Hyponeophagia: Fare Anksiyete ölçün

Summary

Doğuştan gelen bir ihtiyatlılık nedeniyle Fare ve sıçanlar, başlangıçta özellikle bir roman, bir roman gıda tüketen yavaş. Bu hyponeophagia kolayca laboratuar hayvanları, vahşi muadillerine göre çok daha az endişeli olmasına rağmen, laboratuarda ölçülür.

Abstract

Günümüze önce, alfa-chloralose olarak hızlı, etkili ve güçlü rodentisitler kullanımı henüz iken, haşere denetleyicileri çalışma sık sık, "yem utangaçlık" olarak bilinen bir fenomen ile sekteye uğramıştı. Fare ve sıçanlar, bu nedenle, ilk olarak yeni maddeler sadece çok az miktarda sindirerek bir strateji geliştirdiklerini potansiyel gıda toksisitesi sorunun üstesinden gelmek için, mide kalp sfinkter gerginlik nedeniyle, kusma olamaz. Sonra yutulur miktarda hayvan güvenli ve besleyici bir madde olup olmadığını tespit etmiştir kadar giderek artar. Yani eski sıçan alıcı ilk yulaf ezmesi gibi musallat alan, toksin araç olarak kabul edilebilir bir madde koymak istiyorsunuz. Daha sonra, büyük miktarlarda kolayca tüketilen Sadece aracın tadı etkilemek için hesaplanan miktarda zehir eklersiniz. Hayvanlar artık kolayca büyük miktarlarda yemek zehirledi yem, sonra hızla işlevi gerçekleştirmek olacaktır.

Bait utangaçlık davranış laboratuar anksiyete ölçmek için bir yol olarak kullanılır. Gibi yeni bir kafes gibi bir roman durumda fareler (veya sıçanlar), tatlı mısır, fındık ya da şekerli koyulaştırılmış süt gibi bir çok lezzetli ama roman bir madde, sunulmaktadır. Yeni gıda tanımlanmış bir miktarda tüketmek için gecikme sonra ölçülür.

Robert MJ Deacon ulaşmak robert.deacon @ psy.ox.ac.uk

Protocol

1. Giriş:

Fare ve sıçanlar, başlangıçta bir roman gıda sadece küçük miktarlarda tüketmek. Kusma yetersizlik nedeniyle zehirlenme sorumlu Bunun nedeni olduğu düşünülmektedir.

Gıda yemiş olan başka bir hayvan daha önce karşılaşılan varsa Bunun tek istisnası; akranları solunan havanın kokusu, güvenli ¹³ olarak sınıflandırmak. Bu yiyecek kokusu diğer sıçan nefes ¹² karbon disülfür ile eşleştirilmiş çünkü. Gerçekten de, karbon disülfit kendisi, fareler ve ^sıçanlar 17 hem de gıda tüketimini artırır . Gıda tercihlerini sosyal fenomen "iletim" olarak adlandırılır ve basit bir koku öğrenme paradigması ²² olarak kullanılabilir. Bu hipokampus ³ lezyonlar için duyarlı olmak, ancak bu bulgu diğer çalışmalarda ⁵ çoğaltmak için başarısız olmuştur. Neokortikal kolinerjik sistem, özellikle orbitofrontal bileşeni ¹⁹ hipokampal kolinerjik sistem sosyal iletimi için daha önemli olabileceği öne sürülmüştür. Sosyal iletim bile muhtemelen azalmış CREB (cAMP yanıt elemanı bağlayıcı protein) yaşlı hipokampus ⁷ iletim aracılığı ile, yaşlı sıçanlarda hafıza bozukluğu izlemek için gösterilen olmuştur.

Kemirgenler, sosyal iletim bir gıda tercihi edinme kolaylığı hyponeophagia testi için güçlü etkileri vardır. Yazar hipokampal Lezyonlu ve kontrol sıçanlarda hyponeophagia testi gerçekleştirirken, o ⁸ test nedeniyle sonraki denetime sıçan kafes içine yanlışlıkla bir test hipokampal sıçan (tatlı mısır yemiş) koydu. 14 sn içinde yedik, sadece kontrol 300 s. bir gecikme değil Bu nedenle, büyük bir özenle yemek kokularını hyponeophagia test sırasında bu tür sosyal bulaşmasını önlemek için alınmalıdır.

