Summary
intraluminal मध्य मस्तिष्क धमनी रोड़ा मॉडल (MCAO) प्रयोगात्मक ischemic स्ट्रोक मॉडलों के बीच सबसे अक्सर इस्तेमाल मॉडल है. यहाँ हम लेजर डॉपलर flowmetry की गाइड के साथ विस्तार में पूरे मॉडल, और उसके प्रतिनिधि परिणाम प्रदर्शन करेंगे.
Abstract
स्ट्रोक मृत्यु का तीसरा प्रमुख कारण है और दुनिया में विकलांगता के प्रमुख कारण २००९ 1,2 में संयुक्त राज्य अमेरिका में एक के पास 70 अरब डॉलर की अनुमानित लागत के साथ है . intraluminal मध्य मस्तिष्क धमनी रोड़ा मॉडल (MCAO) 4 कोइज़ुमी द्वारा 1986 में विकसित किया गया था चूहे में इस impactful मानव विकृति अनुकरण. MCAO विधि का एक संशोधन के बाद 3 Longa द्वारा प्रस्तुत किया गया था. दोनों तकनीकों का व्यापक रूप से किया गया है ischemic स्ट्रोक और संभावित चिकित्सात्मक रूपरेखा 5 से उत्पन्न मस्तिष्क की चोट के आणविक तंत्र की पहचान करने के लिए इस्तेमाल किया. चूहों में यह अपेक्षाकृत noninvasive विधि चूहों में उपयोग ट्रांसजेनिक और पीटा उपभेदों 6,7 का लाभ लेने के लिए बढ़ा दिया गया है. मॉडल फोकल मस्तिष्क ischemia करने के लिए, एक intraluminal सीवन एमसीए के आधार रोक देना आंतरिक मन्या धमनी के माध्यम से उन्नत है. Retracting समय की एक निर्दिष्ट अवधि के बाद सिवनी सहज reperfusion mimics, लेकिन सीवन भी स्थायी रूप से बनाए रखा जा सकता है. यह वीडियो एक stepwise फैशन में चूहों में intraluminal MCAO प्रक्रिया के प्रदर्शन के लिए दो प्रमुख दृष्टिकोण का प्रदर्शन किया जाएगा, के रूप में के रूप में अच्छी तरह से संभावित कमियां और नुकसान के लिए अंतर्दृष्टि प्रदान. ischemic मस्तिष्क के ऊतकों बाद 2,3,5 triphenyltetrazolium क्लोराइड (टीटीसी) द्वारा दाग जाएगा मस्तिष्क रोधगलन 8 की हद तक का मूल्यांकन.
Protocol
इस प्रोटोकॉल संस्थागत पशु की देखभाल के द्वारा अनुमोदित किया गया था और फ्लोरिडा के विश्वविद्यालय में समिति (IACUC) का उपयोग करें और "प्रयोगशाला पशु की देखभाल के सिद्धांत" (एनआईएच प्रकाशन सं 86-23, 1985 संशोधित) के साथ अनुपालन में है.
1. माल
- जानवर: पुरुष C57BL / 6 (Harlan प्रयोगशालाओं, इंडियानापोलिस, में, संयुक्त राज्य अमरीका) चूहों सर्जरी के समय में 20-26 ग्राम वजन.
- संज्ञाहरण:
- संज्ञाहरण मशीन: VetEquip साँस लेना संज्ञाहरण प्रणाली (VetEquip इंक, Pleasanton, सीए, संयुक्त राज्य अमरीका).
- संवेदनाहारी साँस लेना: Isoflurane (बैक्सटर फार्माक्युटिक्स, Deerfield, आईएल).
