Waiting
Login processing...

Trial ends in Request Full Access Tell Your Colleague About Jove
Click here for the English version

Biology

Microwave-assisted En pott Syntes av N-Succinimidyl-4-[ 18 F] fluorobenzoate ([ 18 F] SFB)

Published: June 28, 2011 doi: 10.3791/2755
* These authors contributed equally

Summary

En lättköpt, ett-gryta syntes av N-succinimidyl-4-[

Abstract

Biomolekyler, inklusive peptider, 1-9 proteiner, 10,11 och antikroppar och deras konstruerad fragment, är 12-14 allt viktigare både som potentiella läkemedel och molekylär agenter avbildning. Särskilt när de märkta med positron-emitting radioisotoper (t.ex. Cu-64, Ga-68 eller F-18), kan de användas som sonder för riktad avbildning av många fysiologiska och patologiska processer. 15-18 därför stora ansträngningar har ägnas åt syntes och utforskning av 18 F-märkt biomolekyler. Även om det finns eleganta exempel på direkt 18 F-märkning av peptider, 19-22 den hårda reaktionen förhållanden (dvs organiskt lösningsmedel, extrema pH, hög temperatur) i samband med direkt radiofluorination är vanligtvis oförenliga med sköra protein prover. Hittills är därför fortfarande införlivandet av radioaktivt märkt protes grupper i biomolekyler den metod som föredras. 23,24

N-Succinimidyl-4-[18 F] fluorobenzoate ([18 F] SFB), 25-37 en Bolton-Hunter typ reagens som reagerar med det primära amino grupper av biomolekyler, är en mycket mångsidig protes grupp för 18 F-märkning av ett brett spektrum av biologiska enheter, i termer av dess tydliga in vivo-stabilitet och hög radioaktiv inmärkning avkastning. Efter märkning med [18 F] SFB, den resulterande [18 F] fluorobenzoylated biomolekyler kan man utreda möjligheterna PET-spårämnen för in vivo imaging studier. 1 De flesta [18 F] SFB radiosyntheses beskrivs i den aktuella litteraturen kräver två eller tre reaktorer och flera reningar genom att använda antingen fast fas extraktion (SPE) eller högpresterande vätskekromatografi (HPLC). Sådana långa processer hämmar sin rutin produktion och omfattande program i radioaktiv inmärkning av biomolekyler. Trots att flera module-stöd [18 F] SFB synteser har rapporterats, 29-32, 41-42 de är huvudsakligen baserade på komplicerade och långa processer med hjälp av dyra kommersiellt tillgänglig radiokemi boxar (tabell 1). Därför är ytterligare förenkling av radiosynthesis av [18 C] SFB med en billig installation skulle vara mycket fördelaktigt för sin anpassning till en automatiserad process.

Häri rapporterar vi en kortfattad framställning av [18 C] SFB, bygger på en förenklad ett-gryta mikrovågs-assisterad syntes (figur 1). Vårt arbetssätt kräver inte rening mellan stegen eller vattenlösningar reagenser. Dessutom, mikrovågsugn bestrålning, som har använts i synteser av flera PET spårämnen, kan 38-41 ger högre RCYs och bättre selektivitet än motsvarande termiska reaktioner eller att de ger liknande avkastning i kortare reaktionstider. 38 Viktigast när märkningen biomolekyler kunde Tidsbesparingen vidarekopplas till efterföljande bioconjugation eller PET imaging steg 28,43 Det nya i vår förbättrade [18 F] SFB syntes är tvåfaldigt: (1). vattenfri deprotection strategin kräver ingen rening av mellanliggande (s) mellan varje steg och (2) mikrovågsugnen-assisted radiokemiska transformationer möjliggöra snabb och pålitlig produktion av [18 F] SFB.

