Waiting
Login processing...

Trial ends in Request Full Access Tell Your Colleague About Jove
Click here for the English version

Neuroscience

Анализ локальных Обработка сети с помощью Multi-контакт Ламинарный электрода Запись

Published: September 8, 2011 doi: 10.3791/2806

Summary

Фундаментальный вопрос в нашем понимании коркового схемотехника, как сети в разных слоях коры кодирования сенсорной информации. Здесь мы описываем электрофизиологические методы использования мульти-контактные электроды ламинарного к записи одной единицы и местных потенциалов области и настоящим анализы для выявления слоях коры.

Abstract

Корковых слоях повсеместно структуры всей коры головного мозга 1-4, которые состоят из высоко периодически локальных сетей. В последние годы значительный прогресс был достигнут в нашем понимании различий в ответ свойств нейронов в различных слоях коры 5-8, тем не менее еще ​​многое осталось узнать о ли и как нейронные популяции кодирования информации в ламинарном конкретных образом.

Существующие многоэлектродной методы массивов, хотя информативным для измерения ответы во многих миллиметров корковых пространстве вдоль поверхности коры, не способны подходить к проблеме ламинарного корковых схем. Здесь мы представляем наш метод для создания и записи отдельных нейронов и местных потенциалов поля (LFPs) через коркового слоя первичной зрительной коре (V1) с использованием мульти-контакт ламинарного электроды (рис. 1; Plextrode U-Probe, Plexon Inc).

Методы включены записывающее устройство строительства, определение коркового слоя, а также определение рецептивных полей отдельных нейронов. Чтобы определить коркового слоя, мы измеряем вызвала отклик потенциалов (ССП) из LFP временных рядов с использованием полного поля мелькнула раздражители. Мы затем выполнить источника тока плотности (КУР) анализ, чтобы определить инверсии полярности сопровождается раковина источника конфигурации на базе слоя 4 (раковина находится внутри слоя 4, впоследствии называемый зернистого слоя 9-12). Текущий источник плотности является полезной, поскольку она обеспечивает индекс местоположение, направление и плотность трансмембранного тока, что позволяет нам точно положение электродов для записи из всех слоев в одном проникновения 6, 11, 12.

Protocol

1. NAN Microdrive строительства

Мы используем U-зонда в комбинации с системой привода электрода NAN. Строительство этой системы требуется 2-3 часов, но когда-то построил это очень просто изменить. Мы начинаем сборку НАН башню, которая включает в себя 4-канальный основания (рис. 2а), NAN камеры (рис. 2б), сетки с 1 мм шагом (рис. 2), 1-4 винт микродиски (Рис. 2d), 1 -4 труб руководство (рис. 2е, 500 мкм в диаметре и сократить примерно до 5-7 см), и 1-4 Microdrive башни (рис. 2е). Для простоты мы будем описывать процедуру для построения системы NAN с одной башни и один U-Probe. После некоторой тренировки, эта процедура обычно занимает 2-3 часов, если все материалы доступны.