- सर्जिकल उपकरण: SuperCut परितारिका कैंची, सीधे (विश्व परिशुद्धता उपकरण, Inc, Sarasota, FL, संयुक्त राज्य अमेरिका), Vannas कैंची - सूक्ष्म, सीधे (विश्व प्रेसिजन उपकरण, Inc, Sarasota, FL, संयुक्त राज्य अमेरिका), Dumont (संदंश ठीक टिप, 45 ° तुला, सुझावों विश्व परिशुद्धता उपकरण, Inc, Sarasota, FL, संयुक्त राज्य अमेरिका), द्विध्रुवी जमावट इकाई (उच्च आवृत्ति 900 desiccator, विश्व परिशुद्धता उपकरण, Inc, Sarasota, FL, संयुक्त राज्य अमरीका), माइक्रो पोत (क्लिप विश्व परिशुद्धता उपकरण, Inc, Sarasota, FL, संयुक्त राज्य अमेरिका)
- शल्य चिकित्सा की आपूर्ति: बाँझ कपास युक्तियाँ, पोंछे, धुंध स्पंज, सिवनी (7-0 सिल्क सीवन, Ethicon, Inc, Somerville, न्यू जर्सी, संयुक्त राज्य अमरीका), ऊतक (Vetbond, 3M कंपनी, सेंट पॉल, MN, संयुक्त राज्य अमरीका) चिपकने वाला, सर्जिकल साफ़ Bethadine, 70% इथेनॉल, और बाँझ 0.9 खारा%, नेत्र मरहम (Puralube डॉक्टर मरहम, Pharmaderm, मेलविल, एनवाई, संयुक्त राज्य अमरीका).
- आड़ सीवन तैयारी MCAO के लिए:
- एमसीए रोड़ा के लिए फिलामेंट: 7-0 शल्य नायलॉन monofilament सिवनी (Ethicon, Inc, Somerville, न्यू जर्सी, संयुक्त राज्य अमरीका).
- हीट सीवन टिप (थर्मल दाग़ना यूनिट, विश्व परिशुद्धता उपकरण, Inc, Sarasota, FL) blunting के लिए स्रोत है.
- तरल सिलिकॉन रबर (RTV सिलिकॉन चिपकने वाला, विश्व प्रेसिजन उपकरण इंक, Sarasota, FL, संयुक्त राज्य अमरीका).
- / सर्जिकल माइक्रोस्कोप विदारक (Leica स्टीरियो माइक्रोस्कोप MZ6).
- फाइबर ऑप्टिक प्रकाशक (फाइबर ऑप्टिक प्रकाशक FO1-150, TechniQuip कार्पोरेशन, लिवरमोर, सीए, संयुक्त राज्य अमेरिका).
- लेजर डॉपलर flowmetry (PeriFlux प्रणाली 5000, Perimed, स्टॉकहोम, स्वीडन).
- लचीले microtip (मीट्रिक टन B500-0 सीधे Microtip Perimed, स्टॉकहोम, स्वीडन)
- तापमान पैरामीटर:
- गुदा तापमान मॉनिटर (बैट-12, विश्व परिशुद्धता उपकरण, Inc, Sarasota, FL).
- थर्मल कंबल (टी / पंप, TP600, Gaymar, NY, संयुक्त राज्य अमरीका).
- धुंधला और मात्रा रोधगलितांश के मात्रात्मक माप:
- 2% समाधान 2,3,5-triphenyltetrazolium क्लोराइड (2% टीटीसी, सिग्मा Aldrich कं, सेंट लुइस, MO, संयुक्त राज्य अमरीका).
- चूहे मस्तिष्क मैट्रिक्स slicer (Zivic मिलर लैब. इंक, एलीसन पार्क, फिलीस्तीनी अथॉरिटी, संयुक्त राज्य अमरीका).
- डिजिटल कैमरा (V1253, कोडक कंपनी, Rochester, NY, संयुक्त राज्य अमरीका).
- छवि जम्मू सॉफ्टवेयर (ImageJ 1.42q सॉफ्टवेयर, अमेरिकी राष्ट्रीय स्वास्थ्य संस्थान, बेथेस्डा, MA, संयुक्त राज्य अमरीका).
2. पूर्व शल्य चिकित्सा कदम
- सर्जरी से पहले, चूहों पानी और कृंतक चाउ करने के लिए स्वतंत्र पहुँच के साथ एक 0:12 / प्रकाश अंधेरे चक्र के अंतर्गत रखे जाते हैं.
- MCAO लिए Sutures गर्मी और तरल सिलिकॉन रबर के साथ अपनी नोक से सिवनी शाफ्ट के 3-4mm कोटिंग के साथ सीवन टिप 1-2mm blunting द्वारा तैयार कर रहे हैं, यह (7-0 सूखी अनुमति, टिप व्यास, 0.20-0.25mm, कोटिंग लंबाई, 3-4mm, सीवन लंबाई 11-13mm). बाँझपन aforementioned चरणों के सभी में संरक्षित किया जाना चाहिए.