İlk hyponeophagia testi, açık, belirgin bir sonuç vermezse, çok sayıda ek testler yapılabilir. Şekil 1-4 değişik cihaz örnekleri göstermektedir. Tasarlanabilir test durumların sayısı sadece deneycideki hayal gücü ile sınırlıdır. Sonuçlar iki yönlü tekrarlayan ölçümler ANOVA ile analiz edilir. Hyponophagia veri genellikle çok değişken olduğu için, çok uzun gecikmeleri veren bazı hayvanların, bir Gauss dağılımı uygun ve genellikle çarpık değil, ilk dönüştürülebilir; karekök veya günlük dönüşüm aşırı uzun gecikmeleri kesiliyor için özellikle yararlıdır.

2. Aparat:

Şekil 1-4 hyponeophagia test set-up örnek olarak sunulmuştur. Şekil 1'de gösterildiği gibi, gıda, tatlı mısır niblet de yerleştirilebilir rağmen tabii ki en iyi sıvı içeren uygun olmasına rağmen, yeni gıdalar ve çevre özel kombinasyonlar, kritik değildir.

Genel olarak, bu cihazların gıda kaplı zemin en iyi bir fikirdir. Sadece hayvanların bu sıradışı yüzey bulmak için caydırıcı görünüyor, bu tekniğin de yiyecek bulma önce keşif nedeniyle boşa ortadan kaldırır. Anksiyojenik değildi çünkü, hareket depresif çünkü, yiyecek bulmak ve yemek gecikme artış nedeniyle Böylece bir yatıştırıcı ilaç anksiyojenik görünebilir. Örneğin, bir yayın merkezinde bir açık alan ² yemek koymak tavsiye etti. Sadece bu sonucu keşif zaman eleştirilmiştir olmak besleme gecikme, aynı zamanda, anksiyete, yani açık alan merkezi bir bölgede kaçınma ek bir faset, predasyon riskini önlemek için ilgili açık alan aracılı anksiyete, klasik bir önlem tanıttı. doğal habitatları ^14. Ancak, bazı durumlarda bu aslında deney istenen bir özellik olabilir. ² açıklanan deney diğer dezavantajı, yem merkezinde açık alanda standart laboratuar yemi olduğunu oldu . Bu roman değil, tatlı mısır veya tatlandırılmış yoğunlaştırılmış süt gibi gıdalar da aksine, son derece makbul değildir çift bir dezavantajı vardır . Bu açıdan, sadece hafif bir yoksunluk gereklidir; Biz her zaman aşırı lezzeti yemler kullanarak sadece roman yemek yemek ya da önlemek için üzerine çatışma artar, ama aynı zamanda hayvanların aşırı gıda test öncesi yoksun olması gerekmez bulduk Burada sunulan protokollerin Russell ve Burch ²⁰ 3RS "Sadeleştirme" yönü ^yansıtır.

2.1 Prosedür:

Gecede farelerin yiyecek Rasyon. Kafes hunisi gıda çıkarın sonra normalde ne yemek olur yaklaşık üçüncü sıradan diyet 1 g / fare, vermek test etmeden önce akşam. Böyle bir durumda ev sahipliği grup parçaları tüm fareler eşit hisselerle yiyebilirsiniz böylece küçük olduğundan emin olun. Bunları testsabah ve en kısa sürede test bittikten sonraki gıda yerine.

Da seçilen hyponeophagia test aparatı, grup evde kafes farelerde test öncesi ve sırasında tek tek yerleştirilir küçük kafeslerde bir satır yukarı ayarlayın. (Bu, aşamalı olarak bir grup, aynı zamanda gıda tercihleri ​​sosyal iletim fareler kaldırırsanız oluşabilir grup kafesinin sol kalan farelerde anksiyete artışı önler. Aynı zamanda grup ve tek başına ev sahipliği hayvanlar arasında test standardizasyonuna yardımcı ve hayvanların optimal uyarı olmasını sağlar.