Protocol

1. Inledande förberedelser

  1. En V-flaska (5-mL) RV1 (med omrörning bar) används som den huvudsakliga reaktionen fartyget för att utföra mikrovågssyntes. Den är ansluten till en PEEK-adapter med sju / utlopp portar ansluter och placeras inne i mikrovågsugnen hålighet (se figur 2). RV2 är ansluten till SPE patron (I) för att samla rå [18 F] SFB. RV3 är ansluten till SPE patron (II) för att samla in de sista [18 F] SFB lösning. Den kan placeras i ett varmt vattenbad (40 ° C) för att koncentrera sig motsvarande lösning innan beredning i PBS-buffert, speciellt för nedströms radioaktiv inmärkning av biomolekyler.
  2. Inställning för att samla rå [18 F] SFB: Fyll MeCN / H 2 O [6 ml, 1:4 (v: v)] lösning, 5% vattenlösning AcOH (8 ml), MeCN (2 ml) för reservoar A, B och C, respektive. Sedan aktivera ett SPE patron (I) (polystyren, Merck LiCholut EN) med etanol (10 ml), följt av 5% vattenlösning AcOH (10 ml) tvätt.
  3. Inställning för att samla in renat [18 F] SFB: Förbered reservoar D och E fylld med 10 ml H 2 O och 3 ml dietyleter respektive. Den andra SPE patron (II) (polystyren, Merck LiCholut SV) aktiveras av samma förfarande som nämns ovan.
  4. Starta HPLC (elueringen buffert: MeCN / H 2 O, 1:1 (v / v) som innehåller 0,2% TFA, flöde: 3 ml / min) för pre-condition i HPLC-kolonnen [en omvänd-fas semi-prep kolumnen (Luna, 5 ìm C18 (2) 100 A, 250 x 10 mm), Phenomenex, Torrance, CA, USA].

2. Förberedelse av torkade [dvs icke-bärare läggs-, (NCA)] [18 F] fluor

  1. [18 F] fluor lösning [18 O] H 2 O (100 mikroliter) lades till en blandning av Kryptofix 222 (20 mg), 1M vattenlösningar K 2 CO 3 (26 mikroliter) och MeCN (0,8 ml) i ett Eppendorf röret. Hela lösningen är sedan blandas väl innan de överförs till RV1 via inloppet linje 1. Den [18 F] fluor lösning kan också passerat genom en anjonbytar patron (t.ex. QMA ljus september-Pak från vatten) för att fånga fluor-18 och därefter elueras ut med en blandning av K 2 CO 3 och Kryptofix i MeCN.
  2. Utför Torkning sekvensen (20W, 3 min) under Microwave kontrollprogram för att avlägsna rester av vatten i RV1 [under vakuum]. Efter nedkylning som system temperaturen är under 50 ° C, extra MeCN (1,0 ml) infördes i reaktorn och sekvensen upprepas en gång.

3. Syntes av etyl 4 - [18 F] fluorobenzoate

  1. Till en DMSO-lösning (0,4 ml) innehåller etyl 4 - (N, N, N-trimetylammonium) bensoat triflate (1,5 mg) har lagts in RV1 via inloppet linje 2.
  2. Kör märkning sekvensen (50W, 1 min) under Microwave kontrollprogram omrörning, fartyg kylning och alla ventiler stängda råd med etyl 4 - [18 F] fluorobenzoate ([18 F] 2).

4. Syntes av kalium 4 - [18 F] fluorobenzoate

  1. Till en DMSO-lösning (0,5 ml) innehåller KOtBu (13 mg) lades in RV1 via inloppet linje 3.
  2. Kör Deprotect programmet (40 W, 1 min) under Microwave kontrollprogram omrörning, fartyg kylning och alla ventiler stängda råd med 4 - [18 F] fluorobenzoate salt ([18 F] 3).