- माउस वजन के बाद, संज्ञाहरण एक प्रेरण कक्ष में 4 isoflurane% के साथ प्रेरित किया है और साथ 1.5-2% 30% 2 हे और 70% एन 2 हे एक facemask के माध्यम से गैस मिश्रण में isoflurane प्रक्रिया के दौरान बनाए रखा.
- माउस एक प्रवण स्थिति में एक धुंध ऑपरेटिंग तापमान नियंत्रित सतह (थर्मल कंबल) पर झूठ बोल पैड पर रखा गया है, फर सिर मुंडा है.
- स्नेहक नेत्र मरहम दोनों आंखों के लिए लागू किया जाता है, और पलकें शल्य चिकित्सा प्रक्रिया के दौरान आंख desiccation को रोकने के लिए बंद हो जाती हैं.
- एक midline चीरा (1 सेमी) बेहतर डब लाइन से nasion और त्वचा पार्श्व खींच लिया है एक लचीला microtip प्रत्यय (, 0.5mm व्यास B500-0 सीधे Microtip मीट्रिक टन) calvarium overlying त्वचा पर किया जाता है. microtip सीधा सही पार्श्विका खोपड़ी की सतह (1 पीछे मिमी और 5 bregma करने के लिए पार्श्व मिमी) लेजर डॉपलर flowmetry द्वारा एमसीए क्षेत्र में रक्त के प्रवाह की निगरानी के लिए रखा गया है.
- यकीन है कि लचीला microtip खोपड़ी से जुड़ा हुआ है दृढ़ता से पहले जानवर एक लापरवाह स्थिति के लिए चालू है. जानवर की गर्दन एक नरम पैड पर रखा है और अपनी नाक संवेदनाहारी तंत्र की नाक शंकु में आयोजित किया जाता है. यह लचीला microtip के लिए पर्याप्त जगह होने में परिणाम होगा.
- एक गुदा तापमान जांच के लिए 37 0.5 ± ° सी. के एक निरंतर जानवर कोर तापमान बनाए रखने के लिए डाला जाता है
- दोनों forepaws और hindpaws ऑपरेटिंग मंच सतह टेप कर रहे हैं, और पूंछ गुदा ट्यूब टेप है. </ Ol>
- ऑपरेटिंग माइक्रोस्कोप के तहत, एक midline गर्दन चीरा manubrium और जबड़े के बीच कैंची के साथ धीरे ढीली त्वचा को हटाने के द्वारा बनाई गई है.
- बनती अंतर्निहित अवअधोहनुज ग्रंथियों दो टूक बाईं बगल में छोड़ दिया ग्रंथि के साथ विभाजित कर रहे हैं. सही अवअधोहनुज ग्रंथि cranially से मुकर गया है और sternocleidomastoid मांसपेशियों के साथ साथ सुरक्षित है.
- omohyoid मांसपेशियों को कवर मन्या म्यान के उजागर विभाजन ध्यान पिकप के साथ विभाजित है.
- ध्यान से और सही आम मन्या धमनी (सीसीए) vagus तंत्रिका और उसके म्यान (स्थित सीसीए के लिए पार्श्व) से अलग अलग है.
- इसके बाद, हट जाना 2 शल्य चिकित्सा पद्धतियों कि अक्सर इस्तेमाल किया गया है एमसीए रोड़ा प्रदर्शन:
- तीन ढीले कॉलर sutures (7-0 रेशम) सही सीसीए के आसपास तैयार कर रहे हैं.
- बाह्य मन्या धमनी (ईसीए) की पहचान की है, अलग, और cauterized (विभाजन करने के लिए बाहर का 2-3mm). यह बाद में सूक्ष्म कैंची से विभाजित किया जा सकता है. दाग़ना साइट पर अनजाने परिधीय नुकसान से बचने के लिए, बिजली 1 में शक्ति घुंडी का उपयोग कर स्थापित किया जाना चाहिए. यह सभी cauterizations के लिए संगत है.
