Summary
Micro-dissection du cerveau de rat dans différentes régions est extrêmement important pour l'étude de différentes maladies neurodégénératives. Cette vidéo montre des micro-dissection des quatre régions du cerveau majeurs comprennent bulbe olfactif, le cortex frontal, le striatum et l'hippocampe dans les tissus de cerveau de rat frais. Conseils utiles pour un retrait rapide des régions respectives afin d'éviter la dégradation de l'ARN et des protéines du tissu sont donnés.
Abstract
Micro-dissection du cerveau de rat dans différentes régions est extrêmement important pour l'étude de différentes maladies neurodégénératives. Cette vidéo montre des micro-dissection des quatre régions du cerveau majeurs comprennent bulbe olfactif, le cortex frontal, le striatum et l'hippocampe dans les tissus de cerveau de rat frais. Conseils utiles pour un retrait rapide des régions respectives afin d'éviter la dégradation de l'ARN et des protéines du tissu sont donnés.
Protocol
Etape 1
Sacrifice du rat selon des protocoles établis. Enlever le cerveau du crâne et de le rincer dans de la glace froide DEPC traitées eau Milli Q pour enlever toute trace de sang de surface.
Etape 2
Placer sur une plaque de métal froid. Couper le cerveau bi-moitié dans l'hémisphère droit et gauche. 
Figure 1. Les positions de coupe de la vue médiale de l'hémisphère rat
Étape 3
Recueillir le bulbe olfactif à droite après la première coupe. Flash geler l'échantillon dans l'azote liquide et conserver à -80 ° C. 
Figure 2. Dissection bulbe olfactif
Etape 4
Recueillir le droit cortex frontal après la deuxième coupe, en utilisant une lame et une Dumont n ° 5 forceps. Flash geler l'échantillon dans l'azote liquide et conserver à -80 ° C. 
Figure 3. Frontale du cortex de dissection
Etape 5
Recueillir le striatum (noyau caudé) juste après la troisième coupe à l'aide de deux pinces No.5 Dumont. Flash geler l'échantillon dans l'azote liquide et conserver à -80 ° C. 
Figure 4. Striatum (noyau caudé) la dissection
Etape 6
Pour recueillir l'hippocampe, placez la face ventrale du cerveau et puis retirez du mésencéphale pour exposer l'hippocampe. Disséquer l'hippocampe du cortex en utilisant deux pinces Dumont n ° 5. Flash geler l'échantillon dans l'azote liquide et conserver à -80 ° C. 
Figure 5. Dissection Hippocampus
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Discussion
Différentes régions du cerveau associée aux différentes maladies neurodégénératives. Par exemple, le cortex frontal et le striatum se rapportent à la maladie de Parkinson alors hippocampe concerne la maladie d'Alzheimer. Précis de micro-dissection du cerveau nous permet de détecter les changements ARNm et la protéine dans la région de malades avec plus de précision.
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Disclosures
Les animaux ont été traités selon le protocole pour l'utilisation des animaux dans la recherche approuvée par le Comité sur l'utilisation d'animaux vivants dans l'enseignement et la recherche (CULATR) à l'Université de Hong Kong et selon le National Institutes of Health des lignes directrices pour l'utilisation des animaux.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Microscope | Olympus Corporation | ||
| Dissection tools | Metal plate, forceps, blade, etc. Individually wrapped with aluminum foil and heated at 180oC for eight hours to eliminate RNase. Made ice cold before use. |
References
- Palkovits, M. Maps and guide to micro-dissection of the rat brain. , Elsevier. New York. (c.1988).
- Swanson, L. W. Brain maps: structure of the rat brain. 3rd revised edition. , Elsevier Academic Press. (2004).