  1. Для построения диск НАН электродный узел, первая сборка измерить все инструменты и куски вам нужно (например, трубы руководства, проводник, полный комплект dremil, NAN инструменты и их части и U-зонд). Мера направляющих труб так при подключении к устройству записи они достаточно долго, чтобы почивать на вершине оболочки, не повреждая ее.
  2. Для построения диск НАН электродного узла, первой мерой глубины записи камеры. Затем вырезать направляющих труб с измеряемой длиной около 5-7 см. При резке направляющих труб, необходимо обеспечить, чтобы никакие металлические фрагменты войти внутрь трубки. Использование жесткой проволоки меньше, чем внутренний диаметр направляющей трубы для удаления металлических фрагментов внутри трубки.
  3. Далее, поместите сетку NAN на базе НАН. Затяните винт зажима и сетки винта. Как только база и сетки закреплены, идентифицировать запись интересующей области и заранее направляющую трубу по дну сетки NAN.
  4. Pass направляющую трубу через сетку, пока она составляет около 1-2 мм вне камеры NAN. Как только направляющая трубка находится в нужное положение, начать сборку НАН Microdrive башни.
  5. На каждой башне НАН Microdrive Есть два зажима - двигатель приводит верхней зажим, в то время как нижний зажим может быть как фиксированной на месте или плохо. Прикрепите верхний зажим для укрепления трубки U-Probe. Прикрепите нижний зажим для направляющей трубки и нанесите небольшое количество суперклея для обеспечения направляющая трубка на месте. Эта система является более стабильной и более точным в связи с двумя зажимами, которые прикреплены к укреплению трубки U-Probe.
  6. Тщательно выровняйте кончик U-зонд с верхней направляющей трубки и передать U-зонда через направляющую трубку, пока вы можете защитить башню до основания НАН. Отрегулируйте положение башни с винт так, что не существует добавил напряженности на U-Probe или направляющей трубки.

2. U-Probe стерилизации

Электрод ламинарный или Plextrode U-Probe закупается у Plexon Инк и доступна по цене около $ 2000 - $ 4000. Цена зависит от трех основных аспектах: количество контактных участков, конфигурация сайтов, а диаметр каждого сайта. Мы в настоящее время используется 16-канальная версия с линейной конфигурацией и контакта диаметром 25 мкм. Важно отметить, что толщина U-зонда непосредственно связана с контакт диаметра. В наших экспериментах мы всегда использовали 25 мкм в диаметре контактов, которая равна 360 мкм толщиной. Текущей стоимости для наших версии модели составляет около $ 3500 долларов. U-Probe поставляется упакованной в случае электродов с помощью перемычек и заземления проводов и свинцово-времени от покупки до доставки составляет около 4-6 недель.

  1. Место системы NAN от основания цилиндра и подключить кабели двигателя в соответствующие башни. При использовании нескольких башнях цветных связей почтовый используются, чтобы помочь различать кабели двигателя и башни.
  2. Использование программы НАН программного обеспечения, начинают продвижение U-Probe, либо установить целевые позиции, которая автоматически достижений U-Probe в эту папку или нажмите на ссылку "Вниз" на программный интерфейс NAN. Advance U-зонда, так что как минимум 10 мм наконечник через направляющую трубу прошлого конце камеры NAN.
  3. Для стерилизации U-Probe, место в MetriCide решение Активированный диальдегида в течение 20-30 минут до крепления основания НАН чтобы имплантированные записи камеры. После этого промойте U-Probe и НАН базы стерильной водой.
  4. Нулевой местах НАН программного обеспечения втягивания U-Probe, чтобы кончик прямо внутри направляющей трубки. В программное обеспечение NAN, нажмите нулю все позиции.
  5. Прикрепите к базе НАН имплантированных записи камеры и затяните все четыре винта. Затем выровняйте базы в соответствии с булавку, которая находится на стороне записи камеры. Затяните все четыре винта и убедитесь, что базы НАН надежно прикреплена к записи камеры.

3. Продвижение U-зонд для записи

Учитывая, что прочность и толщина оболочки сильно варьирует между субъектами, мы внедрили общий порядок для продвижения U-Proиспользовать системы НАН Microdrive. Важно отметить, что каждое U-Probe поставляется с подробным анализом каждого контактов сопротивление и общий рейнджер для U-Probe. Мы использовали электроды, чьи контакты сопротивления составляла от 0,3-0,5 МОм. В настоящее время существует сопротивление тестера можно приобрести в Plexon но, к сожалению, во время нашей записи этого устройства не доступны. В результате, мы были не в состоянии выполнять детальный анализ импеданса.