- पर्याप्त तनाव सबसे प्रॉक्सिमल सीसीए पर कॉलर सीवन रक्त के प्रवाह को रोक देना (स्थायी ligation) करने के लिए लागू किया जाता है. प्रवाह रोड़ा आधारभूत cortical छिड़काव मूल्यों की एक ~ 50% ड्रॉप के द्वारा सत्यापित है.
- फिर एक पोत क्लिप सीसीए विभाजन से पहले बस में रखा गया है arteriotomy के समय में पतित प्रवाह से बचने के.
- एक arteriotomy प्रॉक्सिमल ligated सिवनी और सूक्ष्म कैंची (करीब ligation के लिए) के साथ सीसीए पर पोत क्लिप के बीच किया जाता है.
- सिलिकॉन लेपित गर्मी पा 7-0 नायलॉन सीवन arteriotomy के माध्यम से पेश किया है और उन्नत जब तक यह पोत क्लिप पहुँचता है. 2 शेष ढीले कॉलर sutures arteriotomy और पोत क्लिप वापस सीसीए के माध्यम से प्रवाह रिसाव से बचने के लिए, सावधानी के साथ धमनियों की दीवार नहीं घाव के बीच धीरे सीसीए के आसपास कड़ा, तब पोत क्लिप वापस ले लिया है.
- ईसीए की पहचान है, जितना संभव के रूप में में dissected (बहुभाषी और दाढ़ की हड्डी का धमनियों में अपने विभाजन के निकट), cauterized (1 पर सेट शक्ति के साथ), और सूक्ष्म कैंची से विभाजित.
- दो ढीले कॉलर sutures (7-0 रेशम) बस सीसीए विभाजन ऊपर प्रॉक्सिमल आईसीए के आसपास तैयार कर रहे हैं.
- सीसीए अस्थायी रूप से एक पोत क्लिप के साथ बंद कर दिया है. प्रवाह रोड़ा आधारभूत cortical छिड़काव मूल्यों की एक ~ 50% ड्रॉप के द्वारा सत्यापित है.
- तो आईसीए दो ढीले कॉलर sutures के ऊपर एक पोत क्लिप arteriotomy के समय में पतित प्रवाह से बचने के साथ अस्थायी रूप से बंद कर दिया है.
- एक arteriotomy परिलक्षित ईसीए स्टंप के करीब में सूक्ष्म कैंची का उपयोग किया जाता है.
- सिलिकॉन लेपित गर्मी पा 7-0 नायलॉन सीवन ईसीए में arteriotomy के माध्यम से पेश किया है और उन्नत तक यह लागू आईसीए में पोत क्लिप पहुंचता है. 2 प्रॉक्सिमल आईसीए में ढीले कॉलर sutures धीरे प्रॉक्सिमल आईसीए के आसपास कड़ा हैं आईसीए के माध्यम से पर्याप्त ध्यान नहीं धमनियों की दीवार घाव के साथ भाटा रक्त प्रवाह से बचने के; तब पोत क्लिप वापस ले लिया है.
- occluding सीवन धीरे कपाल बेस की ओर आंतरिक मन्या धमनी (आईसीए) के माध्यम से उन्नत है जब तक एक हल्के प्रतिरोध महसूस किया है. (= 80%) प्रतिशत आधारभूत की तुलना के रूप में एक मस्तिष्क रक्त के प्रवाह के मूल्य में समवर्ती ड्रॉप लेजर डॉपलर flowmetry द्वारा की पुष्टि की है. 2 कॉलर sutures डाला फिलामेंट के आसपास कड़ा कर रहे हैं.
- क्षणिक मस्तिष्क ischemia प्रयोगों के लिए, occluding सीवन धीरे 45 मिनट के बाद वापस ले लिया है. इस बार बिंदु विभिन्न प्रयोगात्मक उद्देश्य के लिए बदल किया जा सकता है है.
- सीवन फिलामेंट वापस लेने के बाद, arteriotomy साइट के लिए शल्य चिकित्सा के बाद खून बह रहा से बचने के लिए बंद कर दिया है. कोइज़ुमी विधि में, यह सुरक्षित सीसीए के आसपास कॉलर sutures कस शामिल है. Longa तकनीक में ईसीए के आधार पर arteriotomy साइट cauterized है, तो प्रॉक्सिमल आईसीए में कॉलर sutures के ढीला और मन्या के प्रवाह को बहाल करने के लिए हटा दिया.