Test aparatı bir fare yerleştirin. Yemek için gecikme ölçün. Bu 2-3 için sürekli yeme / içme olarak tanımlanan s Genellikle farelerin sniff veya yalamak ilk başta gıda kısaca, ancak daha sonra sadece inhibisyonu olmadan sürekli yemeye başlar.

Diğer tedbirler de alınabilir. Da ölçülebilir, zaman da muhtemelen ilk başladığında beslenmeden sonra örneğin 2 dk, ve bu dönemde tüketilen gıda miktarı, belirli bir süre boyunca yeme geçirdi. Beyin lezyonları bazen bu farklı ⁴ önlemler etkiler.

2.2 aparatı ile Şekil 1'de gösterildiği gibi bir hyponeophagia testi çalışan özel ayrıntıları:

Saydam bir plastik sürahi (yaklaşık hacmi 1.5 lt, 15 cm çapında bir emzik 2 cm daha çıkıntılı) test aparatı. Tam kremi kullanın (Nestle Karanfil markası mükemmel) roman gıda olarak su (işleme kolaylaştırmak için) ile seyreltilmiş 50:50 yoğunlaştırılmış süt şekerli içecekler. Tabanı üzerinde fare içerir ve süt soruşturma kolaylaştırmak için, emzik iyi gıda üzerinde küçük bir oyuk oluşturarak sürahi ile baş aşağı yerleştirin. Bu algı etkileyebilecek tedaviler, ya da için oryantasyon, besin kaynağı en aza indirmek, iyi ve süt fare dikkat odaklanır.

Fare iyi uzak bakan yerleştirilir ve sürahi yavaşça, fare kuyruğu özen, pozisyon içine indirdi. Cihazın düzgün içmeye konuyor gecikme alınır. Süt bayılmadım sayılmaz; en az iki saniye içme gerçekleşmesi gereken. Herhangi bir dışkı boli sayın ve herhangi bir idrara çıkma not (ancak bu önlemler aparatında zaman etkilenmiştir olacağını unutmayın). Cut-off süresi 2 dk. Bir fare o sarhoş değilse, cihazın çıkarın ve başka bir ya da iki fare testi, daha sonra daha sonra 3 dk içmek için başarısız bir yeniden test edin. Bu sefer alete alışma bir devlet hala korurken azaltmak için muhtemelen anksiyete düzeyleri için en uygunudur. Bu test-dinlenme-tekrar test-dinlenme-tekrar test döngüsü fare yiyor veya bir dizi sayıda denemeler yapılmıştır kadar devam edilebilir. Çok uzun deney yapmadan içme en farelerde maksimum 3 çalışmaların sonuçlanması gerekiyor. Test parametresi içmek (kümülatif) gecikme.

Olmayan deneysel fareler koku önemli bir rol oynayabilir diğer testlerde olduğu gibi, test başlamadan önce cihazın yerleştirilmiş olmalıdır. Tüm fareler arasında standart bir temizlik protokolü uygulayın. , Idrar / dışkı çıkarın gıda silin ve plastik taban ile nemli bez / doku kuru takip. Süt dolum gıda (yaklaşık 0.2 ml, iyi jant).

Şekil 1. Bir plastik iç sürahi bir hyponeophagia test birimi olarak kullanmak için dönüştürülür. Rahatlıkla düz fare dikkatini yönlendirir emzik içinde bulunan küçük bir gıda, şekerli koyulaştırılmış süt yerleştirilebilir. Sürahi ters tabanına yapıştırılmış kurşun ağırlık, duvarlar karşı fare herhangi bir harekete karşı stabilize etmek için yardımcı olur.

Şekil 2'de iki beyaz (anksiyete kışkırtan) hyponeophagia test etmek için beyaz ekler içeren bir gözlem odası. Tatlı mısır roman gıda olarak kullanılabilir.