  1. U-Probe остается плавающим (имеет один провод подключенных перемычку на разъемы в нижней части). Headstages крепятся к U-Probe разъем и усилитель подключения кабелей и заземлены.
  2. Начальное продвижение около 1-2 мм должен быть быстрым и сильным. Установите параметр скорости в диапазоне 0,1 - 0,2 мм / сек и глубиной шага до 0,2 - 0,3 мм. Эти значения будет гарантировать, что U-зонд способен прокол оболочки чисто и является важным первым шагом в записи.
  3. Как только через оболочки, снижение скорости до 0,050 -0,1 мм / сек и уменьшить глубину шага до 0,05 - 0,1 мм. Цель состоит в продвижении U-Probe так гладко и медленно, как возможно такое, что ни ткань повреждена. Одним из признаков того, что зонд вошел в мозг изменение амплитуды LFP сопровождается сокращением уровня шума (наложение текста: локальный потенциал поля).
  4. Чтобы убедиться, что электрод, охватывающих все слои коры, измерять изменение амплитуды в ответ на полное поле стимул белую вспышку. Изменения амплитуды LFP во времени лежат в основе анализа вызвали отклик потенциал. Этот анализ служит основой для определения слоях коры.

4. Идентификация и проверка коркового слоя

Мы внедрили процедуру выявления корковых слоев с помощью вызвала отклик потенциал (ПРП) парадигмы и источника тока плотности (КУР) анализа. Мы полагались на КУР, поскольку она обеспечивает индекс местоположение, направление и плотность трансмембранного тока, что позволяет нам точно положение электродов для записи из всех слоев в одном проникновения. В самом деле, Карл Шредер и его коллеги ранее комбинированные ламинарного записи, microlesion, и гистологических реконструкции с целью проверки эффективности ERP / CSD метод функциональной идентификации коркового слоя в V1 9-12. Другие методы, использующие спонтанно генерируемых колебаний были использованы для определения глубины коры, таких как корковые шпинделей и вверх / вниз государств 13-15.

Для этого анализа, мы используем МКУР инструментов для MATLAB, который вычисляет КУР по второй пространственной производной LFP временных рядов по одинаковом расстоянии контакты U-Probe ( http://software.incf.org/ программное обеспечение / csdplotter / дома ) 9,10,16,17.

  1. Чтобы определить коркового слоя, мера вызвала отклик потенциала при пассивной задачей фиксации разоблачая при условии полного поля черный экран, который мигает белым в течение 100 мс, а затем возвращается к черному. Эта последовательность представляет собой один судебный процесс, который повторяется 200 раз.
  2. Приобретение Plexon Многоканальный процессор сохраняет все непрерывные сигналы данных непосредственно в записи компьютера через борт National Instruments PCI. После того как данные сохранены, начать обработку сигналов для источника тока плотностью анализа.
  3. Использование программного обеспечения коррекции FPAlign предоставляемые Plexon исправить временные задержки в LFP сигналов индуцированного фильтры в headstages и предварительного усиления плит.
  4. На данный момент данные передаются в MATLAB с Neuroexplorer. Каждый канал LFP фильтруется с использованием стандартных высоких и фильтр нижних частот с частотами среза от 0,5 Гц и 100 Гц. После каждого контакта электрода был отфильтрован, идентифицировать каждого испытания и среднем по испытаний, чтобы получить средний LFP временные ряды для каждого контакта электрода. Затем организовать каждого контакта в матрицу с LFP амплитуды как функции времени.
  5. Выполнить МКУР (наложение текста: источника тока плотности) в панели инструментов MATLAB, набрав CSDplotter в рабочей области. Учитывая, что частота дискретизации непрерывных данных составляет 1 кГц, установите параметр DT до 1 мс. Далее, установите значение проводимости коры до 0,4 См / м (это приблизительно равна плотности тока источника в единицах nanoamperes на кубический миллиметр) и изменить положение электрода в качестве вектора [0.1:0.1:1.6] с учетом количества контактов. Когда все параметры были вставлены нажмите "Run This".
  6. Просмотр профиля КУР в CSDplotter интерфейс и вставить его в новую фигуру. Общие функции в MATLAB, такие как imagesc могут быть использованы для построения слой профиля, а также различные алгоритмы сглаживания и нормализации функции могут быть применены для представления данных CSD и сравнивая уровень идентификации через часи сессий.
  7. Для определения полярности сопровождается раковина источника конфигурации на базе слой 4, во-первых, проверьте наличие первичной тонут в зернистого слоя с использованием профиля ламинарного КУР. Найдите раковина приводом отрицательной полярности в сюжете КУР. Затем вычислить центра массы гранулированного раковину.
  8. Центр тяжести получается из анализа, состоящий из числа контактов и время, когда раковина была большая. Контакте с раковиной тяжести служит гранулированный опорного слоя при 0 мкм. Анализ всех контактов выше и ниже ссылки и сгруппировать их в один из трех возможных уровней: supragranular, гранулированных и infragranular.
  9. Проверка гранулированных мойки, шарканье электрода позиции оставляя временной области без изменений. После перетасовки CSD матрицы, вычисление центра тяжести анализ еще раз. Перетасовка электрода контакты как функция коры глубина должна уничтожить все ламинарного специфику.