- चीरा बंद करने के लिए, अवअधोहनुज ग्रंथि और SCM सहकारी क्षेत्र पर रखी हैं. घाव किनारों तो ग्रीवा ऊतक चिपकने वाला और खोपड़ी के क्षेत्रों के साथ approximated हैं. वैकल्पिक रूप से, एक absorbable सीवन या धातु प्रधान घाव खासकर जब पशुओं के दीर्घकालिक अस्तित्व का इरादा है बंद करने के लिए इस्तेमाल किया जा सकता है.
- चीरा बंद होने के बाद जानवर 1 मिलीलीटर गर्म खारा subcutaneously प्राप्त मात्रा पुनःपूर्ति के रूप में. उपयुक्त दर्दनाशक दवाओं की एक खुराक (यानी buprenorphine पर 0.05-0.1 मिलीग्राम / किग्रा) के लिए वसूली अवधि के दौरान जानवर दर्द और परेशानी को कम करने के लिए इस्तेमाल किया जाना चाहिए. एनिमामैं शल्य सूट से हटा दिया है और एक गर्म वसूली क्षेत्र / पिंजरे में रखा हाइपोथर्मिया मुक्त नरम भोजन और पानी के लिए आसान पहुँच के साथ, को रोकने के लिए.
- कोई नमूदार घाटा
- contralateral forepaw (हल्के फोकल neurologic घाटा) का विस्तार करने के लिए विफलता
- एक contralateral दिशा में चक्कर के लिए रोधगलितांश (मध्यम फोकल neurologic घाटा)
- एक contralateral दिशा में गिर करने के लिए रोधगलितांश (गंभीर फोकल neurologic घाटा)
- सहज आंदोलन के बिना चेतना का उदास स्तर
- एमसीए reperfusion के 24 घंटे के बाद, जीवित माउस तौला है, गहराई से 4% isoflorane के साथ anesthetized और अनुमोदित प्रोटोकॉल के अनुसार बलिदान.
- मस्तिष्क और हटा दिया जाता है ध्यान से एक माउस मस्तिष्क मैट्रिक्स slicer में रखा, और पूरे मस्तिष्क coronally 2 मिमी अंतराल पर sectioned है.
- अनुभाग 2% टीटीसी फॉस्फेट में 37 buffered खारा (पीबीएस) ° 20 मिनट के लिए सी में डूब रहे हैं. टीटीसी धुंधला के बाद, infracted क्षेत्र में एक सफेद (अस्थिर) लाल (व्यवहार्य) ईंट ऊतक (चित्रा 1) के लिए आसन्न ऊतकों के रूप में दिखाया गया है.
- सीरियल वर्गों एक डिजिटल कैमरा और रोधगलितांश के क्षेत्र छवि जम्मू कार्यक्रम के साथ मापा का उपयोग कर फोटो खिंचवाने हैं.
- रोधगलितांश के क्षेत्र (सफेद, बेदाग) ipsilateral गोलार्द्ध (सफेद और लाल ईंट, दाग) के क्षेत्र, और contralateral गोलार्द्ध (लाल ईंट, दाग) के क्षेत्र में प्रत्येक अनुभाग के लिए मापा जाता है. मात्रा के सभी वर्गों में प्रतिनिधि क्षेत्रों संक्षेप और टुकड़ा मोटाई से गुणा करके गणना की है. Edema के लिए सही करने के बाद, रोधगलन की मात्रा की गणना 9 के रूप में निम्नानुसार है:
सही infarct वॉल्यूम (CIV),% = [contralateral गोलार्द्ध मात्रा (ipsilateral गोलार्द्ध मात्रा - रोधगलितांश मात्रा)] / contralateral गोलार्द्ध मात्रा x 100
3. एमसीए रोड़ा सर्जरी:
कोइज़ुमी 4 विधि
Longa 3 विधि
प्रक्रिया के बाकी बड़े पैमाने पर संसृत है:
4. पोस्ट-op स्नायविक मूल्यांकन
बाद पशु कुल होश आ, न्यूरोलॉजिकल घाटा एक साधारण पैमाने पर (पांच सूत्री पैमाने) के द्वारा मूल्यांकन किया जा सकता है के रूप में 3 इस प्रकार हैं:
5. धुंधला और मस्तिष्क रोधगलितांश की मात्रा के मात्रात्मक माप
6. प्रतिनिधि परिणाम
रोड़ा और बाईं सीसीए के माध्यम से एमसीए के reperfusion क्षणिक मस्तिष्क ischemia की स्थापना के बाद, पशुओं का बलिदान और उनके coronally sectioned दिमाग टीटीसी के साथ दाग रोधगलितांश (चित्रा 1) की मात्रा का मूल्यांकन कर रहे हैं.