Şekil 3. Başka bir hyponeophagia test ünitesi . Romanın gıda maymun tedavi karışımıdır.

Şekil 4. Başka bir hyponeophagia test ünitesi . Sunulan gıda karışık doğranmış fındık.

3. Birden fazla hyponophagia deneyler Koşu:

İlk hyponeophagia testi, kesin bir sonuç sağlamaz. Bu sık sık olur ve tavan veya taban etkileri sonucu, sık sık yüksek veya çok düşük bazal (kontrol) değerleri nedeniyle. Hipokampal Lezyonlu fareler ¹⁰ test Kat etkileri ile karşılaşıldı; kontrol değeri bazı gözlemcilere için yeterince yüksek olduğu ortaya çıktıe hyponeophagia azalttı.

Bu test durumun gerekli kaçınmayla yargılamak için zor olabilir. Fareler (anksiyete ilgili görevler ille) zaten birkaç kez test edilmiş varsa onların duygusal düzeyde davranış testleri ve daha anksiyojenik bir test gerekli olacak ve na daha düşük olacaktır. Bu genellikle yüksek bir test ortamı (Şekil 4) tarafından sağlanabilir. Caydırıcı gürültü test durum, örneğin, gürültülü bir ses ya da beyaz bir gürültü jeneratör çalan bir radyo eklenebilir. Parlak ışık da test ortamında kaçınmayla artıracaktır.

Yani, eğer ilk hyponeophagia sonucu önemli değildir, çok daha fazla testi durumlarda denemek ve tekrarlayan ölçümlerde ANOVA gerçekleştirmek. Bu çok güçlü bir deneysel tasarım.

4. Beklenen sonuçlar:

Hipokampal lezyonlar fareler ¹⁰ hyponeophagia güçlü bir azalma üretmek ve son yayınlanmamış çalışma, bu gibi sıçan ^1, hipokampus ventral bölgeye bağlı olduğunu göstermiştir. ^9, kafa karıştırıcı bir sonuç değil bir test ortamında farklılıklar sonuç üzerinde belirgin bir etkisi olabilir vurgu hizmet vermektedir KATP kanal altbirim Kir6.2 eksik Fare bir test ama daha az hyponeophagia artmış, hem de kullanışlılığı dikkat çekiyor gösterdi Birden fazla testler. 129S2/SvHsd fareler daha C57BL/6JolaHsd ⁶ hyponeophagic. Gerçekten de, birkaç kendilenmiş fare suşlarının bir karşılaştırma işaretlenmiş arası gerilim farklılıkları ²¹ gösterdi.

Discussion

Hyponeophagia test gecikme rakamlar genellikle oldukça değişkendir. Bu teknik, daha sonra yemek için başarısız olursa yeniden test yemek için hayvan için ayarlanmış bir süre heybetli, burada açıklanan ultra-uzun gecikmeleri riskini en aza indirmek ve deneyci zaman kazandırır hizmet vermektedir.

Hyponeophagia bir avantajı, artı-labirent gibi anksiyete testleri üzerinde, ilk test sonuçları istatistiksel olarak anlamlı elde etmek için başarısız olursa, başka bir test ölçülen anksiyete türü olarak, farklı bir roman test ortamı ve gıda kullanarak çalıştırmak için artı-labirent ¹⁶ aksine, daha önce testleri ile aynı ve niteliksel değişmedi görünür. Tekrarlanan ölçümler ANOVA sonra test serisi değerlendirmek için kullanılabilir.

Artık duygusallık birkaç farklı yönlerini terimdir "anksiyete" ^11,15,18 ile kaplı olduğu bilinmektedir. Hyponeophagia değişiklikler gösteren Fare mutlaka yükseltilmiş artı labirent açık alan değişiklikleri, ya da ışık-karanlık kutu testleri göstermeyecektir. Yani bu testler performans altında yatan beyin sistemleri, en azından biraz farklı olmalı. Örneğin, hipotalamus ve amigdala hyponeophagia gıda alımının düzenlenmesi (diğer şeylerin yanı sıra) ile ilgili olarak katılabilirler.