5. Идентификация отдельных нейронов и восприимчивым отображение поля

Мы имели большой успех с изолирующими и запись нескольких отдельных единиц из U-Probe. На записи обычно, мы можем рассчитывать на 6-10 хорошо изолированные единицы и 14-16 локальные сигналы потенциальном поле. Поиск отдельных единиц также является более надежной с U-Probe сравнению с одиночными электродами. Даже если бы нужно было использовать все необходимые аппаратные средства, чтобы точно заранее 16 электродов, они не были бы в состоянии исследовать сеть населения в зависимости от коркового слоя настолько точно, насколько с U-Probe. Наконец, мы обычно можем с той же U-зонда на 30-40 проникновений.

  1. Чтобы найти рецептивных полей, начинайте, представляя обратный стимул корреляции на монитор, где рецептивных полей, потенциально находятся. Стимул состоит из четырех решетки ориентации на 0, 45, 90 и 135 градусов.
  2. Выполните кластерного анализа стрельбы карты скорость, чтобы найти рецептивного поля. Во-первых, вычислить максимальный темп стрельбы местах и ​​их тяжести для каждого времени задержки. Затем, рассчитать расстояние между центром тяжести и этих местах максимальной скорости стрельбы. Вычислить карты стрельбы ставки на каждом пространственного положения для проведения задержки между 40 - 120 мс при 5 мс интервалы для каждого нейрона отдельно.
  3. Найти общее расстояние между центром тяжести и окружающих огневых точек максимальная скорость за все время задержки. Рецептивного поля находится на временной задержкой, что сводит к минимуму этого расстояния.
  4. Как только рецептивного поля находится для каждой ячейки, настоящее обратный стимул корреляции больше всех восприимчивы подразделениях на местах перекрывал все рецептивных полей в записанном населения. В режиме реального времени скорострельность участок может быть использован для определения правильного восприимчивы подразделениях на местах не выявлено.
  5. И наконец, удалить отдельные подразделения, которые резко меняют свои ответы и только сохранить единицы со стабильной стрельбы ставки для дальнейшего анализа. Кроме того, выберите запись сайты с лучшими сигнал-шум.

6. Представитель Результаты: Записи одного подразделения и LFPs через корковые слои из первичной зрительной коры