5. Syntes av råolja [18 F] SFB

  1. För att en acetonitril-lösning (2,5 ml) innehåller TSTU (30 mg) inkom RV1 via inlopp linje 6. TSTU är fukt-och ljuskänsliga. Det bör alikvoteras i små flaskan och lagras vid 4 ° C i en sluten behållare som omfattas av aluminiumfolie.
  2. Kör Koppling sekvens (30W, 2 min) under Microwave kontrollprogram omrörning, fartyg kylning och alla ventiler stängda råd med råolja [18 F] SFB.

6. Beredningen av SPE-renat [18 F] SFB

  1. 5% vattenlösning AcOH (1,0 ml) inkom RV1 via inloppet linje 7 för att neutralisera reaktionsblandningen. Lösningen var då över till flaska B innehåller 8 ml 5% vattenlösning AcOH (figur 2).
  2. Passera den utspädda reaktionsblandningen genom SPE patron (I) att fånga råolja [18 F] SFB med kväve (10 psi).
  3. WASH SPE patron (I) med en blandning av MeCN och H 2 O [10 ml, 1:4 (v: v)] från reservoaren A.
  4. [18 F] SFB var elueras ut i RV2 med MeCN (2 ml) från reservoaren C.

7. Rening av råolja [18 F] SFB med Radio-HPLC

  1. Späd antingen rå [18 F] SFB eller SPE-renat [18 F] SFB med H 2 O (2 ml) i RV2 och för över blandningen i HPLC-slingan (5 ml). Den lösningen var injiceras i radio-HPLC [MeCN / H 2 O, 1:1 (v / v) som innehåller 0,2% TFA, flöde: 3 ml / min].
  2. Samla den fraktion som innehåller renade [18 F] SFB (retention timE: 8-10 minuter) in i injektionsflaskan D (förfylld med 10 ml H 2 O) (Figur 2). Kritiska steg: om det utförs korrekt, bör andelen volymer samlas här vara 4-5 ml.
  3. Passera den utspädda reaktionsblandningen genom SPE patron (II) för att fånga renat [18 F] SFB med kväve (10 psi). Torka kassetten med en ström av kväve i 2-3 minuter.
  4. [18 F] SFB var elueras ut i RV3 med dietyleter (3 ml) från reservoaren E..
  5. Låt lösningsmedlet avdunsta i RV3 till torrhet genom en mjuk ström av kvävgas (10 psi) med hjälp av ett vattenbad (40 ° C). Den slutliga torkade [18 F] SFB kan beredas i PBS-buffert för nedströms ansökan.

8. Representativa resultat:

Vi utvecklade en förenklad, snabb, en-gryta metod för att syntetisera [18 F] SFB med en deprotection strategi inom vattenfri förhållanden och mikrovågsvärmning under varje radiokemiska / kemisk omvandling. Figur 1 visar detaljerna i vårt radiosynthesis. Identiteten på slutprodukten bekräftades genom jämförelse av HPLC retentionstiden med en icke-radioaktiva SFB referens. Det renade [18 F] SFB analyserades även via radio-TLC och HPLC för att bestämma dess radiokemiska och kemiska renhet. Den RCY av [18 C] SFB var 35 ± 5% inom 60 min efter HPLC-rening (n> 30), med hög radiokemiska renhet (> 99%) och god kemisk renhet (se UV-spår i HPLC-profil, figur 3 ). Den specifika aktiviteten var ca. 67-330 GBq / mikromol (1,8-9,0 Ci / mikromol), beroende på vilket radioaktivitet.

Figur 1
Figur 1. Microwave-assisted ett-gryta radiosynthesis av [18 F] SFB. För det första radiofluorination av etyl 4 - var (N, N, N-trimetylammonium) bensoat triflate (1) som utförs under mikrovågsvärmning (50 W, 1 min) i närvaro av [K ⊃ 2.2.2] [18 F] F - komplex i dimetylsulfoxid (DMSO) råd etyl 4 - [18 F] fluorobenzoate ([18 F] 2). Utan rening, var en DMSO lösning av kalium-tert-butoxid (t BuOK) tillsätts och reaktionen fartyget mikrovågsugn bestrålad (40 W, 1 min) för att slutföra vattenfri deprotection. Den slutliga omvandlingen av [18 C] 3 i [18 F] SFB uppnåddes med hjälp av O-(N-succinimidyl) - N, N, N ', N'-tetramethyluronium tetrafluoroborate (TSTU) aktivering. TSTU i acetonitril lades till reaktionsblandningen innehåller 4 - [18 F] fluorobenzoate ([18 F] 3) salt, detta sista syntetiska steget gav råolja [18 F] SFB efter uppvärmning (30 W, 2 min).