चित्रा 1. टीटीसी से सना हुआ सीरियल चूहों से राज्याभिषेक मस्तिष्क वर्गों (2 मिमी) एमसीए रोड़ा के अधीन है .
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Discussion
MCAO मॉडल एक स्थापित मॉडल है कि murine प्रजातियों में मस्तिष्क ischemia replicates है. यह मॉडल पहले चूहों में इस्तेमाल किया गया था और उसके बाद चूहों को अनुकूलित. Craniectomy शल्य चिकित्सा में गड़बड़ी की रक्त मस्तिष्क बाधा पारगम्यता और intracranial दबाव पर प्रभाव को खत्म करने से बचना इस तकनीक का एक फायदा है. हालांकि, तनाव संबंधी 10 मतभेद, सीवन टिप 11, 6 रोड़ा, शरीर के तापमान 12, 13 संज्ञाहरण की अवधि के आकार, और अन्य कारकों के रूप में कई चर, इस मॉडल में रोधगलितांश मात्रा में विसंगति के लिए नेतृत्व कर सकते हैं .
वहाँ विशिष्ट तकनीकी जानकारी का उल्लेख है कि वारंट हैं:
- सीवन के अंत कोटिंग कम वेध जोखिम के साथ एमसीए occluding के लिए एक चिकनी और प्रबंध सीवन पैदा करेगा.
- नाजुक अलग और सुरक्षित आसन्न धमनियों से vagus तंत्रिका तो यह अनजाने में एक कॉलर सिवनी में ही सीमित नहीं है. दो कॉलर sutures का उपयोग करने के लिए प्रतिगामी खून बह रहा से बचने के arteriotomy के माध्यम से, जबकि occluding सीवन आरोही और उन्हें धीरे कसने के लिए धमनियों की दीवार traumatizing से बचने के लिए सुनिश्चित करें.
- pterygopalatine धमनी सीसीए विभाजन के बाद आईसीए से diverges. आईसीए के बजाय pterygopalatine धमनी में आरोही सीवन की नोक deviating से बचने के लिए, अपने शल्य चिकित्सा के लिए एक सीधी दिशा में माउस सिर और गर्दन रखने के लिए मंच सेट. यह विचलन दोनों कोइज़ुमी और Longa तकनीक आम है, तो देखभाल या तो प्रक्रिया में लिया जाना चाहिए.
- लेजर डॉपलर flowmetry विभिन्न संरचनात्मक क्षेत्रों में रक्त के प्रवाह की वास्तविक समय की निगरानी की एक विधि है, और हमारे मस्तिष्क एमसीए के माध्यम से आपूर्ति के क्षेत्र में रक्त के प्रवाह को मापने के लिए प्रयोग में लागू है. यह काफी सीवन स्थिति की सटीकता बढ़ जाती है, और इस तरह अनुरूप परिणाम प्राप्त करने सुनिश्चित करता है. यह कम सटीक तकनीक पर डाला जा सीवन, जो संरचनात्मक रूपांतरों के हस्तक्षेप करने के लिए अतिसंवेदनशील है की लंबाई को मापने के एक प्रख्यात लाभ है.
- जबकि सीसीए और आईसीए के माध्यम से अपने सीवन डालने लेजर डॉपलर flowmetry में एक अस्थायी वृद्धि सुनिश्चित करता है कि आप सही दिशा में आगे बढ़ रहे हैं और एमसीए ostium के लिए बंद है.