Один из самых важных шагов в анализ с использованием ламинарного электродов надежно идентифицировать коркового слоя и убедиться в этом идентификация по много часов и сессий. Таким образом, мы измерили вызвала отклик потенциалов (ССП) из LFPs через ламинарный контактов в ответ на полное поле вспыхнула раздражителя (рис. 3а). Рисунок 3b представляет собой пример типа информации, необходимо получить для того, чтобы вычислить источника тока плотности (CSD) для выявления слоях коры. Затем мы использовали анализ КУР LFP временных рядов для определения полярности сопровождается раковина источника конфигурации на базе слоя 4. Рисунок 4а показывает анализ КУР в локализации коркового слоя коры по всей глубине, как функцию времени - положение supragranular (SG), зернистые (G) и infragranular (ИГ) слоев оставались стабильными даже через четыре часа после начала сессии записи. На рисунке 4б содержит CSD следы, которые представляют собой среднее значение этих контактов назначен данный слой - в этом примере, зернистый слой подвергается отчетливое снижение КУР амплитуды на ~ 50 мс. Этот анализ служит основой назначить электрода контакты выше и ниже зернистого слоя, чтобы supragranular и infragranular слоев, соответственно (контакт с крупнейшим раковину центра масс служила гранулированных опорного слоя при 0 мкм).

Другой критический анализ с использованием ламинарного электрод, чтобы точно идентифицировать и локализовать рецептивного поля нейронов. Эта процедура имеет жизненно важное значение для позиционирования стимулом для создания самой надежной ответ от нейронов. На рисунке 5а является пример двух восприимчивы участки поля нейронов в первичной зрительной кортех (V1). Происхождение этих участков фиксации точки, которая является небольшой белый круг отображается централизованно на черном экране компьютера. Цвет в этих участков представляет скорострельность каждого нейрона в ответ на стимул динамической обратной корреляции. Мы используем эту информацию для позиционирования стимулом для данного эксперимента (например, синусоидальные решетки). Стимулы, которые представлены больше, чем средний размер восприимчивой области, с тем чтобы охватить восприимчивы местах поле всех одновременно зарегистрированных нейронов.

После того как мы определить коркового слоя и положение стимула в оптимальном месте восприимчивы поле, мы можем перейти к экспериментальной протокол, в котором мы представляем различные визуальные стимулы в то время как животное выполняет либо фиксации или дискриминации задач. После эксперимента, мы выполняем наши спайк-анализ формы волны, чтобы изолировать одну-единицы, мы смогли записать тот же канал. Эта процедура часто занимает некоторое время, чтобы освоить и постоянно совершенствуется в качестве нового программного обеспечения для анализа и методики были доступны. На рисунке 5б является примером типа вывода можно было бы ожидать после использования Offline Сортировщик Plexon в. С помощью этого программного обеспечения, один изоляторе осуществляется путем визуального осмотра. Отдельное кластеров определены на основе веса первой и второй основных компонентов, шипованные ширины, долине, а пик свойствами.

Рисунок 1
Рисунок 1. Multi-контакт ламинарного электродами с использованием мульти-контактные электроды ламинарным, мы записали одновременно пики активности отдельных нейронов изолированной и LFP подразделений по всей коркового слоя V1. Каждый U-Probe состоит из 16 равноотстоящих (100 мкм) электрод контакты охватывающих общую длину 1,6 мм. Каждый электрод контакта составляет 25 мкм в диаметре и состоит из платины иридий.

Рисунок 2
Рисунок 2. NAN сетки строительства системы НАН Microdrive обеспечивает дополнительную стабильность и точность над классическими винт управляемых Microdrive. Каждая группа электродов независимо манипулировать в плоскостях XY, в пределах определенной пользователем рабочего диапазона. Каждая группа электродов независимо манипулировать в направлении Z в пользовательской рабочей глубине (до 100 мм) и переменную диапазоне скоростей от 0,001 мм / сек до 0,5 мм / сек и с высоким разрешением в 1 микрометр () 4. - канала базы, (б) НАН камеры, (в) сетки с 1 мм шагом, (г) 1-4 микродиски винт, (д) 1-4 труб руководство (500 мкм в диаметре и сократить примерно до 5-7 см) , (е) 1-4 башни Microdrive и (г) завершила НАН системы и основания цилиндра.

