Summary
Микро-рассечение мозга крыс в различных регионах является чрезвычайно важным для изучения различных нейродегенеративных заболеваний. Это видео демонстрирует микро-рассечение из четырех основных областей мозга включают обонятельной луковице, лобной коре, стриатуме и гиппокампе в свежей ткани мозга крысы. Полезные советы для быстрого удаления соответствующих регионов, чтобы избежать РНК и белка деградация ткани даны.
Abstract
Микро-рассечение мозга крыс в различных регионах является чрезвычайно важным для изучения различных нейродегенеративных заболеваний. Это видео демонстрирует микро-рассечение из четырех основных областей мозга включают обонятельной луковице, лобной коре, стриатуме и гиппокампе в свежей ткани мозга крысы. Полезные советы для быстрого удаления соответствующих регионов, чтобы избежать РНК и белка деградация ткани даны.
Protocol
Шаг 1
Жертва крысы в соответствии с установленными протоколами. Удалить мозг от черепа и промойте его в ледяной DEPC рассматриваться Милли Q водой, чтобы удалить любой поверхности крови.
Шаг 2
Место на холодную металлическую пластину. Вырезать мозга би половину на правую и левого полушария. 
Рисунок 1. Резка позиции от медиальной зрения крысы полушарии
Шаг 3
Сбор обонятельной луковицы сразу после первого разреза. Flash Freeze образца в жидком азоте и хранят при температуре -80 ° C. 
Рисунок 2. Обонятельные вскрытия лампы
Шаг 4
Сбор фронтальной коры права после второй разрез, используя лезвие и Дюмон № 5 щипцами. Flash Freeze образца в жидком азоте и хранят при температуре -80 ° C. 
Рисунок 3. Фронтальная рассечение коры
Шаг 5
Сбор полосатом теле (хвостатое ядро) сразу после третьего вырезать с помощью двух Дюмон щипцы № 5. Flash Freeze образца в жидком азоте и хранят при температуре -80 ° C. 
Рисунок 4. Стриатум (хвостатое ядро) рассечение
Шаг 6
Для сбора гиппокампе, положить брюшной стороне мозга, а потом удалить мозга подвергать гиппокампе. Рассеките гиппокампа от коры головного мозга с помощью двух Дюмон № 5 щипцами. Flash Freeze образца в жидком азоте и хранят при температуре -80 ° C. 
Рисунок 5. Гиппокамп рассечение
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
Различные области мозга ассоциируются с различными нейродегенеративными заболеваниями. Например, лобной коре и полосатом теле связаны с болезнью Паркинсона в то время как гиппокамп связан с болезнью Альцгеймера. Точное микро-рассечение мозга позволяет нам обнаружить мРНК и белка изменения в пораженной зоне более точно.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Disclosures
Животных были обработаны в соответствии с протоколом для использования животных в исследованиях утвержденной Комитетом по использованию живых животных в области преподавания и исследований (CULATR) в Университете Гонконга и в соответствии с Национальными Институтами Здоровья руководящие принципы для использования животных.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Microscope | Olympus Corporation | ||
| Dissection tools | Metal plate, forceps, blade, etc. Individually wrapped with aluminum foil and heated at 180oC for eight hours to eliminate RNase. Made ice cold before use. |
References
- Palkovits, M. Maps and guide to micro-dissection of the rat brain. , Elsevier. New York. (c.1988).
- Swanson, L. W. Brain maps: structure of the rat brain. 3rd revised edition. , Elsevier Academic Press. (2004).