Figur 2
Figur 2. Schematiskt setup för mikrovågs-assisterad ett-gryta [18 F] SFB syntes.

Figur 3
Figur 3. Radio-HPL kromatogram av slutlig [18 F] SFB. Top: UV-signal vid 254 nm, botten: radioaktiva signal; infälld: UV-signal på 254 nm (x 33,3).

Tabell 1
. Tabell 1 Sammanfattning av [18 C] SFB radiosyntheses rapporterats i litteraturen med hjälp av alkyl 4 - (trimetylammonium) bensoat triflate som prekursorer.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Discussion

Detta förenklade tre steg, ett-gryta radiosynthesis av 18 F-Acylation reagens [18 F] SFB är utvecklat bygger på icke vattenhaltigt kemi. Denna process har utmärkt reproducerbarhet och kan användas säkert för produktion av [18 F] SFB i automatiserad radiokemi moduler på grund av två viktiga ändringar som beskrivs som följande sätt: 1. Vi anställer en deprotection / förtvålning steg i vattenfri KOtBu / DMSO-system för att ersätta den gemensamma vattenlösning grundläggande eller sur lösning. Vår icke vattenhaltigt deprotection strategi möjliggör sekventiell tillsats av reagenser utan mellanliggande SPE rening eller lösningsmedelsavdunstning / utbyte. Denna ändring eliminerar behovet av ett betydande antal extra komponenter och styrenheter i samband med en andra reaktor och moduler SPE som har krävts i andra syntetiska rutter. Därför minskar systemets komplexitet och samtidigt öka dess tillförlitlighet. Vår process kan utföras i en enkel manuell inställning eller i en automatiserad radiokemi modul som har en grundläggande enda reaktor konfiguration. Dessutom förkortar eliminering av SPE rening (er) mellan steg den totala syntesen tiden. 2. Användningen av mikrovågsvärmning möjliggör också en snabb, tillförlitlig produktion av [18 F] SFB (se tabell 1 för jämförelse med andra metoder). Vi tillämpar mikrovågor i varje steg under denna en-potten [18 F] SFB syntes: F-18 torkning, radiofluorination, deprotection och aktivering. Som framgår av Figur 1 var varje omvandling klar inom 1-2 min under mikrovågsvärmning, i jämförelse, det i allmänhet kräver 5 - 10 minuter vid användning av konventionella resistiv värmning (t.ex. oljebad eller värmare block) 29-32, 41 -. 42

Med en betydande minskning av sin totala komplexitet, tror vi att denna förbättras och kortfattad sammanfattande kommer att göra rutinmässiga produktionen av [18 C] SFB mer praktiska och attraktiva för antagande i automatiserad moduler, möjliggör användning av 18 F-märkt biomolekyler 43 som forskning verktyg för att påskynda biomedicinska upptäckter och förbättra kliniska studier.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Disclosures

Denna metod har skickats för amerikanska patentansökningar.

Acknowledgments

Denna studie stöddes av US Department of Energy (DE-FG02-09ER09-08 och DE-PS02-09ER09-18), i Jonsson Comprehensive Cancer Center vid UCLA, och den industri-universitetet Cooperative Research Program (UC Discovery Grant, bio07 -10.665). Vi tackar Dr Nagichettiar Satyamurthy och staber vid UCLA Biomedicinska Cyclotron Facility för att tillhandahålla F-18 radioisotoper och många diskussioner insiktsfulla. Vi tackar Dr. Michael Collins, Greg Leblanc, Joseph Lambert, och Keller Barnhardt från CEM för teknisk rådgivning och stöd. Vi tackar Dirk Williams, Darin Williams, Dr. Joseph Hong Dun Lin, och Michael van Dam för att designa och bearbetning av detaljer att ändra CEM mikrovågsugn reaktorn och för SPE rening moduler.