Рисунок 3
Рисунок 3. Вызванные ответ потенциальные парадигмы и LFP временных рядов (а) определить коркового слоя, мы измерили вызвала отклик потенциал (ПРП) во время пассивного задача фиксации в то время как обезьяны подвергались всего месторождения черный экран, который мелькнул белый (~ 1 Гц) на 100 мс, а затем вернулся к черному. (б) LFP ответы записаны с ламинарным U-Probe были обработаны для получения ERP следы для каждого контакта. Зернистого слоя была определена во всех сессиях, за счет размещения раковины управляемой инверсии в амплитуду реакции в следы ERP, а также наличием инверсии полярности сопровождается раковина источника конфигурации на базе слоя 4. Пунктирную рамку указывает сроки период времени, когда инверсия произошла.

Рисунок 4
Рисунок 4. Слой Идентификация использованием источника тока плотностью анализа () источника тока плотностью анализ (на базе 2-й пространственной производной LFP временных рядов) была использована для определения полярности сопровождается раковина источника конфигурации на базе зернистого слоя. Мы оценили как стабильное определение коркового слоя сохраняется в течение долгого времени (слева направо). В этих примерах текущего приемника (синий) представляет зернистого слоя и охватывает около 400 мкм. (Б) CSD следы ниже каждого участка представляют средний CSD этих контактов назначен данного слоя. Это позволило нам определить точное время начальной раковиной (в этих примерах ~ 50-60 мс. CSD следа конверты представляют стандартное отклонение и черные полоски указывают на длительность стимула мелькнула (100 мс).

Рисунок 5
Рисунок 5. Спайк сортировки и восприимчивым отображение поля () Во-первых, половина визуальные степени рассчитывается и два раза. Затем, обратная корреляция стимулы представлены в пятна на ЭЛТ-монитор сonsisting ориентированных решетки на 0, 45, 90 и 135 градусов. Стрельба ставки для каждого нейрона рассчитывается независимо друг от друга на 5 интервалов мс от 40 до 120 мс после стимула представлена ​​для каждого пространственного расположения. Максимальная стрельбы ставки рассчитываются, а затем центр тяжести для каждого времени задержки. Тогда в каждой задержке расстояние между центром тяжести и прилегающих стрельбы местах ставка рассчитывается. Временная задержка с минимального расстояния выбрана в качестве рецептивного поля. (Б) Спайк сигнала свойства, такие как высота пика, долину глубиной, пик времени долине, время пика или долины, и т.д. анализируются с помощью программного обеспечения форума сортировки ( Plexon). Шипы сортируются на основе аналогичных свойств, пока сигналы от одного нейрона сгруппированы без перекрытия от другого.

Рисунок 6
Рисунок 6. Перетасовываются CSD профиля. Той же Конвенции, как на рис 3а, но мы провели перетасовки процедура, которая в случайном порядке новые CSD матрица с места контакта смешанные. Этот анализ используется для проверки лучше гранулированного мойки, шарканье электрода позиции оставляя временной области без изменений. Из этих примеров отображается в течение долгого времени, тасуя электрода контакты как функция коры глубиной уничтожает любую ламинарного специфику.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Discussion

Multi-единицы записи стали стандартом для анализа того, как нейронные сети в коре кодирования стимул информации. Учитывая последние достижения в области электрода технологии, реализация ламинарного электродов обеспечивает беспрецедентный характеристику местных корковых схем. Хотя многоэлектродной записи предлагают полезную информацию о динамики нейронной активности населения, несколько электродов ламинарного позволяют более высокое разрешение и больше информации о конкретном месте нейронов. Так как кора состоит из слоев с анатомически различных входов и выходов, при этом возникает вопрос о том, как сенсорная информация обрабатывается везде одинаково в этих слоях.

Мы представили новый метод записи использованием мульти-контактные электроды ламинарного к записи местной сетевой активности в зависимости от коркового слоя в первичной зрительной коре (V1). Важно, что мы также внедрили метод анализа локальный потенциал поля во время вызвала отклик парадигмы для выявления слоях коры. Мы также предоставили подробные результаты рецептивного поля отображения процедур и спайк-сигнала анализа.

