد؛. علق تحتها (لأغراض العرض التوضيحي فقط) هي مم القضبان 4 و 6. في الممارسة العملية، وفترة زمنية محددة شريط واحد فقط في وقت واحد في الدعم حقق.
الشكل 5. لقد تم حذف A الماوس على المتوازيين. الحشو لأغراض العرض التوضيحي فقط.
Disclosures
المؤلف لا يوجد لديه تضارب المصالح في الكشف عنها.
Acknowledgments
ويلكوم ترست لتوفير التمويل فتح الوصول إلى جامعة أكسفورد. روبرت الشماس هو عضو في مجموعة OXION أكسفورد، الذي تموله ويلكوم ترست منحة WT084655MA.
References
- Barclay, L. L., Gibson, G. E., Blass, J. P. The string test: an early behavioral change in thiamine deficiency. Pharmacol. Biochem. Behav. 14, 153-157 (1981).
- Cain, D. P., Saucier, D., Boon, F. Testing hypotheses of spatial learning: the role of NMDA receptors and NMDA-mediated long-term potentiation. Behav. Brain Res. 84, 179-193 (1997).
- Contet, C., Rawlins, J. N. P., Deacon, R. M. J. A comparison of 129S2/SvHsd and C57BL/6JOlaHsd mice on a test battery assessing sensorimotor, affective and cognitive behaviours: implications for the study of genetically modified mice. Behav. Brain Res. 124, 33-46 (2001).
- Deacon, R. M. J., Brook, R. C., Meyer, D., Haeckel, O., Ashcroft, F. M., Miki, T., Seino, S., Liss, B. Behavioral phenotyping of mice lacking the KATP channel subunit Kir6.2. Physiol. Behav. 87, 723-733 (2006).
- Deacon, R. M. J., Croucher, A., Rawlins, J. N. P. Hippocampal cytotoxic lesion effects on species-typical behaviors in mice. Behav. Brain Res. 132, 203-213 (2002).
- Deacon, R. M. J., Thomas, C. L., Rawlins, J. N. P., Morley, B. J. A comparison of the behavior of C57BL/6 and C57BL/10 mice. Behav. Brain Res. 179, 239-247 (2007).
- Dunham, N. W., Miya, T. S. A note on a simple apparatus for detecting neurological deficit in rats and mice. J. Am. Pharm. Assoc. 46, 208-209 (1957).
- Guenther, K., Deacon, R. M. J., Perry, V. H., Rawlins, J. N. P. Early behavioural changes in scrapie-affected mice and the influence of dapsone. Eur. J. Neurosci. 14, 401-409 (2001).
- Jones, B. J., Roberts, D. J. The quantitative measurement of motor inco-ordination in naive mice using an accelerating rotarod. J. Pharm. Pharmacol. 20, 302-304 (1968).
- Kondziela, W. Eine neue method zur messung der muskularen relaxation bei weissen mausen. Arch. int. Pharmacodyn. 152, 277-2784 (1964).
- Lindsey, J. R., Baker, H. J. Historical foundations. The laboratory rat. Suckow, M. A., Weisbroth, S. H., Franklin, C. L. , 2nd, Elsevier Academic Press. (2006).
- Metz, G. A., Whishaw, I. Q. Cortical and subcortical lesions impair skilled walking in the ladder rung walking test: a new task to evaluate fore- and hindlimb stepping, placing, and co-ordination. J. Neurosci. Met. 15, 169-179 (2002).
- Sigurdsson, E. M., Brown, D. R., Daniels, M., Kascsak, R. J., Kascsak, R., Carp, R., Meeker, H. C., Frangione, B., Wisniewski, T. Immunization Delays the Onset of Prion Disease in Mice. Am. J. Pathol. 161, 13-17 (2002).
- van Dellen, A., Blakemore, C., Deacon, R., York, D., Hannan, A. J. Delaying the onset of Huntington's in mice. Nature. 404, 721-722 (2000).
- Vandeputte, C., Taymans, J. -M., Casteels, C., Coun, F., Ni, Y., Van Laere, K., Baekelandt, V. Automated quantitative gait analysis in animal models of movement disorders. BMC Neuroscience. 11, 92 (2010).