Materials

Name Company Catalog Number Comments
acetic acid in aqueous solution (5%, v/v) Fisher Scientific A38-500 Prepared in our lab
Acetonitrile Sigma-Aldrich 75-05-8
Diethyl ether Sigma-Aldrich 14775
Dimethyl Sulfoxide (DMSO) Sigma-Aldrich 472301
Ethyl 4-(N,N,N-trimethylammonium) benzoate triflate Prepared in Lab
4,7,13,16,21,24-Hexaoxa-1,10-diazabicyclo[8.8.8]hexacosane (K222) Sigma-Aldrich 29,111-0
O-(N-succinimidyl)-N,N,N’,N’-tetramethyluronium tetrafluoroborate (TSTU) Sigma-Aldrich 105832-38-0
Potassium carbonate in aqueous solution (1M) Sigma-Aldrich 209619 Prepared in our lab
Potassium tert-butoxide Sigma-Aldrich 156671

DOWNLOAD MATERIALS LIST

References

  1. Okarvi, S. M. Recent progress in fluorine-18 labeled peptide radiopharmaceuticals. Eur. J. Nucl. Med. 28, 929-938 (2001).
  2. Chen, X. Y., Park, R., Hou, Y. P., Khankaldyyan, V., Gonzales-Gomez, I., Tohme, M., Bading, J. R., Laug, W. E., Conti, P. S. MicroPET imaging of brain tumor angiogenesis with 18F-labeled PEGylated RGD peptide. Eur. J. Nucl. Med. Mol. Imaging. 31, 1081-1089 (2004).
  3. Wu, Z., Li, Z. -B., Chen, K., Cai, W., He, L., Chin, F. T., Li, F., Chen, X. MicroPET of tumor integrin αvβ3 expression using 18F-labeled PEGylated tetrameric RGD peptide. J. Nucl. Med. 49, 1536-1544 (2007).
  4. Cheng, D., Yin, D., Zhang, L., Li, G., Wang, M., Li, S., Zheng, M., Cai, H., Wang, Y. Radiolabeling and in vitro and in vivo characterization of [18F]FB-[R8,15,21, L17]-VIP as a PET imaging agent for tumor over-expressed VIP receptors. Chem. Biol. Drug Des. 68, 319-325 (2006).
  5. Cheng, D., Yin, D., Zhang, L., Wang, M., Li, G., Wang, Y. Preparation of the novel fluorine-18-labeled VIP analog for PET imaging studies using two different synthesis methods. J. Fluorine Chem. 128, 196-201 (2007).
  6. Fredriksson, A., Johnstroem, P., Stone-Elander, S., Jonasson, P., Nygren, P. -A., Ekberg, K., Johansson, B. -L., Wahren, J. Labeling of human C-peptide by conjugation with N-succinimidyl-4-[18F]fluorobenzoate. J. Label. Compd. Radiopharm. 44, 509-519 (2001).
  7. Bergmann, R., Scheunemann, M., Heichert, C., Mäding, P., Wittrisch, H., Kretzschmar, M., Rodig, H., Tourwe, D., Iterbeke, K., Chavatte, K. Biodistribution and catabolism of 18F-labeled neurotensin(8-13) analogs. Nucl. Med. Biol. 29, 61-72 (2002).
  8. Guenther, K. J., Yoganathan, S., Garofalo, R., Kawabata, T., Strack, T., Labiris, R., Dolovich, M., Chirakal, R., Valliant, J. F. Synthesis and in vitro evaluation of 18F- and 19F-labeled insulin: a new radiotracer for PET-based molecular imaging studies. J. Med. Chem. 49, 1466-1474 (2006).
  9. Zhang, X., Cai, W., Cao, F., Schreibmann, E., Wu, Y., Wu, J. C., Xing, L., Chen, X. 18F-labeled bombesin analogs for targeting GRP receptor-expressing prostate cancer. J. Nucl. Med. 47, 492-501 (2006).