- पश्चकपाल धमनी सबसे अक्सर एक posterolateral दिशा में प्रॉक्सिमल ईसीए (हालांकि कभी कभी आईसीए से) से उठता है. यह पहचान की जानी चाहिए (कुछ मामलों में ligated) बाद में भ्रम से बचने के समय सीवन डालने.
- रोधगलन की परिवर्तनशीलता को कम करने के लिए, सर्जरी के दौरान माउस शरीर का तापमान स्थिर रखने और सर्जरी के बाद हाइपोथर्मिया से बचने.
- टीटीसी का प्रयोग करें रोधगलितांश मात्रा का विश्लेषण करने के लिए उचित MCAO सर्जरी के बाद 72 घंटे के लिए धुंधला हो जाना. के लिए अब अस्तित्व समय अंक cresyl वायलेट धुंधला जैसे अन्य धुंधला तरीकों का उपयोग करने के लिए रोधगलितांश आकार निर्धारित.
| कोइज़ुमी विधि | Longa विधि | |
| सीवन प्रविष्टि के साइट | Ipsilateral आम मन्या धमनी | Ipsilateral बाहरी मन्या धमनी |
| स्थायी धमनी बलिदान | आम मन्या और बाहरी मन्या धमनियों | बाह्य मन्या धमनी |
| घातक intraoperative / टूटना नकसीर धमनी का जोखिम | कम चिंता का विषय | ग्रेटर चिंता |
| सीवन मोड़ के Pterygopalatine धमनी में संभावना | हां | हां |
| प्रक्रियात्मक समय | आम तौर पर तेज | आम तौर पर अब |
| लेजर डॉपलर Flowmetry: आधारभूत से प्रतिशत ड्रॉप | > = 80% | > = 80% |
| लेजर डॉपलर Flowmetry: / रोड़ा reperfusion की प्रवृत्ति |
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तालिका 1 चूहों में दो intraluminal मध्य मस्तिष्क धमनी रोड़ा (MCAO) के तरीके की तुलना.
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Disclosures
लेखक घोषणा की कि वे हितों का कोई टकराव है.
Materials
| Name | Type | Company | Catalog Number | Comments |
| Male C57BL/6 mice | Animal | Harlan Laboratories | 20-26 grs | |
| Dissection microscope | Microscope | Leica Microsystems | 6.3:1 zoom | |
| Fiber optic illuminator | Illuminator | TechniQuip Corp., Livermore, CA, USA | FO1–-150 | |
| Isoflurane | Anesthesia | Baxter Internationl Inc. | 1001936060 | |
| SuperCut Iris scissor, straight | Surgical tool | World Precision Instruments, Inc. | 14218 | |
| Vannas micro-scissor, straight | Surgical tool | World Precision Instruments, Inc. | 14003 | |
| Dumont fine tip forceps | Surgical tool | World Precision Instruments, Inc. | 503290 | |
| Vessel clip | Surgical tool | World Precision Instruments, Inc. | 14120 | |
| High Frequency Desiccator 900 | Surgical tool | World Precision Instruments, Inc. | 500397 | |
| 7-0 surgical Nylon monofilament suture | Suture | Ethicon Inc. | 1647G | Suture for occlusion |
| 7-0 surgical Silk suture | Suture | Ethicon Inc. | 7733G | Suture for ligation |
| Silicone RTV adhesive | Silicone rubber | World Precision Instruments, Inc. | 1571 | |
| Vetbond | Tissue adhesive | 3M | 70200746587 | |
| Puralube Vet Ointment | Eye ointment | Pharmaderm Animal Health | ||
| Buprenorphine hydrochlorode | Analgesics | Hospira Inc. | NDC 0409-2012-32 | |
| Thermal Cautery Unit | World Precision Instruments, Inc. | 501292 | ||
| PeriFlux System 5000 | TCD flowmetry | Perimed | ||
| BAT-12 | Rectal thermometer | World Precision Instruments, Inc. | BAT-12R | |
| T/PUMP, TP600 | Thermal blanket | Gaymar Industries | ||
| 2,3,5-triphenyltetrazolium chloride | Reagent | Sigma-Aldrich | T8877 | |
| Mice brain matrix slicer | Brain slicer | Zivic Instruments | BSMAS001-1 |
References
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