Мы признаем, что ламинарный электроды не без ограничений, в первую очередь стабильность записи. Мы консультируем тех, кто использует эту технику, чтобы терпеливо заранее электрода и позволяют достаточное количество времени для мозга урегулировать после продвижения (мы обычно рекорд за 45 минут до 1 часа после последнего заранее). В течение этого времени мы будем запускать многочисленные глаза калибровки, восприимчивым отображение, и вызвала отклика потенциальных парадигм.

Мы смогли улучшить наши записи на основе направляющую трубу, которая крепится к основанию NAN с винтом Microdrive. Мы также изменение стандартного U-Probe дизайн за счет снижения кончиком углом от 30 до 25 градусов. В результате U-Probe был острее позволяет гладко проникновения через оболочки. Это возможно с резче электрода повреждение тканей кончика и кровотечение может произойти. Кровотечение может покрыть электрод контактов и предотвращения чистой изоляторе. Мы протестировали эту теорию записи как с 30 и 25 углов степени наконечник и способны решить более единиц больше, чем проникновение и даже продлить жизнь U-Probe.

Как уже упоминалось выше, мы обычно заранее еще в начале и быстро замедляться, как только мы прошли через оболочки. Мы считаем, что эта процедура в сочетании с тем острее кончик угла привело нас к одной несколько лабораторий в состоянии решить одну активности устройства с помощью U-Probe. Наша деятельность одного подразделения и общую стабильность записи напрямую связана с длиной время мы позволяем мозгу урегулировать после U-Probe продвижения.

Эта технология будет только процветать, как более лабораторий будет использовать эти методы. В настоящее время в разработке и реализации хронически имплантируемых массивов идет полным ходом и, скорее всего, заменит многоэлектродной сеток. Кроме того, массивы, содержащие электроды с несколькими контактами вдоль валов (по существу, несколько U-зонды) в настоящее время разрабатываются параллельно.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Disclosures

Нет конфликта интересов объявлены.

Acknowledgments

Мы благодарим Е. Ван для дискуссий и Сорин Pojoga для поведенческого обучения. Поддержка NIH EUREKA Программа, Национальный Глазной Институт, программы Pew Ученые, Джеймс С. McDonnell Foundation (ВД) и NIH Видение Обучение Грант (BJH).

Materials

Name Company Catalog Number Comments
Nan microdrive system NAN Instruments NAN-S4 Figure 2. Custom clamps are needed to use the U-Probe. Everything mentioned with exception of the U-Probe is provided by NAN instruments.
Screw microdrives MIT Machine shop Anything that is able to secure a guide tube to the NAN grid should be appropriate.
Stainless Steel Guide Tubes Small Parts, Inc. B00137QHNS (1) or B00137QHO2 (5) These are 60 in long and cut to size in the laboratory using a Dremel hand drill
Plexon U-Probe Plexon PLX-UP-16-25ED-100-SE-360-25T-500 See U-Probe specifications available at www.plexon.com Also see Figure 1.
Table 1. Hardware.
NAN software NAN Instruments Computer interface requires an additional serial port to accommodate the Plexon system and the NAN hardware
Offline Sorter, FPAlign, PlexUtil, MATLAB programs Plexon Under ’Installation Packages’
Neur–xplorer NeuroExplorer Under ’Resources’
CSDplotter Version 0.1.1 Klas H. Petterson
Table 2. Software.