  10. Murakami, Y., Takamatsu, H., Taki, J., Tatsumi, M., Noda, A., Ichise, R., Tait, J. F., Nishimura, S. 18F-labelled annexin V: a PET tracer for apoptosis imaging. Eur. J. Nucl. Med. Mol. Imaging. 31, 469-474 (2004).
  11. Yagle, K. J., Eary, J. F., Tait, J. F., Grierson, J. R., Link, J. M., Lewellen, B., Gibson, D. F., Krohn, K. A. Evaluation of 18F-annexin v as a PET imaging agent in an animal model of apoptosis. J. Nucl. Med. 46, 658-666 (2005).
  12. Vaidyanathan, G., Zalutsky, M. R. An improved synthesis of N-succinimidyl 4-[18F]fluorobenzoate and its application to the labeling of a monoclonal antibody fragment. Bioconjugate Chem. 5, 352-356 (1994).
  13. Garg, P. K., Garg, S., Zalutsky, M. R. Fluorine-18 labeling of monoclonal antibodies and fragments with preservation of immunoreactivity. Bioconjugate Chem. 2, 44-49 (1991).
  14. Cai, W., Olafsen, T., Zhang, X., Cao, Q., Gambhir, S. S., Williams, L. E., Wu, A. M., Chen, X. PET imaging of colorectal cancer in xenograft-bearing mice by use of an 18F-labeled T84.66 anti-carcinoembryonic antigen diabody. J. Nucl. Med. 48, 304-310 (2007).
  15. Cai, W., Chen, X. Multimodality molecular imaging of tumor angiogenesis. J. Nucl. Med. 49, 113-128 (2008).
  16. Jong, M. de, Breeman, W. A., Kwekkeboom, D. J., Valkema, R., Krenning, E. P. Tumor imaging and therapy using radiolabeled somatostatin analogues. Acc. Chem. Res. 42, 873-880 (2009).
  17. Fani, M., André, J. P., Maecke, H. R. 68Ga-PET: a powerful generator-based alternative to cyclotron-based PET radiopharmaceuticals. Contrast Media Mol. Imaging. 3, 53-63 (2008).
  18. Shokeen, M., Anderson, C. J. Molecular imaging of cancer with copper-64 radiopharmaceuticals and positron emission tomography (PET. Acc. Chem. Res. 42, 832-841 Forthcoming.
  19. McBride, W. J., Sharkey, R. M., Karacay, H. C., D'Souza, A., Rossi, E. A., Laverman, P., Chang, C. -H., Boerman, O. C., Goldenberg, D. M. A novel method of 18F radiolabeling for PET. J. Nucl. Med. 50, 991-998 (2009).
  20. Becaud, J., Mu, L., Karramkam, M., Schubiger, P. A., Ametamey, S. M., Graham, K., Stellfeld, T., Lehmann, L., Borkowski, S., Berndorff, D., Dinkelborg, L., Srinivasan, A., Smits, R., Koksch, B. Direct one-step 18F-labeling of peptides via nucleophilic aromatic substitution. Bioconjugate Chem. 20, 2254-2261 (2009).
  21. Mu, L., Höhne, A., Schubiger, P. A., Ametamey, S. M., Graham, K., Cyr, J. E., Dinkelborg, L., Stellfeld, T., Srinivasan, A., Voigtmann, U., Klar, U. Silicon-based building blocks for one-step 18F-radiolabeling of peptides for PET imaging. Angew. Chem. Int. Ed. 47, 4922-4925 (2008).
  22. Schirrmacher, R., Bradtmöller, G., Schirrmacher, E., Thews, O., Tillmanns, J., Siessmeier, T., Buchholz, H. G., Bartenstein, P., Wängler, B., Niemeyer, C. M., Jurkschat, K. 18F-labeling of peptides by means of an organosilicon-based fluoride acceptor. Angew. Chem. Int. Ed. 45, 6047-6050 (2006).
  23. Olberg, D. E., Hjelstuen, O. K., Solbakken, M., Arukwe, J., Karlsen, H., Cuthbertson, A. A novel prosthetic group for site-selective labeling of peptides for positron emission tomography. Bioconjugate Chem. 19, 1301-1308 Forthcoming.
  24. Wuest, F., Köhler, L., Berndt, M., Pietzsch, J. Systematic comparison of two novel, thiol-reactive prosthetic groups for 18F labeling of peptides and proteins with the acylation agent succinimidyl-4-[18F]fluorobenzoate ([18F]SFB. Amino Acids. 36, 283-295 (2009).
  25. Vaidyanathan, G., Zalutsky, M. R. Synthesis of N-succinimidyl 4-[18F]fluorobenzoate, an agent for labeling proteins and peptides with 18F. Nat. Protocols. 1, 1655-1661 Forthcoming.
  26. Guhlke, S., Coenen, H. H., Stöcklin, G. Fluoroacylation agents based on small N.C.A. [18F]fluorocarboxylic acids. Appl. Radiat. Isot. 45, 715-727 (1994).
  27. Wester, H. J., Hamacher, K., Stöcklin, G. A comparative study of N.C.A. Fluorine-18 labeling of proteins via acylation and photochemical conjugation. Nucl. Med. Biol. 23, 365-372 (1996).
  28. Wüst, F., Hultsch, C., Bergmann, R., Johannsen, B., Henle, T. Radiolabeling of isopeptide NE epsilon-(γ-glutamyl)-L-lysine by conjugation with N-succinimidyl-4-[18F]fluorobenzoate. Appl. Radiat. Isot. 59, 43-48 (2003).
  29. Zijlstra, S., Gunawan, J., Burchert, W. Synthesis and evaluation of a 18F-labelled recombinant annexin-V derivative, for identification and quantification of apoptotic cells with PET. Appl. Rad. Isot. 58, 201-207 (2003).
  30. Mäding, P., Füchtner, F., Wüst, F. Module-assisted synthesis of the bifunctional labeling agent N-succinimidyl 4-[18F]fluorobenzoate ([18F]SFB. Appl. Rad. Isot. 63, 329-332 (2005).
  31. Marik, J., Sutcliffe, J. L. Fully automated preparation of N.C.A. 4-[18F]fluorobenzoic acid and N-succinimidyl 4-[18F]fluorobenzoate using a Siemens/CTI chemistry process control unit (CPCU). Appl. Rad. Isot. 65, 199-203 (2007).
  32. Johnström, P., Clark, J. C., Pickard, J. D., Davenport, A. P. Automated synthesis of the generic peptide labelling agent N-succinimidyl 4-[18F]fluorobenzoate and application to 18F-label the vasoactive transmitter urotensin-II as a ligand for positron emission tomography. Nucl. Med. Biol. 35, 725-731 (2008).
  33. Tang, G., Zeng, W. B., Yu, M. X., Kabalka, G. Facile synthesis of N-succinimidyl 4-[18F]fluorobenzoate ([18F]SFB) for protein labeling. J Label. Compd. Radiopharm. 51, 68-71 Forthcoming.
  34. Azarian, V., Gangloff, A., Seimbille, Y., Delaloye, S., Czernin, J., Phelps, M. E., Silverman, D. H. S. Synthesis and liposome encapsulation of a novel 18F-conjugate of ω-conotoxin GVIA for the potential imaging of N-type Ca2+ channels in the brain by positron emission tomography. J. Label. Compd. Radiopharm. 49, 269-283 (2006).