DOWNLOAD MATERIALS LIST

References

  1. Hubel, D. H., Wiesel, T. N. Receptive fields and functional architecture of monkey striate cortex. J Physiol. 195, 215-243 (1968).
  2. Mountcastle, V. B. Modality and topographic properties of single neurons of cat's somatic sensory cortex. J Neurophysiol. 20, 408-434 (1957).
  3. Nassi, J. J., Callaway, E. M. Parallel processing strategies of the primate visual system. Nat Rev Neurosci. 10, 360-372 (2009).
  4. Ringach, D. L., Hawken, M. J., Shapley, R. Dynamics of orientation tuning in macaque primary visual cortex. Nature. 387, 281-284 (1997).
  5. Martinez, L. M. Receptive field structure varies with layer in the primary visual cortex. Nat Neurosci. 8, 372-379 (2005).
  6. Lakatos, P., Karmos, G., Mehta, A. D., Ulbert, I., Schroeder, C. E. Entrainment of neuronal oscillations as a mechanism of attentional selection. Science. 320, 110-113 (2008).
  7. Sun, W., Dan, Y. Layer-specific network oscillation and spatiotemporal receptive field in the visual cortex. Proc Natl Acad Sci U S A. 106, 17986-17991 (2009).
  8. Maier, A., Adams, G. K., Aura, C., Leopold, D. A. Distinct superficial and deep laminar domains of activity in the visual cortex during rest and stimulation. Frontiers in Systems Neuroscience. 4, 12-12 (2010).
  9. Mitzdorf, U. Current source-density method and application in cat cerebral cortex: investigation of evoked potentials and EEG phenomena. Physiol Rev. 65, 37-100 (1985).
  10. Mitzdorf, U., Singer, W. Excitatory synaptic ensemble properties in the visual cortex of the macaque monkey: a current source density analysis of electrically evoked potentials. J Comp Neurol. 187, 71-83 (1979).
  11. Schroeder, C. E., Mehta, A. D., Givre, S. J. A spatiotemporal profile of visual system activation revealed by current source density analysis in the awake macaque. Cereb Cortex. 8, 575-592 (1998).
  12. Schroeder, C. E., Tenke, C. E., Givre, S. J., Arezzo, J. C., Vaughan, H. G. Striate cortical contribution to the surface-recorded pattern-reversal VEP in the alert monkey. Vision Res. 31, 1143-1157 (1991).
  13. Amzica, F., Steriade, M. Cellular substrates and laminar profile of sleep K-complex. Neuroscience. 82, 671-686 (1998).
  14. Kandel, A., Buzsaki, G. Cellular-synaptic generation of sleep spindles, spike-and-wave discharges, and evoked thalamocortical responses in the neocortex of the rat. J Neurosci. 17, 6783-6797 (1997).
  15. Sakata, S., Harris, K. D. Laminar structure of spontaneous and sensory-evoked population activity in auditory cortex. Neuron. 64, 404-418 (2009).
  16. Nicholson, C., Freeman, J. A. Theory of current source-density analysis and determination of conductivity tensor for anuran cerebellum. J Neurophysiol. 38, 356-368 (1975).
  17. Pettersen, K. H., Devor, A., Ulbert, I., Dale, A. M., Einevoll, G. T. Current-source density estimation based on inversion of electrostatic forward solution: effects of finite extent of neuronal activity and conductivity discontinuities. J Neurosci Methods. 154, 116-133 (2006).
  18. Vaknin, G., DiScenna, P. G., Teyler, T. J. A method for calculating current source density (CSD) analysis without resorting to recording sites outside the sampling volume. J Neurosci Methods. 24, 131-135 (1988).

Tags

Neuroscience выпуск 55 ламинарный зонды коркового слоя локального поля потенциалов население кодирования
Анализ локальных Обработка сети с помощью Multi-контакт Ламинарный электрода Запись
Play Video
PDF DOI DOWNLOAD MATERIALS LIST

Cite this Article

Hansen, B. J., Eagleman, S., Dragoi, More

Hansen, B. J., Eagleman, S., Dragoi, V. Examining Local Network Processing using Multi-contact Laminar Electrode Recording. J. Vis. Exp. (55), e2806, doi:10.3791/2806 (2011).

Less
Copy Citation Download Citation Reprints and Permissions
View Video

Get cutting-edge science videos from JoVE sent straight to your inbox every month.

Waiting X
Simple Hit Counter