  35. Toretsky, J., Levenson, A., Weinberg, I. N., Tait, J. F., Uren, A., Mease, R. C. Preparation of F-18 labeled annexin V: a potential PET radiopharmaceutical for imaging cell death. Nucl. Med. Biol. 31, 747-752 (2004).
  36. Glaser, M., Arstad, E., Luthra, S. K., Robins, E. G. Two-step radiosynthesis of [18F]N-succinimidyl-4-fluorobenzoate ([18F]SFB. J. Label. Compd. Radiopharm. 52, 327-330 (2009).
  37. Carroll, M., Yan, R., Aigbirhio, F., Soloviev, D., Brichard, L. The first nucleophilic synthesis of 3-[18F]fluoroethylbenzoate. J. Nucl. Med. 49, 303P-303P (2008).
  38. Stone-Elander, S., Elander, N. Microwave application in radiolabeling with short-lived positron-emitting radionuclides. J. Label. Compd. Radiopharm. 45, 715-746 (2002).
  39. Guo, N., Alagille, D., Tamagnan, G., Price, R. R., Baldwin, R. M. Microwave-induced nucleophilic [18F]fluorination on aromatic rings: synthesis and effect of halogen on [18F]fluoride substitution of meta-halo (F, Cl, Br, I)-benzonitrile derivatives. Appl. Rad. Isot. 66, 1396-1402 (2008).
  40. Mandap, K. S., Ido, T., Kiyono, Y., Kobayashi, M., Lohith, T. G., Mori, T., Kasamatsu, S., Kudo, T., Okazawa, H., Fujibayashi, Y. Development of microwave-based automated nucleophilic [18F]fluorination system and its application to the production of [18F]flumazenil. Nucl. Med. Biol. 36, 403-409 (2009).
  41. Scott, P. J. H., Shao, X. Fully automated, high yielding production of N-succinimidyl 4-[18F]fluorobenzoate ([18F]SFB), and its use in microwave-enhanced radiochemical coupling reactions. J. Label. Compd. Radiopharm. 53, 586-591 (2010).
  42. Tang, G., Tang, X., Wang, X. A facile automated synthesis of N-succinimidyl 4-[18F]fluorobenzoate ([18F]SFB) for 18F-labeled cell-penetrating peptide as PET tracer. J. Label. Compd. Radiopharm. 53, 543-547 (2010).
  43. Olma, S., Liu, K., Chen, Y. -C., Dam, R. van, Shen, C. K. -F. Microfluidic Droplet Mixer for Fluorine-18 Labeling of Biomolecules. J. Label. Compd. Radiopharm. 52, S10-S10 (2009).
  44. Olma, S., Lambert, J., Barnhardt, E., Liu, K., Shen, C. K. -F., van Dam, R. A compact microwave system for rapid, semi-automated radiosyntheses. J. Label. Compd. Radiopharm. 52, S509-S509 (2009).

Tags

Molekylärbiologi radioaktiv inmärkning mikrovågsugn radiokemi fluor-18 ett-gryta syntes [18F] SFB
Microwave-assisted En pott Syntes av<em> N</em>-Succinimidyl-4-[<sup> 18</sup> F] fluorobenzoate ([<sup> 18</sup> F] SFB)
Play Video
PDF DOI DOWNLOAD MATERIALS LIST

Cite this Article

Hou, S., Phung, D. L., Lin, W.,More

Hou, S., Phung, D. L., Lin, W., Wang, M., Liu, K., Shen, C. K. Microwave-assisted One-pot Synthesis of N-succinimidyl-4-[18F]fluorobenzoate ([18F]SFB). J. Vis. Exp. (52), e2755, doi:10.3791/2755 (2011).

Less
Copy Citation Download Citation Reprints and Permissions
View Video

Get cutting-edge science videos from JoVE sent straight to your inbox every month.

Waiting X
Simple Hit Counter